【摘要】：背景:在軟骨組織工程材料中,以透明質(zhì)酸為代表的多聚糖材料因具備良好的材料細胞作用界面,有利于軟骨細胞的生長,成為近年來的研究熱點。目的:探究負載軟骨細胞的透明質(zhì)酸可注射材料修復(fù)大鼠軟骨缺損的可行性。方法:取90只SD大鼠,制備軟骨缺損模型,造模后第2天隨機分3組干預(yù),實驗組關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射負載軟骨細胞的透明質(zhì)酸水凝膠,對照組關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射透明質(zhì)酸水凝膠,空白對照組不進行干預(yù)。注射后1,3,6周取修復(fù)部位軟骨組織,進行蘇木精-伊紅染色、Masson染色、掃描電鏡觀察及血紅素氧合酶表達、膠原水平檢測。結(jié)果與結(jié)論:①蘇木精-伊紅染色:注射后6周,空白對照組以肉芽組織填充修復(fù)區(qū);對照修復(fù)部位被黃白色修復(fù)組織填滿,與正常軟骨邊界明顯,表面不平整,淋巴細胞較3周時減少;實驗組修復(fù)組織呈半透明狀,與正常軟骨邊界模糊,淋巴細胞較3周時明顯減少;②Masson染色:注射后6周,實驗組修復(fù)區(qū)膠原纖維合成狀況最佳,其次為對照組,均強于空白對照組;③掃描電鏡觀察:注射后6周,空白對照組修復(fù)區(qū)膠原纖維排列不規(guī)則,部分斷裂;對照組修復(fù)區(qū)膠原纖維排列較整齊,仍可見部分斷裂;實驗組實驗部位膠原纖維排列整齊,與正常軟骨邊緣分界不明;④血紅素氧合酶表達與膠原水平:注射后6周,實驗組血紅素氧合酶表達高于對照組、空白對照組(P0.05);實驗組注射后1,3,6周的膠原水平高于對照組、空白對照組(P0.05);⑤結(jié)果表明:負載軟骨細胞的透明質(zhì)酸可注射材料可促進大鼠軟骨缺損的修復(fù)。
【圖文】：

饣質(zhì)跏奔?20±15)min，平均出血量(10±2)mL，90只大鼠中2只因麻醉、1只因術(shù)中操作失誤出現(xiàn)大失血死亡，2只因術(shù)后感染被剔除觀察范圍，均于術(shù)后補充完整。注射后觀察6周，所有存活大鼠傷口愈合情況良好，未出現(xiàn)神經(jīng)損傷、切口裂開等術(shù)后并發(fā)癥。2.2各組光學(xué)顯微鏡下組織學(xué)觀察結(jié)果空白對照組注射后1周時修復(fù)部位可見少許肉芽紅色組織，偶見淋巴細胞浸潤；3周時組織變白，邊界清晰，淋巴細胞較前增多；6周時肉芽組織顯著增加，已填滿修復(fù)部位，淋巴細胞明顯減少。對照組注射后1周時已被白色的再生組織充滿，與正常圖1各組注射后不同時間點軟骨缺損處病理學(xué)觀察結(jié)果(蘇木精-伊紅染色，×200)Figure1Pathologicalobservationineachgroupatdifferenttimeafterinjection(hematoxylin-eosinstaining,×200)圖注：注射后6周時，空白對照組肉芽組織填滿修復(fù)部位，淋巴細胞較3周時明顯減少；對照組修復(fù)部位被黃白色修復(fù)組織填滿，與正常軟骨邊界明顯，表面不平整，淋巴細胞較3周時減少；實驗組修復(fù)組織呈半透明狀，與正常軟骨邊界模糊，淋巴細胞較3周時明顯減少。圖2各組注射后6周時軟骨缺損區(qū)Msaaon染色結(jié)果(×200)Figure2Massonstainingresultsat6weeksafterinjectionineachgroup(×200)圖注：圖中A為空白對照組，膠原纖維合成情況不佳，骨細胞不成熟；B為對照組，骨細胞開始成熟；C為實驗組，成熟骨細胞較多。圖3各組注射后6周軟骨缺損區(qū)掃描電鏡觀察結(jié)果(×2000)Figure5Scanningelectronmicroscopeobservationofthedefectregionat6weeksafterinjectionineachgroup(×2000)圖注：圖中A為空白對照組，膠原纖維排列不規(guī)則，部分斷裂；B為對照組，膠原纖維排列較整齊，仍可見部分斷裂；C為實驗組，膠原纖維排列整齊，與正常軟骨邊緣分界?

唬嘬馨拖赴鉷饗?減少。對照組注射后1周時已被白色的再生組織充滿，與正常圖1各組注射后不同時間點軟骨缺損處病理學(xué)觀察結(jié)果(蘇木精-伊紅染色，×200)Figure1Pathologicalobservationineachgroupatdifferenttimeafterinjection(hematoxylin-eosinstaining,×200)圖注：注射后6周時，空白對照組肉芽組織填滿修復(fù)部位，淋巴細胞較3周時明顯減少；對照組修復(fù)部位被黃白色修復(fù)組織填滿，與正常軟骨邊界明顯，表面不平整，淋巴細胞較3周時減少；實驗組修復(fù)組織呈半透明狀，與正常軟骨邊界模糊，淋巴細胞較3周時明顯減少。圖2各組注射后6周時軟骨缺損區(qū)Msaaon染色結(jié)果(×200)Figure2Massonstainingresultsat6weeksafterinjectionineachgroup(×200)圖注：圖中A為空白對照組，膠原纖維合成情況不佳，骨細胞不成熟；B為對照組，骨細胞開始成熟；C為實驗組，成熟骨細胞較多。圖3各組注射后6周軟骨缺損區(qū)掃描電鏡觀察結(jié)果(×2000)Figure5Scanningelectronmicroscopeobservationofthedefectregionat6weeksafterinjectionineachgroup(×2000)圖注：圖中A為空白對照組，膠原纖維排列不規(guī)則，部分斷裂；B為對照組，膠原纖維排列較整齊，仍可見部分斷裂；C為實驗組，，膠原纖維排列整齊，與正常軟骨邊緣分界不明�？瞻讓φ战M對照組實驗組注射后1周注射后3周注射后6周ABCABC

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