【摘要】：[摘要] 目的探討磷酰膽堿修飾的新型海藻酸-殼聚微囊包裹胰島對(duì)微囊生物相容性的影響。 方法應(yīng)用靜電微囊發(fā)生技術(shù)獲得磷酰膽堿修飾的海藻酸-殼聚糖微囊；通過(guò)紅外光譜分析和X射線光電子能譜分析,來(lái)鑒定磷酰膽堿是否成功接枝于殼聚糖上；利用考馬斯亮藍(lán)法分別測(cè)定單純殼聚糖和磷酰膽堿修飾的殼聚糖對(duì)牛血清白蛋白的吸附量；通過(guò)AO/PI染色檢測(cè)微囊胰島細(xì)胞活力；采用葡萄糖刺激試驗(yàn)評(píng)價(jià)微囊胰島和單純胰島的胰島素釋放功能；將海藻酸-殼聚糖-磷酰膽堿微囊(實(shí)驗(yàn)組)和海藻酸-殼聚糖微囊(對(duì)照組)分別植入小鼠腹腔,4周后回收微囊,計(jì)數(shù)回收微囊量,并通過(guò)HE染色評(píng)價(jià)囊周纖維化情況。 結(jié)果所得微囊大小均一,表面光滑；紅外光譜和X射線光電子能譜分析均證實(shí)磷酰膽堿成功修飾殼聚糖；單位質(zhì)量的殼聚糖及磷酰膽堿修飾物所吸附的蛋白質(zhì)量分別為189.4μg/mg和90.5μg/mg,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=5.549,P0.05)；AO/PI染色可見(jiàn)微囊胰島細(xì)胞活性尚可；微囊植入腹腔后,實(shí)驗(yàn)組囊表面細(xì)胞反應(yīng)較對(duì)照組輕微,未見(jiàn)明顯的纖維化形成,實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的微囊回收率分別為(69.6±10.8)%和(10.45±1.95)%,P0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；實(shí)驗(yàn)組微囊包裹胰島與單純胰島在低糖溶液中,胰島素濃度分別是(3.298±1.680)uIU/ml和(4.299±1.159)uIU/ml(t=1.096,P0.05),而在高糖溶液中分別是(11.783±4.175)uIU/ml和(12.875±2.268)uIU/ml(t=0.514,P0.05),均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 結(jié)論磷酰膽堿修飾后,可顯著減少殼聚糖對(duì)蛋白質(zhì)的吸附,改善體內(nèi)海藻酸-殼聚糖微囊的纖維化情況。因此,磷酰膽堿修飾可提高海藻酸-殼聚糖微囊的生物相容性,同時(shí)不影響微囊胰島生物學(xué)功能,更適用于微囊胰島移植治療糖尿病。
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圖3. A海藻酸-殼聚糖微囊，，B海藻酸-殼聚糖-磷酰膽堿微囊，C海藻酸-克聚糖-磷酰膽堿微囊包裹胰島（X 100倍）2.a惪岬╪懦曬π奘慰薔厶

本文編號(hào)：2547317