發(fā)布時(shí)間：2019-07-02 15:36

【摘要】：低溫保存后的卵母細(xì)胞在使用前必須要去除冷凍保護(hù)劑,目前常用的分步法去除步驟繁瑣,容易丟失細(xì)胞,而且會(huì)對(duì)細(xì)胞造成致命的滲透損傷。為減小細(xì)胞滲透損傷,設(shè)計(jì)制作適合卵母細(xì)胞保護(hù)劑去除的微流體裝置,研究微流控線性法去除豬MII期卵母細(xì)胞低溫保護(hù)劑時(shí)在不同時(shí)間(6、8、10 min)下卵母細(xì)胞的體積變化,以及對(duì)卵母細(xì)胞存活率與發(fā)育率的影響;并與傳統(tǒng)的去除方法(一步法和分步法)進(jìn)行比較。結(jié)果表明,采用微流體裝置線性去除冷凍保護(hù)劑,8 min為實(shí)驗(yàn)中的最優(yōu)去除時(shí)間;線性法能夠明顯減小細(xì)胞的滲透損傷,其最大歸一化滲透膨脹體積為1.12±0.07,卵母細(xì)胞的存活率、卵裂率及囊胚率分別達(dá)到83.6%、72.4%、21.5%,均顯著高于一步法和分步法(P0.05)。因此,微流控線性去除冷凍保護(hù)劑能夠顯著減小細(xì)胞的滲透損傷,為卵母細(xì)胞低溫保存技術(shù)提供新思路。
[Abstract]:Cryopreserved oocytes must remove cryoprotectants before using them. At present, the common step-by-step removal steps are tedious, easy to lose cells, and can cause fatal osmotic damage to cells. In order to reduce cell osmotic injury, a microfluidic device suitable for oocyte protectant removal was designed and made to study the changes of oocyte volume at different time (6, 8, 10 min) and the effect on oocyte survival and development rate at different time (6, 8, 10 min) when the cryopreservation agent was removed by microfluidic linear method, and compared with the traditional removal methods (one-step method and step-by-step method). The results showed that 8 min was the optimal removal time in the experiment, and the maximum normalized osmotic expansion volume was 1.12 鹵0.07, and the survival rate, blastocyst rate and blastocyst rate of oocytes were 83.6%, 72.4% and 21.5%, respectively, which were significantly higher than those of one-step method and step-by-step method (P 0.05). Therefore, microfluidic linear removal of cryoprotectants can significantly reduce the osmotic damage of cells and provide a new idea for cryopreservation of oocytes.
【作者單位】： 上海理工大學(xué)生物熱科學(xué)研究所;上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(51376132)
【分類號(hào)】：R318.52

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本文編號(hào)：2509053