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蛋白激酶信號級聯(lián)Akt在大鼠脊髓損傷后的誘導(dǎo)表達(dá)

發(fā)布時間:2018-12-10 12:09
【摘要】:目的研究蛋白激酶信號級聯(lián)蛋白激酶B(Akt)在大鼠脊髓損傷(SCI)后的表達(dá)變化,以及對SCI后運(yùn)動功能恢復(fù)的影響,從而為SCI的修復(fù)提供分子學(xué)機(jī)制依據(jù)。方法采用改良Allen′s打擊器制成大鼠SCI模型。大鼠分為3組:假手術(shù)組(Sham組)、干預(yù)組(Int組)、對照組(Con組)。分別于術(shù)后1、7、14d采用免疫組織化學(xué)、蛋白免疫印跡法(Western blot)和實時熒光定量-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測Akt mRNA和蛋白的表達(dá),并采用Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)運(yùn)動功能評分評價大鼠SCI后運(yùn)動恢復(fù)情況。結(jié)果 Sham組在Akt蛋白和mRNA水平上呈低水平表達(dá),SCI后Akt的表達(dá)水平明顯提高;Akt上游磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)的抑制劑LY294002可明顯抑制Akt的表達(dá),并阻止SCI后自發(fā)性運(yùn)動功能恢復(fù)。結(jié)論 SCI后激活的蛋白激酶信號Akt可能是參與SCI后神經(jīng)保護(hù)和修復(fù)的重要干預(yù)環(huán)節(jié)。
[Abstract]:Objective to study the expression of protein kinase signal cascade protein kinase (B (Akt) after spinal cord injury (SCI) in rats and its effect on the recovery of motor function after SCI, so as to provide a molecular basis for the repair of SCI. Methods the rat SCI model was made by using the modified Allen's batter. Rats were divided into 3 groups: sham operation group (Sham group), intervention group (Int group) and control group (Con group). The expression of Akt mRNA and protein were detected by immunohistochemistry, Western blot (Western blot) and real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (RT-PCR) on the 1st and 7th day after operation. The motor recovery after SCI was evaluated by Basso-Beattie-Bresnahan (BBB) motor function score. Results the expression of Akt protein and mRNA was low in Sham group, and the expression level of Akt was significantly increased after SCI. LY294002, an inhibitor of phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K) in upstream of Akt, significantly inhibited the expression of Akt and prevented the recovery of spontaneous motor function after SCI. Conclusion the activated protein kinase signal Akt after SCI may play an important role in neuroprotection and repair after SCI.
【作者單位】: 川北醫(yī)學(xué)院附屬第二臨床醫(yī)學(xué)院;四川省南充市中心醫(yī)院骨科;四川省南充市中心醫(yī)院影像中心;川北醫(yī)學(xué)院組織工程與干細(xì)胞研究所;
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項目(81100929)
【分類號】:R318.04

【共引文獻(xiàn)】

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