ATP生物熒光法對DUWLs微生物污染的監(jiān)測研究及過氧化氫納米銀離子干預(yù)效果評價
發(fā)布時間:2018-06-28 20:17
本文選題:牙科綜合治療臺 + 水路污染; 參考:《南京醫(yī)科大學(xué)》2016年博士論文
【摘要】:ATP生物熒光法對DUWLs微生物污染的監(jiān)測研究及過氧化氫納米銀離子干預(yù)效果評價牙科綜合治療臺(dental comprehensive unit, DCU)是口腔診療中不可或缺的主要設(shè)備之一,其水路系統(tǒng)(dental unit waterlines, DUWLs)由一套狹窄而復(fù)雜的細孔塑料軟管相互連接而成,功能亦相對復(fù)雜,主要有在診療過程中為牙科手機和活髓牙治療提供冷卻水、為三用槍提供沖洗水,給患者提供漱口水、為痰盂提供沖洗水等。文獻顯示,口腔綜合治療臺水路存在嚴(yán)重的微生物污染,菌落總數(shù)可高達106cfu/ml,多種病原微生物如銅綠假單胞菌、嗜肺軍團菌、大腸桿菌、阿米巴、真菌等以浮游菌和生物膜的形式存在于DUWLs中,可隨手機轉(zhuǎn)動時噴出的水霧及三用槍用水進入患者口中,成為牙科診療交叉感染的潛在危險因素。半個多世紀(jì)以來,關(guān)于DUWLs微生物污染的問題己日益受到重視,然而仍有不少問題待研究,目前亟待解決的問題有:1.口腔科用水的監(jiān)測,我國目前尚無相關(guān)規(guī)范規(guī)定其監(jiān)測內(nèi)容、方法、頻率及標(biāo)準(zhǔn),多由醫(yī)院自行制定,但資料顯示,為數(shù)不少的專科醫(yī)院和基層診所尚未將其納入日常監(jiān)測的范圍,管理上存在盲區(qū)。2.水路管理方案的制定,盡管文獻報道應(yīng)用于DUWLs處理的方法有很多,但能夠達到良好效果并普及應(yīng)用的尚無定論。不同方案各有優(yōu)劣,難以同時滿足水路管理方案的綜合要求:抗菌有效、成本較低、節(jié)省人力、對環(huán)境、器械及人體無害。因此,本研究針對上述兩個問題,擬開展牙科綜合治療臺水路污染監(jiān)測與控制的相關(guān)研究,為臨床提供參考。目的:1.探討ATP生物熒光法用于DUWLs微生物污染監(jiān)測的可行性,尋找對DUWLs微生物污染簡便易行的動態(tài)監(jiān)測方法。2.評價一種新型的消毒劑過氧化氫納米銀離子對DUWLs微生物污染的干預(yù)效果和生物安全性,尋找抗菌有效,成本較低,相對安全的干預(yù)方法。3.通過一種新型牙科綜合治療臺獨立儲水罐的設(shè)計,希望在較低的成本前提下,便捷地實現(xiàn)罐內(nèi)消毒液體的定量定時抽取,實時動態(tài)且節(jié)省人力的消毒功能。方法:1)實驗一:對18臺牙科綜合治療臺54個采樣點共采集108份水樣,其中牙科手機、三用槍和漱口出水口處水樣各36份,同時采用傳統(tǒng)菌落培養(yǎng)計數(shù)法和ATP生物熒光采樣檢測法兩種監(jiān)測方法同時進行細菌含量的監(jiān)測,評價ATP熒光技術(shù)用于監(jiān)測不同程度水路污染的可行性。2)實驗二:通過菌落計數(shù)法對大型三甲專科醫(yī)院DUWLs不同部位采樣點的細菌含量進行基線監(jiān)測,激光共聚焦顯微鏡和掃描電鏡觀測DUWLs內(nèi)壁生物膜的形態(tài)和結(jié)構(gòu),細菌分析儀分析水路中的致病菌構(gòu)成,了解DUWLs的污染現(xiàn)狀和污染控制難點。并比較比較四種不同的消毒劑:0.2%過氧化氫納米銀離子消毒劑(Sanosil)、5.25%次氯酸鈉消毒劑(NaClO)、3%過氧化氫消毒劑(H202)對DUWLs和0.2%的洗必泰(Chlorhexidine, CHX)對DUWLs進行周期性消毒,研究過氧化氫納米銀離子對水路的消毒效果及對生物膜結(jié)構(gòu)的影響。3)實驗三:通過cck-8法研究四種不同的消毒劑:過氧化氫納米銀離子消毒劑(Sanosil)、次氯酸鈉消毒劑(NaClO)、過氧化氫消毒劑(H202)和洗必泰(Chlorhexidine, CHX)在不同濃度時在體外對人口腔黏膜上皮細胞作用2小時和24小時的細胞毒性,比較不同消毒劑使用的生物安全性。4)實驗四:通過一種新型牙科綜合治療臺獨立儲水罐的設(shè)計,在較低的成本前提下,便捷地實現(xiàn)罐內(nèi)消毒液體的定量定時抽取,從而可能實現(xiàn)對DUWLs實時動態(tài)的消毒功能。結(jié)果:1)實驗一:ATP生物熒光法監(jiān)測結(jié)果與菌落計數(shù)法比較具有顯著正相關(guān)(R=0.719,P0.01),通過ATP熒光法判定水路中的細菌含量是否合格與菌落計數(shù)法比較具有高度一致性(Kappa值=0.833),靈敏度=88.9%,特異度=94.4%。2)實驗二:①實驗中未對DUWLs進行定期消毒的DCU中存在嚴(yán)重的污染,其平均菌落數(shù)為4.015*103 cfu/ml,共發(fā)現(xiàn)12種條件致病菌,以革蘭陰性菌為主,在水管內(nèi)壁觀測到厚薄不均,相互連接聚集呈片狀、條索狀或網(wǎng)狀,混雜大量球菌和桿菌的生物膜。②四種化學(xué)消毒劑均可有效降低水路中細菌含量和殺滅條件致病菌,但過氧化氫納米銀離子的消毒持續(xù)時間長于其它組,激光共聚焦顯微鏡觀測顯示對生物膜的破壞效果:過氧化氫納米銀離子次氯酸鈉雙氧水洗必泰。3)實驗三:四種消毒劑中在常用的消毒濃度下與人口腔上皮黏膜細胞作用一定時間下均可產(chǎn)生細胞毒性,但0.2%過氧化氫納米銀離子消毒劑和0.2%的洗必泰毒性等級為中度毒性(2級),5.25%次氯酸鈉和3%過氧化氫毒性等級為重度毒性(4級)。4)實驗四:通過一種牙科綜合治療臺的獨立儲水罐的設(shè)計,要點包括罐體、可拆卸式定量取液組件。定量取液組件包括外罩、取液泵、電動推桿、定量容液罐,取液泵和電動推桿。所述外罩采用筒形塑料制成,外罩的頂部設(shè)有連接治療臺的上螺紋口,外罩的底部設(shè)有連接罐體的下螺紋口;取液泵包括取液罐,取液罐內(nèi)由下至上依次設(shè)有下閥門、活塞、上閥門、推拉桿和連桿;采用可拆卸式設(shè)計,安裝拆卸方便,在拆卸下即使不使用定量抽取功能,也不影響正常的取液使用。該種牙科綜合治療臺的獨立儲水罐,可在較低的成本前提下,便捷地實現(xiàn)對罐內(nèi)液體的定量抽取,實現(xiàn)對牙科綜合治療臺實時動態(tài)的消毒功能。結(jié)論:1)生物熒光檢測法和傳統(tǒng)菌落計數(shù)法在水路污染的監(jiān)測中具有高度一致性。ATP生物熒光技術(shù)可作為牙科綜合治療臺水路污染監(jiān)測的一種快速簡便的初篩方法。2)本研究發(fā)現(xiàn)過氧化氫納米銀離子不僅可以有效的減少水路中的菌落總數(shù),并且對生物膜結(jié)構(gòu)的破壞優(yōu)于其他對照組,更適合與DULWs這種復(fù)雜結(jié)構(gòu)的消毒。3)不同消毒劑在體外的細胞毒性不同,過氧化氫納米銀離子和洗必泰水路污染控制的常用濃度上對細胞的毒性低于次氯酸鈉和過氧化氫,相對安全。
[Abstract]:The study on microbial contamination of DUWLs and dental comprehensive unit is one of the most important equipments in oral diagnosis and treatment . This paper deals with the feasibility of using ATP biological fluorescence method to monitor the microbial contamination of DUWLs and to find a new method to monitor the microbial contamination of DUWLs . The results showed that there were serious pollution in the DWLs in the experiment . The average colony count was 4.015 * 103 cfu / ml , and the average colony count was 4.015 * 103 cfu / ml .
the liquid taking pump comprises a liquid taking tank , the liquid taking tank is sequentially provided with a lower valve , a piston , an upper valve , a push rod and a connecting rod from bottom to top ;
Conclusion : 1 ) The biological fluorescence detection method and the traditional colony counting method have high consistency in the monitoring of water path pollution . Conclusion : 1 ) The biological fluorescence detection method and the traditional colony counting method have high consistency in the monitoring of water channel pollution .
【學(xué)位授予單位】:南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R197.39
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,本文編號:2079228
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