本文選題：原代肝細胞 + 膠原酶灌注法��； 參考：《四川大學學報(醫(yī)學版)》2014年01期

【摘要】：目的觀察采用經(jīng)心臟逆行置管灌注肝臟的方法分離小鼠原代肝細胞的效果。方法對傳統(tǒng)的分離原代肝細胞方法(Seglen兩步膠原酶灌注法)進行改良,即從小鼠右心房的裂口處經(jīng)肝上下腔靜脈向下方置管,并以輸液器滴注含體積分數(shù)10%胎牛血清的膠原酶灌注液進行肝臟灌注。評價此法與傳統(tǒng)方法的置管成功率及所得肝原代細胞的數(shù)量及活力。結果改良組總的置管操作成功率高達95%,且在一次置管成功率上改良組高于傳統(tǒng)組(94.7%vs.68.8%,P0.05)。改良組小鼠肝臟灌注均勻,肝細胞產(chǎn)量高達1.07×106/g小鼠體質(zhì)量,細胞活力平均為92.16%,兩者均高于傳統(tǒng)組(分別為0.99×106/g小鼠體質(zhì)量及86.44%,P0.05或P0.01)。結論經(jīng)心臟逆行置管灌注法分離小鼠原代肝細胞簡便易學,重復性高,且能保證分離所得的肝細胞產(chǎn)量和質(zhì)量。
[Abstract]:Objective to observe the effect of retrograde perfusion of murine hepatocytes with retrograde catheterization of the heart. Methods Seglen's two-step collagenase perfusion method was modified, that is to say, a tube was inserted from the opening of the right atrium of the mouse through the superior and inferior hepatic vena cava. The liver was infused with collagenase perfusion solution containing 10% fetal bovine serum. To evaluate the success rate of catheterization and the number and activity of primary hepatocytes obtained by this method and the traditional method. Results the total success rate of catheterization in the modified group was 95%, and the improvement group was higher than the traditional group (94.7vs.68.8% P0.05). In the modified group, the liver was perfused evenly, the hepatocyte output was as high as 1.07 脳 106 / g and the average cell activity was 92.16, both of which were higher than those in the traditional group (0.99 脳 106 / g and 86.4444 / g, P0.05 or P0.01, respectively). Conclusion the method of retrograde catheterization through the heart is simple and easy to study and has high reproducibility and can ensure the yield and quality of the isolated hepatocytes.
【作者單位】： 四川大學華西醫(yī)院肝膽胰外科;
【基金】：四川省科技廳科技支撐計劃項目(No.2010FZ0016)資助
【分類號】：R318

【參考文獻】

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1 賴靜;楊天燕;韋錦斌;王乃平;;小鼠肝細胞的分離與原代培養(yǎng)[J];廣西醫(yī)科大學學報;2011年05期

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3 莊鵬,江元森,馬會慧,李志剛,麥麗,楊林,姚集魯;長期培養(yǎng)的大鼠原代肝細胞功能和形態(tài)學觀察[J];中國病理生理雜志;2005年05期

4 劉立新,王煒,嚴律南;一種改良的單肝細胞分離方法[J];中國普外基礎與臨床雜志;2005年03期

【共引文獻】

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3 姜德勛;許璞;沈愛國;秦永偉;徐建榮;孔祥婷;沈輝;楊家新;;福壽螺足組織和外套膜組織細胞培養(yǎng)的初步研究[J];淡水漁業(yè);2008年02期

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5 杜瑞平;高民;盧德勛;;t10,c12-CLA對豬皮下脂肪和背最長肌組織脂類代謝的影響[J];飼料工業(yè);2010年19期

6 江和基;楊麗英;陳強;黃志堅;;復方茵芩制劑血清對小鼠體外肝細胞損傷的保護作用[J];福建農(nóng)林大學學報(自然科學版);2008年01期

7 顏海強;翁國星;;鈥激光心臟瓣膜去鈣化斑塊功率的探討[J];福建醫(yī)科大學學報;2010年04期

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9 徐雅玲;黃巨恩;劉華剛;;體外原代肝細胞分離培養(yǎng)方法的比較[J];廣西醫(yī)科大學學報;2011年01期

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2 王春玲;和厚樸酚與青蒿素協(xié)同抗鼻咽癌細胞的作用及其機制研究[D];廣州中醫(yī)藥大學;2011年

3 徐云強;硫酸軟骨素酶聯(lián)合雪旺細胞移植治療脊髓損傷的實驗研究[D];天津醫(yī)科大學;2008年

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