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同步誘導(dǎo)培養(yǎng)兔骨髓源性內(nèi)皮祖細(xì)胞和平滑肌祖細(xì)胞

發(fā)布時間:2018-05-08 09:41

  本文選題:內(nèi)皮祖細(xì)胞 + 平滑肌祖細(xì)胞。 參考:《第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報》2014年01期


【摘要】:目的采用兔骨髓來源的單個核細(xì)胞同步誘導(dǎo)分化為兔內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs)和平滑肌祖細(xì)胞(SPCs),研究其生物學(xué)特性,評估其作為組織工程化靜脈瓣種子細(xì)胞的可能性。方法梯度密度離心法獲取兔骨髓血單個核細(xì)胞沉淀,分別用含5%胎牛血清(FBS)的EGM-2完全培養(yǎng)液向EPCs方向誘導(dǎo)培養(yǎng);用含20ng/mL血小板源性生長因子BB、5%FBS,不含血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的EBM-2培養(yǎng)液向SPCs方向誘導(dǎo)培養(yǎng)。鑒定兩種細(xì)胞的分化情況。結(jié)果誘導(dǎo)的EPCs培養(yǎng)至10d左右,細(xì)胞單層融合呈"鋪路石"狀;表達(dá)血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體2(VEGFR-2)、血管性血友病因子(vWF)、CD133,不表達(dá)α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA);透射電鏡可見細(xì)胞質(zhì)內(nèi)特征性Weibel-Palade小體;細(xì)胞生物學(xué)功能檢測可見EPCs在基質(zhì)膠上呈現(xiàn)血管狀生長。誘導(dǎo)的SPCs培養(yǎng)至14d左右呈現(xiàn)血管平滑肌細(xì)胞"峰-谷"樣生長特性;表達(dá)CD34、α-SMA,不表達(dá)vWF和VEGFR-2;在透射電鏡下可見細(xì)胞內(nèi)含有與細(xì)胞縱軸平行排列的肌絲;在基質(zhì)膠上不規(guī)則生長。結(jié)論兔骨髓血梯度密度離心得到的單個核細(xì)胞可同步誘導(dǎo)分化為EPCs和SPCs,為構(gòu)建組織工程化靜脈瓣提供了經(jīng)濟(jì)且可簡便獲取的種子細(xì)胞。
[Abstract]:Objective to study the biological characteristics of rabbit endothelial progenitor cells (EPCs) and smooth muscle progenitor cells (SPCs1) induced by mononuclear cells derived from rabbit bone marrow, and to evaluate their potential as seed cells for tissue engineering venous valve. Methods Rabbit bone marrow mononuclear cells were precipitated by gradient density centrifugation and cultured in the direction of EPCs by EGM-2 complete culture medium containing 5% fetal bovine serum. EBM-2 medium containing 20ng/mL platelet-derived growth factor BB, 5S and no vascular endothelial growth factor (VEGF) was used to induce the culture in the direction of SPCs. The differentiation of two kinds of cells was identified. Results the monolayer fusion of EPCs was "paving stone" when cultured for 10 days or so. The expression of vascular endothelial growth factor receptor (VEGFR-2), von Willebrand factor (VWFU) CD133and 偽 -SMAA (偽 -SMAA) were not detected. The characteristic Weibel-Palade bodies in cytoplasm were observed under transmission electron microscope. Cell biological function test showed that EPCs showed vascular growth on matrix glue. After cultured for 14 days, SPCs showed a "peak-valley" growth characteristic, expression of CD34, 偽 -SMA, no vWF and VEGFR-2. Under transmission electron microscope, the cells had myofilaments parallel to the longitudinal axis of the cells and grew irregularly on the matrix glue. Conclusion the mononuclear cells obtained from rabbit bone marrow blood gradient density centrifugation can be induced to differentiate into EPCs and SPCs simultaneously, which provides an economical and easy to obtain seed cells for the construction of tissue engineered venous flap.
【作者單位】: 泰山學(xué)院體育學(xué)院理論教研室;第二軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)部人體解剖與組織胚胎學(xué)教研室;泰安市婦幼保健院兒童保健科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(30672045)~~
【分類號】:R318.08

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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