脫細(xì)胞動(dòng)脈基質(zhì)修復(fù)不同長度兔膽道缺損的實(shí)驗(yàn)研究
本文選題:動(dòng)脈 + 肝外膽道; 參考:《昆明醫(yī)科大學(xué)》2016年碩士論文
【摘要】:第一部分兔源脫細(xì)胞動(dòng)脈基質(zhì)的制備及其組織相容性驗(yàn)證[目的]:制備兔源脫細(xì)胞動(dòng)脈基質(zhì),并觀察其組織學(xué)特點(diǎn)。將脫細(xì)胞動(dòng)脈基質(zhì)置入同種異體兔皮下,驗(yàn)證脫細(xì)胞動(dòng)脈基質(zhì)的組織相容性。[方法]:8只新西蘭兔隨機(jī)分為A、B組。A組(n=4)用于獲取兔腹主動(dòng)脈組織,并使用1%十二烷基磺酸鈉、1%聚乙二醇辛基苯基醚、0.25%胰酶對(duì)取出的動(dòng)脈組織進(jìn)行脫細(xì)胞處理,使用蘇木精—伊紅染色觀察兔源動(dòng)脈組織脫細(xì)胞前后組織學(xué)特點(diǎn)。提取脫細(xì)胞前后的動(dòng)脈組織的DNA,分光光度計(jì)測(cè)定DNA含量,比較差異。B組(n=4)將包裹于自制支架上的脫細(xì)胞動(dòng)脈基質(zhì)置于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物項(xiàng)部皮下,觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生存情況,術(shù)后9周將脫細(xì)胞動(dòng)脈基質(zhì)從實(shí)驗(yàn)動(dòng)物皮下取出,觀察其外觀,使用蘇木精—伊紅染色觀察組織學(xué)特點(diǎn),并與A組進(jìn)行比較。[結(jié)果]:脫細(xì)胞后的動(dòng)脈組織蘇木精—伊紅染色未見明顯的細(xì)胞殘留,細(xì)胞外結(jié)構(gòu)保存良好,脫細(xì)胞后的動(dòng)脈組織DNA含量較未脫細(xì)胞動(dòng)脈組織明顯降低,P0.05,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。B組實(shí)驗(yàn)兔9周內(nèi)無死亡,無手術(shù)切口感染,脫細(xì)胞動(dòng)脈基質(zhì)被受體組織完整包裹,肉眼未見瘢痕組織及炎性組織,且可見微小血管存在,蘇木精—伊紅染色見脫細(xì)胞動(dòng)脈基質(zhì)中存在大量受體細(xì)胞,與A組比較存在明顯差異。[結(jié)論]:使用1%十二烷基磺酸鈉、1%聚乙二醇辛基苯基醚、0.25%胰酶的脫細(xì)胞方法能夠有效的脫去兔源動(dòng)脈中的細(xì)胞成分,并保持了完好的細(xì)胞外結(jié)構(gòu);脫細(xì)胞動(dòng)脈基質(zhì)在同種異體兔體內(nèi)具有良好的組織相容性,受體細(xì)胞可大量長入脫細(xì)胞動(dòng)脈基質(zhì)中。第二部分兔源脫細(xì)胞動(dòng)脈基質(zhì)修復(fù)不同長度新西蘭兔肝外膽道缺損的實(shí)驗(yàn)研究[目的]:使用兔源脫細(xì)胞動(dòng)脈基質(zhì)對(duì)不同長度的新西蘭兔肝外膽道缺損模型進(jìn)行修復(fù),觀察同種異體脫細(xì)胞動(dòng)脈基質(zhì)對(duì)肝外膽道缺損的修復(fù)情況,并比較不同長度肝外膽道缺損的修復(fù)效果。[方法]:取20只封閉群新西蘭大白兔隨機(jī)分為A、B、C、D、E組,實(shí)驗(yàn)組A組(n=4)利用等長兔源脫細(xì)胞動(dòng)脈基質(zhì)對(duì)缺損長度為2.5mmm的肝外膽道進(jìn)行修復(fù),實(shí)驗(yàn)組B組(n=4)利用等長兔源脫細(xì)胞動(dòng)脈基質(zhì)對(duì)缺損長度為5.0mm的肝外膽道進(jìn)行修復(fù),實(shí)驗(yàn)組C組(n=4)利用等長兔源脫細(xì)胞動(dòng)脈基質(zhì)對(duì)缺損長度為7.5mmm的肝外膽道進(jìn)行修復(fù),對(duì)照組D組(n=4)橫斷兔膽總管后,對(duì)其進(jìn)行端端吻合,E組(n=4)作為空白對(duì)照組。比較其術(shù)后9周內(nèi)的生存情況,術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)抽取靜脈血檢測(cè)血清總膽紅素、谷草轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶水平并比較組間差異,并于術(shù)后9周處死所有的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,觀察修補(bǔ)后的肝外膽道情況,進(jìn)行取材,蘇木精—伊紅染色觀察組織學(xué)特點(diǎn)。[結(jié)果]:A組及D組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在術(shù)后9周內(nèi)無死亡,B組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物1只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物于術(shù)后9天死亡,1只死于術(shù)后10天,C組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,兩只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物于術(shù)后9天死亡,一只死于術(shù)后第10天,一只死于術(shù)后第12天。其余實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在9周內(nèi)無死亡。B、C組死亡的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中均在不同程度的膽總管—脫細(xì)胞動(dòng)脈基質(zhì)的吻合口膽漏,其中在C組于第12天死亡的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物可見整段脫細(xì)胞動(dòng)脈基質(zhì)從吻合口處脫落。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血清總膽紅素、谷草轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶比較,存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。觀察A組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及B組存活實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的膽總管—脫細(xì)胞動(dòng)脈基質(zhì)修復(fù)段,其脫細(xì)胞動(dòng)脈基質(zhì)段表面可見受體組織覆蓋,HE染色鏡下見脫細(xì)胞動(dòng)脈基質(zhì)中存在受體細(xì)胞。[結(jié)論]:用脫細(xì)胞動(dòng)脈基質(zhì)修復(fù)不同長度肝外膽道缺損時(shí),隨著實(shí)驗(yàn)兔肝外膽道缺損長度增加,實(shí)驗(yàn)兔存活率明顯下降,其存活率下降原因多考慮為肝外膽道缺損長度增加時(shí)對(duì)膽道及周圍血供的破壞所造成;脫細(xì)胞動(dòng)脈基質(zhì)在膽道這一特殊環(huán)境中時(shí),仍可有受體細(xì)胞長入,但生長情況明顯不及皮下環(huán)境;用脫細(xì)胞動(dòng)脈基質(zhì)修復(fù)肝外膽道缺損有良好的前景,但如何為脫細(xì)胞動(dòng)脈基質(zhì)在膽道這一特殊的環(huán)境中提供良好的血供條件,以及用脫細(xì)胞動(dòng)脈基質(zhì)修復(fù)肝外膽道缺損的遠(yuǎn)期效果如何,尚需進(jìn)一步研究。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R318.08;R657.4
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