本文關(guān)鍵詞：基于金納米粒子組裝電化學(xué)DNA傳感器檢測(cè)p53抑癌基因的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

基于金納米粒子組裝電化學(xué)DNA傳感器檢測(cè)p53抑癌基因的研究

第4 1卷 2 0 1 3年 1 1月

分析化學(xué) ( F E N XI H U A XU E) 研究報(bào)告 Ch i n e s e J o u na r l o f An a l y t i c a l Ch e mi s t r y

第1 1期 1 66 4~1 6 6 8

DOI:1 0. 3 7 2 4/ S P. J . 1 0 9 6 . 2 0 1 3. 3 0 3 8 9

基于金納米粒子組裝電化學(xué) D NA傳感器檢測(cè)

p 5 3抑癌基因的研究 羅賢文杜芳靜吳燁高樓軍李曉霞 (延安大學(xué)化學(xué)與化工學(xué)院，延安 7 1 6 0 0 0 )

摘

要基于金納米粒子修飾金電極，構(gòu)建了一種檢測(cè) p 5 3抑癌基因的非標(biāo)記電化學(xué) D N A傳感器。采用恒

電位沉積法制備金納米粒子，并將其修飾于電極表面制得金納米粒子修飾金電極 ( G N P s/ A u )。場(chǎng)發(fā)射掃描 電鏡用于金電極和金納米修飾電極的表面形貌表征。5 端帶巰基的捕獲探針 D N A通過(guò)分子自組裝法固定到 G N P s/ A u。傳感器采用循環(huán)伏安法和電化學(xué)交流阻抗法表征。以亞甲基藍(lán)為雜交指示劑，根據(jù)雜交前后吸附指示劑量的不同對(duì) p 5 3抑癌基因進(jìn)行定量測(cè)定。在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下， p 5 3抑癌基因在 1 . 0~ 1 0 0 0 n m o l/ L濃度范圍內(nèi)與亞甲基藍(lán)還原峰電流的變化值呈線性關(guān)系，檢出限為 0 . 8 n m o VL ( s/Ⅳ= 3 )。對(duì) 5 0 n m o l/ L p 5 3 抑癌基因平行測(cè)定 1 1次，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為 3 . 8%。此傳感器能有效區(qū)分完全互補(bǔ)序列、單堿基錯(cuò)配序列和三 堿基錯(cuò)配序列 D N A。

關(guān)鍵詞非標(biāo)記電化學(xué) D N A傳感器；金納米粒子； p 5 3抑癌基因

1 引言 近年來(lái)，非標(biāo)記型電化學(xué) D N A傳感器因其快速、簡(jiǎn)單、靈敏，在疾病診斷、基因測(cè)序、食品安全等領(lǐng)域受到廣泛關(guān)注~。為了提高電化學(xué) D N A傳感器檢測(cè)的靈敏度，納米粒子組裝電化學(xué) D N A傳感器， 尤其是金納米粒子因其良好的電學(xué)特性和生物相容性等優(yōu)點(diǎn)，在電化學(xué) D N A傳感器中得到廣泛應(yīng)用。 本研究組在玻碳電極表面電沉積金納米，構(gòu)建電化學(xué)適配體傳感器，檢測(cè)凝血酶，納米技術(shù)、特異性的 D N A和高靈敏的電化學(xué)檢測(cè)技術(shù)相結(jié)合，提高了電化學(xué)檢測(cè)的靈敏度，其檢出限達(dá)到 0 . 0 6 n mo

l f L。 p 5 3抑癌基因可誘導(dǎo)細(xì)胞生長(zhǎng)阻滯，細(xì)胞凋亡，細(xì)胞分化以及 D N A修復(fù)，被稱為“基因組衛(wèi)士”。但 p 5 3的抑癌功能常因突變而消失，使細(xì)胞無(wú)限分裂增殖，導(dǎo)致癌癥發(fā)生。因此，建立快速、靈敏檢測(cè) p 5 3抑癌基因的分析方法顯得尤為重要。目前，測(cè)定 p 5 3抑癌基因的方法主要有熒光法¨、免疫組織法H和電化學(xué)法，其中電化學(xué)方法因其快速、靈敏和簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)受到人們關(guān)注。本研究采用恒電位沉積法制備金納米粒子，并將其修飾在金電極表面，制得金納米粒子修飾金電極 ( G N P s/ A u )。捕獲探 針D N A通過(guò)自組裝方法固定在 G N P s/ A u,以亞甲基藍(lán) ( MB)為雜交指示劑，建立了簡(jiǎn)單、快速、靈敏的

非標(biāo)記型檢測(cè) p 5 3抑癌基因的電化學(xué) D N A傳感器 (圖1 )。本研究將納米技術(shù)、核酸雜交技術(shù)與簡(jiǎn)單、 靈敏的電化學(xué)技術(shù)有機(jī)結(jié)合，成功制備了檢測(cè) p 5 3抑癌基因的非標(biāo)記電化學(xué) D N A傳感器。

2 實(shí)驗(yàn)部分 2 . 1儀器與試劑

B S A( E p s i l o n )電化學(xué)工作站 (美國(guó)B S A公司 ), P A R S T A T 2 2 7 3電化學(xué)工作站 (美國(guó)A m e t e k公司 )。

場(chǎng)發(fā)射掃描電子顯微鏡系統(tǒng) ( F S E M,德國(guó)蔡司儀器公司 U l n a 5 5)。三電極系統(tǒng)：以金電極 ( G o l d e l e c t r o d e A u,西= 2 m m,天津英科公司)或金納米修飾電極 ( G N P s/ A u )為工作電極，飽和甘汞電極 ( S C E)為參比電極，鉑絲為對(duì)電極。 氯金酸 ( H A u C I 4 H 2 0,國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司 )。6 .巰基己醇 ( MC H, S i g m a— A l d r i c h公司 )。 亞甲基藍(lán) ( Me t h y l e n e b l u e, M B,天津化學(xué)試劑公司 )。K F e ( C N) 和K F e ( C N) 6 (西安化學(xué)試劑廠 )。 2 0 1 3 - 0 4 - 2 4收稿； 2 0 1 3 06 - - 2 5接受本文系陜西自然科學(xué)基礎(chǔ)研究計(jì)劃項(xiàng)目( N o . 2 0 1 0 J M 2 0 2 0 )資助 E— ma i l:y d l x x@y a u. e d u . c n

Word文檔免費(fèi)下載：基于金納米粒子組裝電化學(xué)DNA傳感器檢測(cè)p53抑癌基因的研究 （共1頁(yè)，當(dāng)前第1頁(yè)）

基于金納米粒子組裝電化學(xué)DNA傳感器檢測(cè)p53抑癌基因的研究的相關(guān)文檔搜索

  本文關(guān)鍵詞：基于金納米粒子組裝電化學(xué)DNA傳感器檢測(cè)p53抑癌基因的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。