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小分子水凝膠對骨髓間充質干細胞增殖、凋亡及向心肌細胞分化的影響

發(fā)布時間:2018-03-29 17:07

  本文選題:水凝膠 切入點:間質干細胞 出處:《中國組織工程研究》2017年21期


【摘要】:背景:前期研究研制的一種短肽小分子水凝膠,在改善局部微環(huán)境、攜帶生物活性物質及干預干細胞信號轉導途徑等方面較其他水凝膠有著更明顯的優(yōu)勢。目的:探討小分子水凝膠對骨髓間充質干細胞增殖、凋亡、向心肌細胞分化等的影響。方法:(1)取第9代SD大鼠骨髓間充質干細胞,分2組培養(yǎng),實驗組加入小分子水凝膠溶液,對照組常規(guī)培養(yǎng),檢測培養(yǎng)7 d內的細胞增殖與凋亡;將兩組細胞分別置于缺氧環(huán)境中孵育12 h,檢測細胞凋亡及凋亡蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3的表達;(2)取第9代骨髓間充質干細胞,分4組干預:5-氮雜胞苷組加入5-氮雜胞苷,凝膠組加入小分子水凝膠,實驗組加入小分子水凝膠與5-氮雜胞苷,正常對照組加入L-DMEM基本培養(yǎng)基,誘導4周后,檢測cT nT、desmin及Cx-43蛋白的表達,以及心肌早期轉錄因子NKX2.5、GATA-4的表達。結果與結論:(1)與對照組相比,實驗組骨髓間充質干細胞有更好的增殖能力及更低的凋亡數(shù)量;在缺氧環(huán)境中,實驗組和對照組存活的細胞均有減少,實驗組的凋亡或壞死細胞數(shù)目明顯少于對照組(P0.05);實驗組細胞Bcl-2蛋白表達高于對照組(P0.01),Bax、Caspase-3蛋白表達低于對照組(P0.01);(2)5-氮雜胞苷組和實驗組各樣本中均出現(xiàn)明確的心肌早期分化基因,實驗組NKx2.5和GATA-4 mR NA表達高于5-氮雜胞苷組(P0.05)。正常對照組cT nT表達陰性,desmin及Cx-43蛋白表達很弱;實驗組cT nT、desmin及Cx-43蛋白表達強于5-氮雜胞苷組、凝膠組,凝膠組cT nT、desmin及Cx-43蛋白表達與5-氮雜胞苷組相似;(3)結果表明,小分子水凝膠作為培養(yǎng)基質,更有利于骨髓間充質干細胞的增殖,減少其凋亡并促進其向心肌細胞分化。
[Abstract]:Background: a small molecular hydrogel with short peptides was developed in previous studies to improve the local microenvironment. Carrying bioactive substances and interfering with signal transduction pathway of stem cells have more obvious advantages than other hydrogels. Objective: to investigate the proliferation and apoptosis of bone marrow mesenchymal stem cells by small molecule hydrogel. Methods Sprague-Dawley rat bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) of the 9th generation were cultured in two groups. The experimental group was cultured with small molecular hydrogel solution and the control group was cultured routinely. The proliferation and apoptosis of the cells were detected within 7 days of culture. The two groups were incubated in anoxic environment for 12 hours respectively. Apoptosis and the expression of apoptotic protein Bcl-2nBaxCaspase-3 were detected. Bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) of the 9th generation were collected. The cells were divided into 4 groups and treated with the addition of 5-azacytidine to the control group. Small molecule hydrogels were added to the gel group, small molecule hydrogels and 5-azacytidine were added to the experimental group, and the normal control group was added to the basic L-DMEM medium. After 4 weeks of induction, the expression of ct nTtdesmin and Cx-43 protein were detected. Results and conclusion compared with control group, bone marrow mesenchymal stem cells in experimental group had better proliferative ability and lower apoptotic quantity. The number of surviving cells decreased in both experimental and control groups. The number of apoptotic or necrotic cells in the experimental group was significantly lower than that in the control group (P 0.05), the expression of Bcl-2 protein in the experimental group was higher than that in the control group (P 0.01) and the expression of Caspase-3 was lower than that in the control group (P 0.01). The expression of NKx2.5 and GATA-4 mRNA in the experimental group was higher than that in the 5-azacytidine group (P 0.05). The expression of cTnT and Cx-43 protein in the normal control group was very weak, and the expression of ct nTnTnttdesmin and Cx-43 protein in the experimental group was stronger than that in the 5-azacytidine group, and the expression of Cx-43 protein in the gel group was higher than that in the control group. The results showed that the small molecular hydrogel was more favorable to the proliferation of bone marrow mesenchymal stem cells, reduced its apoptosis and promoted its differentiation into cardiomyocytes.
【作者單位】: 廣州市番禺區(qū)中心醫(yī)院心內科番禺區(qū)心血管病研究所;南方醫(yī)科大學;
【基金】:國家自然科學基金青年項目(31400858):姜黃素多肽小分子水凝膠的制備及性能研究 廣東省自然科學基金(2014A030313707):姜黃素小分子水凝膠的制備及對心肌缺血再灌注的保護作用~~
【分類號】:R318

【參考文獻】

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本文編號:1682053

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