發(fā)布時間：2017-12-06 20:31

  本文關(guān)鍵詞：載藥同軸納米纖維燒傷敷料的研究

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【摘要】：燒傷在生產(chǎn)生活中經(jīng)常發(fā)生,其中深I(lǐng)I度燒傷很常見,其特點是創(chuàng)面腫脹蒼白,常伴有水皰。與I度和淺II度燒傷不同,深I(lǐng)I度燒傷須經(jīng)醫(yī)學(xué)處理才能愈合良好,其中燒傷敷料是最常用的治療方法。敷料可提供創(chuàng)面適宜微環(huán)境,對創(chuàng)面愈合及后期修復(fù)起到關(guān)鍵作用,但目前還未有理想的燒傷敷料滿足深I(lǐng)I度燒傷創(chuàng)面愈合的多種需求,包括保護創(chuàng)面、吸收滲出、促進創(chuàng)面愈合、抗感染等。靜電紡絲(Electrospinning)技術(shù)利用聚合物溶液或熔體在電場力下帶電,并被拉伸產(chǎn)生形變,最終溶劑揮發(fā)固化形成纖維。靜電紡絲納米纖維的特點是尺度均一、長徑較長。納米纖維膜具有高孔隙率和高表面積體積比,與細胞外基質(zhì)結(jié)構(gòu)相似,適合作為創(chuàng)傷敷料。同軸納米纖維具有殼核狀或中空狀結(jié)構(gòu),賦予納米纖維特殊的性能。同軸納米纖維的制備利用改進的靜電紡絲工藝。該工藝采用不同的殼層溶液和芯層溶液,通過一個特殊的套管針頭同時靜電紡絲得到同軸納米纖維。本文利用同軸靜電紡絲技術(shù),將具有強大吸水能力的海藻酸鈉、廣譜抗菌性能的殼聚糖、成纖維性良好的聚乙烯醇(PVA)及促傷口愈合的活性藥物-積雪草總苷結(jié)合,制備得到芯層載積雪草總苷的海藻酸鈉/PVA/殼聚糖同軸納米纖維膜,并研究其對深I(lǐng)I燒傷創(chuàng)面修復(fù)的促進作用。1.靜電紡絲法制備同軸納米纖維膜的處方工藝海藻酸鈉與PVA混合作為同軸納米纖維的殼層材料,芯層添加殼聚糖,篩選了同軸靜電紡絲工藝中的電壓、接收距離、殼層及芯層溶液濃度、推注速度等條件,最終確定同軸靜電紡絲法制備納米纖維的最佳處方及工藝參數(shù):殼層為0.8%(w/v)海藻酸鈉/7%(w/v)PVA混合溶液,芯層為3%(w/v)殼聚糖溶液;靜電紡絲工藝參數(shù):電壓為23 k V,針頭至接收屏的接收距離為15 cm,殼層及芯層推注速度分別為0.8、0.2 ml/h。掃描電子顯微鏡(Scanning electron microscope,SEM)觀察海藻酸鈉/PVA/殼聚糖同軸納米纖維膜表面光滑,串珠結(jié)構(gòu)較少,平均直徑為373.74±90.74 nm,分布均勻。2.同軸納米纖維膜的結(jié)構(gòu)及性能透射電子顯微鏡(Transmission electron microscope,TEM)觀察同軸納米纖維膜具有明顯的核-殼結(jié)構(gòu),其中芯層直徑為99.2 nm,殼層厚度為33.8 nm。X射線衍射(X-ray diffraction,XRD)和傅里葉紅外光譜(Fourier transform infrared spectrum,FTIR)方法表征其結(jié)構(gòu),證明了同軸納米纖維膜中各成分之間發(fā)生了一定的相互作用,形成了與物理混合物不同的內(nèi)部結(jié)構(gòu)�？疾炝送S納米纖維膜的吸水性能,證明加入海藻酸鈉后能明顯提高納米纖維膜的吸水性能。加入殼聚糖增強了同軸納米纖維膜抗菌性能。3.載藥同軸納米纖維膜的制備及釋藥在同軸納米纖維膜處方工藝的基礎(chǔ)上,制備芯層含積雪草總苷(積雪草總苷含量分別為1.5、2.5、5%,w/w)的載藥同軸納米纖維膜。掃描電鏡觀察載藥同軸納米纖維膜,纖維平均直徑為433.37±75.47 nm,分布均勻,串珠結(jié)構(gòu)少。高效液相色譜法測定積雪草總苷中單體成分積雪草苷含量,進一步計算載藥同軸納米纖維膜中積雪草總苷的含量。確定積雪草苷液相色譜條件為:高效液相色譜儀:安捷倫1260型;色譜柱Diamonsil?C18(5μm,250×4.6 mm);柱溫:30℃;流動相:乙腈:水=29:71(v/v);檢測波長:205 nm;流速:1.0 ml/min;進樣量:20μl。建立積雪草苷標(biāo)準(zhǔn)曲線,回歸方程A=4.6748C+4.585(r=0.9999),在10-400μg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好;5天內(nèi)精密度良好,RSD2%。表明該方法精確可靠,可用于積雪草總苷定量分析。載藥同軸納米纖維膜的體外藥物釋放結(jié)果表明其具有明顯的藥物緩釋效果,同普通非同軸混紡納米纖維膜相比,同軸納米纖維膜釋放緩慢,無藥物突釋現(xiàn)象,釋藥10h后,累積釋放達到80%。經(jīng)方程擬合,其釋藥機制符合Ritger-Peppas方程,證明藥物釋放以Fick’s擴散為主。4.載藥同軸納米纖維膜治療深I(lǐng)I度燒傷的藥效學(xué)研究采用臺式超級控溫?zé)齻麅x建立SD大鼠深I(lǐng)I度燒傷模型,燒傷儀具體參數(shù)為:燙頭溫度80℃,壓力500 g,燙頭與皮膚接觸時間8 s。創(chuàng)面組織學(xué)檢查、創(chuàng)面愈合率及病理學(xué)結(jié)果表明,空白及載藥同軸納米纖維膜對大鼠深I(lǐng)I度燒傷創(chuàng)面愈合均具有明顯促進作用,傷后第18天創(chuàng)面已基本愈合,較模型組具有顯著性差異,但未表現(xiàn)出明顯的劑量依賴性。采用免疫組化、ELISA初步探討同軸納米纖維膜促進大鼠深I(lǐng)I度燒傷創(chuàng)面的愈合機制,發(fā)現(xiàn)同軸納米纖維膜可上調(diào)創(chuàng)面組織的血管內(nèi)皮生長因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)、血小板-內(nèi)皮細胞黏附分子(Cluster of differentiation 31,CD31)、增殖細胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)等細胞因子的表達,進而加速創(chuàng)面愈合。同時,同軸納米纖維膜還可下調(diào)創(chuàng)面腫瘤壞死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)等炎性因子的表達,減輕炎癥反應(yīng),有利于創(chuàng)面愈合。載積雪草總苷同軸納米纖維的成功制備為深I(lǐng)I度燒傷治療提供了新選擇。
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R644;R318.08

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本文編號：1259898