本文關(guān)鍵詞：組織工程脫細(xì)胞氣管基質(zhì)材料的制備及性能研究

  更多相關(guān)文章： 氣管 組織工程 脫細(xì)胞基質(zhì)材料 免疫排斥反應(yīng) 生物學(xué)性能

【摘要】：氣管病變主要由先天狹窄、感染、創(chuàng)傷、腫瘤等引起,氣管切除并端端吻合是其治療金標(biāo)準(zhǔn)。氣管病變切除范圍超過成人氣管長度的1/2或兒童的1/3,則需要?dú)夤芴娲飦碇亟獾赖倪B續(xù)性。組織工程是結(jié)合工程技術(shù)和生物學(xué)原理應(yīng)用于功能性組織替代的一個(gè)新興研究,以促進(jìn)受損組織再生,有望成為長段氣管重建的有效治療手段。本研究以新西蘭兔為對(duì)象,制備和評(píng)估NaClO4處理后氣管基質(zhì)的生物性能,經(jīng)綜合比較篩選出最佳濃度,并監(jiān)測其免疫原性和排斥反應(yīng),為同種異體氣管移植提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。第一部分脫細(xì)胞氣管基質(zhì)材料的制備及生物性能檢測目的：制備脫細(xì)胞氣管基質(zhì)材料,并檢測其相關(guān)性能,遴選最佳高氯酸鈉(NaClO4)處理濃度。方法：1、獲取經(jīng)NaClO4處理的氣管基質(zhì)；2、通過掃描電鏡及DAPI染色觀察基質(zhì)結(jié)構(gòu)及細(xì)胞去除情況；3、細(xì)胞外基質(zhì)內(nèi)GAG量化及生物力學(xué)測試；4、組織學(xué)及軟骨細(xì)胞活力檢測評(píng)價(jià)氣管基質(zhì)ECM的黏膜及軟骨情況。結(jié)果：1、掃描電鏡(SEM)圖觀察到,該生物工程氣管的內(nèi)壁具有一個(gè)完整的基底膜(BM),這將保留包括滲透屏障在內(nèi)的很多生物功能；2、NaClO4脫細(xì)胞過程,能有效去除氣管基質(zhì)的黏膜層的細(xì)胞分子,黏膜下腺體和軟骨膜,但使力學(xué)性能有一定程度下降,而監(jiān)測基質(zhì)內(nèi)的GAG含量卻能得以保存；3、組織學(xué)監(jiān)測5%NaClO4化學(xué)處理能夠保留氣管基質(zhì)材料的結(jié)構(gòu)：即去除了黏膜上皮細(xì)胞、黏膜固有層細(xì)胞、腺體,而基底膜連接完整,膠原蛋白、彈力纖維和網(wǎng)狀纖維未完全破壞,且能保留基質(zhì)內(nèi)的軟骨細(xì)胞。結(jié)論：在該項(xiàng)研究中,我們綜合比較不同濃度NaClO4化學(xué)脫細(xì)胞方案對(duì)ECM成分、微觀結(jié)構(gòu)和力學(xué)性能及去除免疫原性效率,經(jīng)掃描電鏡、DAPI染色、GAG量化、生物力學(xué)檢測及組織學(xué)分析,遴選最佳脫細(xì)胞濃度,以獲取適合同種異體組織工程氣管重建的基質(zhì)材料。第二部分體內(nèi)外評(píng)估脫細(xì)胞氣管基質(zhì)材料的免疫排斥反應(yīng)目的：研究經(jīng)最佳NaClO4脫細(xì)胞濃度處理后,氣管基質(zhì)材料的免疫原性和排斥反應(yīng),為同種異體氣管移植研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法：1、體外通過免疫組化方法檢測基質(zhì)材料的MHC類分子表達(dá)；2、經(jīng)同種異體移植驗(yàn)證脫細(xì)胞基質(zhì)材料的免疫排斥反應(yīng)；3、對(duì)移植物進(jìn)行組織學(xué)分析及檢測受體體內(nèi)血清免疫球蛋白來評(píng)價(jià)免疫排斥反應(yīng)。結(jié)果：1、免疫組化染色示：MHC-類抗原的分布,主要表達(dá)于上皮層,黏膜下腺,和軟骨膜,而不是在軟骨細(xì)胞或軟骨基質(zhì),而5%NaClO4脫細(xì)胞處理,能明顯去除黏膜,黏膜下腺,軟骨膜(而非軟骨)的MHC抗原分子,只有軟骨細(xì)胞核被蘇木素著色；2、移植30d后,新鮮氣管外側(cè)包繞了厚厚的一層炎癥結(jié)締組織,囊內(nèi)氣管結(jié)構(gòu)有所破壞,并有大量膿液集聚。而5%NaClO4脫細(xì)胞組的氣管基質(zhì)覆蓋的纖維較薄,無炎癥反應(yīng),并有新生血管形成；3、術(shù)后30d的新鮮組埋植氣管的HE染色：顯示了較嚴(yán)重的排斥反應(yīng),包括炎癥細(xì)胞的浸潤,腺體破壞,軟骨缺損以及纖維的斷裂。而5%NaClO4脫細(xì)胞處理的基質(zhì)材料在收獲時(shí),則沒有明顯的排斥反應(yīng),沒有炎細(xì)胞的浸潤,并且軟骨和基質(zhì)纖維層完整。結(jié)論：動(dòng)物模型驗(yàn)證了經(jīng)NaClO4化學(xué)脫細(xì)胞處理后,氣管基質(zhì)材料內(nèi)軟骨細(xì)胞的“免疫豁免”特性,其生物相容性良好,該方案簡化了脫細(xì)胞處理以及節(jié)約成本和時(shí)間,適合構(gòu)建組織工程氣管基質(zhì)材料。
【學(xué)位授予單位】：揚(yáng)州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R318.08

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 宓開鴻,李繼承;組織工程在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用[J];中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào);2001年02期

2 商慶新,曹誼林,張滌生;生物工程領(lǐng)域的嶄新前沿——組織工程[J];前進(jìn)論壇;2001年03期

3 陳祖亮;上海組織工程研究開發(fā)中心正式成立[J];中華醫(yī)學(xué)信息導(dǎo)報(bào);2001年07期

4 育巍;;組織工程腎首次進(jìn)行動(dòng)物試驗(yàn)[J];國外醫(yī)學(xué)情報(bào);2001年03期

5 曹誼林,崔磊,商慶新,劉偉;組織工程的研究現(xiàn)狀與應(yīng)用展望[J];中國醫(yī)療器械信息;2002年04期

6 ;“組織工程”二期課題獲國家“973”項(xiàng)目立項(xiàng)[J];上海第二醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2005年09期

7 孫偉,李惠武;計(jì)算機(jī)輔助組織工程的發(fā)展和現(xiàn)狀[J];醫(yī)用生物力學(xué);2005年03期

8 樊瑜波;陶祖萊;;組織工程生物反應(yīng)器的生物力學(xué)[J];醫(yī)用生物力學(xué);2005年04期

9 孫偉;計(jì)算機(jī)輔助組織工程:概況、范圍和挑戰(zhàn)(第一部分)[J];醫(yī)用生物力學(xué);2005年01期

10 ;化學(xué)工業(yè)出版社新書[J];中國生物工程雜志;2006年04期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張其清;姚康德;劉玲蓉;;組織工程與組織工程材料[A];第三屆中國功能材料及其應(yīng)用學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];1998年

2 樊瑜波;;組織工程生物反應(yīng)器的生物力學(xué)[A];第八屆全國生物力學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

3 曹誼林;崔磊;商慶新;劉偉;;組織工程的研究現(xiàn)狀與應(yīng)用展望[A];首屆全國醫(yī)療器械學(xué)術(shù)與產(chǎn)業(yè)論壇論文集[C];2002年

4 樊瑜波;陶祖萊;;組織工程生物反應(yīng)器的生物力學(xué)[A];中國力學(xué)學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)大會(huì)'2005論文摘要集（上）[C];2005年

5 楊志明;;組織工程發(fā)展趨勢及展望[A];第三屆全國口腔頜面部創(chuàng)傷暨修復(fù)重建學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2003年

6 遲寶榮;孟祥偉;孫艷;胡春光;姜金蘭;;組織工程肝構(gòu)建的實(shí)驗(yàn)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國消化病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編（下冊(cè)）[C];2007年

7 曹誼林;;組織工程的發(fā)展與主要研究方向[A];第十屆中國科協(xié)年會(huì)論文集（三）[C];2008年

8 顧曉松;;組織工程神經(jīng)的研究進(jìn)展[A];華東六省一市生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)2008年學(xué)術(shù)交流會(huì)論文摘要匯編[C];2008年

9 朱楚洪;應(yīng)大君;糜建紅;;組織工程生物血管構(gòu)建[A];中國生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會(huì)第六次會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2004年

10 邱建輝;史廷春;姜睿智;索海瑞;;組織工程新技術(shù)：器官打印研究進(jìn)展[A];第六屆中國功能材料及其應(yīng)用學(xué)術(shù)會(huì)議論文集（5）[C];2007年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 記者 鄭昊;我國首個(gè)組織工程產(chǎn)業(yè)基地在西安落成[N];陜西日?qǐng)?bào);2012年

2 記者 王春 特約通訊員 李佳 首席 曹誼林;組織工程：再造完美血肉之軀[N];科技日?qǐng)?bào);2005年

3 本報(bào)記者 白曉蕓;人類機(jī)體再造的曙光組織工程[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2002年

4 本報(bào)記者 王丹;組織與器官重建:讓夢想照進(jìn)現(xiàn)實(shí)[N];健康報(bào);2009年

5 記者 沈雪梅;通大參與“干細(xì)胞與組織工程”研究[N];南通日?qǐng)?bào);2009年

6 綜合;南通大學(xué)開展“干細(xì)胞與組織工程”研究[N];江蘇科技報(bào);2010年

7 記者 李鵬;是什么擊中了曹誼林？[N];北京科技報(bào);2011年

8 記者 林洵 通訊員 王繼榮 羅國金;組織工程關(guān)鍵技術(shù)研發(fā)項(xiàng)目啟動(dòng)[N];健康報(bào);2012年

9 本報(bào)記者 吳潔;為實(shí)現(xiàn)“人體配件工廠”的夢想[N];科技日?qǐng)?bào);2002年

10 畢東海;組織工程前瞻[N];浙江日?qǐng)?bào);2000年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 曹玉萍;體外化學(xué)物質(zhì)致敏性檢測模型和組織工程皮膚真菌感染模型的構(gòu)建[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

2 吳英鋒;基于內(nèi)皮祖細(xì)胞和脫細(xì)胞動(dòng)脈基質(zhì)構(gòu)建組織工程靜脈的研究[D];首都醫(yī)科大學(xué);2006年

3 周慧梅;組織工程醫(yī)用生物補(bǔ)片重建陰道的實(shí)驗(yàn)及臨床研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2008年

4 馬英智;利用人表皮干細(xì)胞和人真皮成纖維細(xì)胞體外構(gòu)建組織工程復(fù)合皮膚的研究[D];吉林大學(xué);2009年

5 唐秀杰;組織工程構(gòu)建小口徑人工血管的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2006年

6 楊家驥;人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)建血管化組織工程真皮的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2008年

7 莊穎;組織工程椎間盤的體外初步構(gòu)建及其生物學(xué)性能研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2011年

8 嚴(yán)泉?jiǎng)?兔組織工程膀胱實(shí)驗(yàn)研究[D];中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué);2003年

9 梁峰;組織工程肝單元構(gòu)建的研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2006年

10 黃沙;控制釋放載體的研制及其構(gòu)建功能型組織工程皮膚的實(shí)驗(yàn)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2008年

，

本文編號(hào)：1242915