發(fā)布時(shí)間：2017-11-24 23:09

  本文關(guān)鍵詞：結(jié)冷膠水凝膠構(gòu)建可注射組織工程軟骨的研究

  更多相關(guān)文章： 結(jié)冷膠 可注射水凝膠 組織工程軟骨

【摘要】：大量研究表明,水凝膠三維培養(yǎng)軟骨細(xì)胞時(shí),能保持細(xì)胞球形結(jié)構(gòu),并長(zhǎng)時(shí)間維持特異性基因表達(dá),甚至能將去分化的軟骨細(xì)胞再分化。可注射水凝膠經(jīng)微創(chuàng)注射可在體內(nèi)原位凝結(jié),能自適應(yīng)性的修復(fù)復(fù)雜結(jié)構(gòu)組織,是目前生物醫(yī)用材料重要應(yīng)用發(fā)展方向之一。 結(jié)冷膠是美國(guó)Kelco公司20世紀(jì)80年代開(kāi)發(fā)的一種高分子糖類(lèi)化合物。結(jié)冷膠水凝膠因其透明度高、熔點(diǎn)可調(diào)及溫度滯后性凝結(jié)等特性,被廣泛用于食品工業(yè),近年來(lái)在醫(yī)藥領(lǐng)域的研究與應(yīng)用中漸見(jiàn)端倪,但構(gòu)建可注射水凝膠的研究較少。 實(shí)驗(yàn)?zāi)康模褐苽涞湍Y(jié)溫度的結(jié)冷膠溶液,混合軟骨細(xì)胞后凝結(jié)形成可注射水凝膠,后注射于裸鼠皮下,期望能原位形成物理形態(tài)穩(wěn)定和組織結(jié)構(gòu)均一的軟骨組織。 方法和結(jié)果： 1.構(gòu)建低凝結(jié)溫度的結(jié)冷膠溶液,制備可注射性水凝膠,MTT法測(cè)定其細(xì)胞毒性,掃描電子顯微鏡觀察其顯微結(jié)構(gòu)。結(jié)果顯示經(jīng)高壓蒸汽處理后的結(jié)冷膠溶液室溫不凝結(jié),可用于構(gòu)建可注射水凝膠；凝膠無(wú)細(xì)胞毒性,顯微結(jié)構(gòu)呈多孔片層狀。 2.低凝結(jié)溫度的結(jié)冷膠溶液混合軟骨細(xì)胞,鈣離子凝結(jié)后浸入完全培養(yǎng)基體外培養(yǎng),觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),CFDA-SE/PI染色檢測(cè)細(xì)胞活力,RT-PCR分析軟骨特異性基因表達(dá)。結(jié)果顯示凝膠中細(xì)胞存活狀態(tài)良好,軟骨特異性基因持續(xù)表達(dá)。 3.低凝結(jié)溫度的結(jié)冷膠溶液混合軟骨細(xì)胞,制備可注射性水凝膠,注射于裸鼠皮下。第4、8周收集植入物,觀察標(biāo)本大體形態(tài)；行組織學(xué)染色,COL-Ⅱ蛋白抗體免疫組化染色以確定其細(xì)胞外基質(zhì)分泌及細(xì)胞分布；檢測(cè)組織GAG含量以對(duì)細(xì)胞外基質(zhì)定量分析；RT-PCR確定軟骨特異性基因即時(shí)表達(dá)；壓力測(cè)試檢查新生組織彈性模量以確定其機(jī)械性能；三維CT骨組織掃描判定組織骨化程度。結(jié)果顯示新生組織物理結(jié)構(gòu)穩(wěn)定,細(xì)胞分布均勻,細(xì)胞外基質(zhì)大量沉積,軟骨特異性基因高表達(dá),組織無(wú)骨化現(xiàn)象。 結(jié)論：低凝結(jié)溫度結(jié)冷膠混合軟骨細(xì)胞構(gòu)建的可注射水凝膠,能在裸鼠皮下形成富含細(xì)胞外基質(zhì)的軟骨組織,是一種經(jīng)濟(jì)高效的可注射軟骨構(gòu)建方案。
【學(xué)位授予單位】：西北大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類(lèi)號(hào)】：R318.08

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 崔林,劉建國(guó),徐莘香;應(yīng)用生物降解材料PCL多孔塊修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究[J];白求恩醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);1999年05期

2 婁思權(quán);軟骨修復(fù)和重建基礎(chǔ)研究的現(xiàn)狀[J];當(dāng)代醫(yī)學(xué);2001年01期

3 張軍軍,任龍喜,程愛(ài)國(guó),張志剛,王志強(qiáng),張柳;PLA-MSCs復(fù)合培養(yǎng)物植入修復(fù)兔關(guān)節(jié)軟骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國(guó)骨腫瘤骨病;2005年05期

4 孫安科,陳文弦,崔鵬程,羅家勝;以PGA為三維支架同種異體工程化軟骨的構(gòu)建[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2001年10期

5 侯克東;盧世璧;張莉;袁玫;孫明學(xué);彭江;趙斌;眭翔;許文靜;;人臍帶Wharton膠中間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)與鑒定[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2008年04期

6 李忠;葉里子;陳歌;王治;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞復(fù)合殼聚糖凝膠體外構(gòu)建可注射組織工程軟骨[J];瀘州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2011年04期

7 王清義;白曉丹;關(guān)富龍;張寶第;楊曉霞;李華陽(yáng);劉佳佳;王磊;遲劍萍;周斌;高春陽(yáng);;富血小板血漿(PRP)對(duì)軟骨修復(fù)的影響[J];牡丹江醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2009年05期

8 尹寶英;張涌;張浩;溫葉飛;;蠶絲及Ⅱ型膠原凝膠支架負(fù)載軟骨細(xì)胞構(gòu)建組織工程類(lèi)軟骨[J];上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)科學(xué)版);2008年04期

9 ;Up-regulation of Cartilage Oligomeric Matrix Protein Gene Expression by Insulin-like Growth Factor-Ⅰ Revealed by Real Time Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction[J];Acta Biochimica et Biophysica Sinica;2006年10期

10 夏萬(wàn)堯,曹誼林,商慶新,劉彥春,王健,崔磊;胚胎來(lái)源的同種異體組織工程化軟骨形成的研究[J];現(xiàn)代康復(fù);2001年04期

，

本文編號(hào)：1223921