本文關鍵詞：Ⅱ型膠原糖胺聚糖復合支架對hUCMSCs成軟骨誘導的實驗研究

  更多相關文章： 人臍帶間充質干細胞 種子細胞 糖胺聚糖 支架 組織工程軟骨

【摘要】：目的探討以人臍帶間充質干細胞(hUCMSCs)作為軟骨組織工程種子細胞,Ⅱ型膠原復合糖胺聚糖支架材料作為細胞載體及其細胞-支架復合體成軟骨的可行性。方法制備Ⅱ型膠原復合糖胺聚糖多孔支架,電鏡觀察測定支架材料的孔徑、孔隙率和親水性,對支架材料進行相應的組織學分析。培養(yǎng)鑒定P3代的hUCMSCs,將hUCMSCs混懸液接種到Ⅱ型膠原復合糖胺聚糖支架上,不加誘導劑進行培養(yǎng),3周后取出樣品行甲苯胺藍、番紅精O染色,Ⅱ型膠原免疫組織化學染色及掃描電鏡觀察。結果第3代hUCMSCs高度表達CD29、CD105等間充質細胞標志,幾乎不表達CD34等內皮細胞、造血細胞標志。Ⅱ型膠原復合糖胺聚糖支架材料呈白色多孔泡沫狀,孔隙率為(91.8±2.17)%,孔徑110~230μm,分布均勻,相互貫通。吸水膨脹率為(213.71±1.31)%,親水性良好。甲苯胺藍、番紅精O及Ⅱ型膠原免疫組織化學染色呈陽性。細胞-支架復合體在培養(yǎng)過程中可觀察到有軟骨樣組織形成并逐步增多,甲苯胺藍、番紅精O及Ⅱ型膠原免疫組織化學染色均呈陽性,電鏡觀察顯示細胞在支架上增殖活躍,與材料黏附緊密,可見軟骨樣細胞及其周圍大量交錯連接的膠原纖維。結論 hUCMSCs與Ⅱ型膠原復合糖胺聚糖支架材料復合,可在體外不經誘導而初步構建組織工程軟骨,為軟骨損傷的修復奠定了一定的實驗基礎。
【作者單位】： 昆明醫(yī)科大學;成都軍區(qū)昆明總醫(yī)院骨科;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(81360274) 第57批博士后科學基金面上資助項目(2015M572718) 云南省應用基礎研究自籌經費項目(2014F2106) 成都軍區(qū)昆明總醫(yī)院院管項目(2012YG12)
【分類號】：R68;R318.08
【正文快照】： 因創(chuàng)傷、腫瘤、結核及痛風等代謝性疾病引起軟骨缺損,從而導致的關節(jié)疼痛、關節(jié)活動受限,是骨科亟待解決的難題之一。目前,臨床上常見的治療方法如自體軟骨膜及骨膜移植、自體/異體骨軟骨移植等修復的軟骨大多為纖維軟骨,耐磨性差[1],在生物和機械性能上與透明軟骨有著很大差，

本文編號：1143629