本文關(guān)鍵詞：Ⅱ型膠原糖胺聚糖復(fù)合支架對(duì)hUCMSCs成軟骨誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)研究

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【摘要】：目的探討以人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(hUCMSCs)作為軟骨組織工程種子細(xì)胞,Ⅱ型膠原復(fù)合糖胺聚糖支架材料作為細(xì)胞載體及其細(xì)胞-支架復(fù)合體成軟骨的可行性。方法制備Ⅱ型膠原復(fù)合糖胺聚糖多孔支架,電鏡觀察測(cè)定支架材料的孔徑、孔隙率和親水性,對(duì)支架材料進(jìn)行相應(yīng)的組織學(xué)分析。培養(yǎng)鑒定P3代的hUCMSCs,將hUCMSCs混懸液接種到Ⅱ型膠原復(fù)合糖胺聚糖支架上,不加誘導(dǎo)劑進(jìn)行培養(yǎng),3周后取出樣品行甲苯胺藍(lán)、番紅精O染色,Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色及掃描電鏡觀察。結(jié)果第3代hUCMSCs高度表達(dá)CD29、CD105等間充質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志,幾乎不表達(dá)CD34等內(nèi)皮細(xì)胞、造血細(xì)胞標(biāo)志。Ⅱ型膠原復(fù)合糖胺聚糖支架材料呈白色多孔泡沫狀,孔隙率為(91.8±2.17)%,孔徑110~230μm,分布均勻,相互貫通。吸水膨脹率為(213.71±1.31)%,親水性良好。甲苯胺藍(lán)、番紅精O及Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色呈陽性。細(xì)胞-支架復(fù)合體在培養(yǎng)過程中可觀察到有軟骨樣組織形成并逐步增多,甲苯胺藍(lán)、番紅精O及Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色均呈陽性,電鏡觀察顯示細(xì)胞在支架上增殖活躍,與材料黏附緊密,可見軟骨樣細(xì)胞及其周圍大量交錯(cuò)連接的膠原纖維。結(jié)論 hUCMSCs與Ⅱ型膠原復(fù)合糖胺聚糖支架材料復(fù)合,可在體外不經(jīng)誘導(dǎo)而初步構(gòu)建組織工程軟骨,為軟骨損傷的修復(fù)奠定了一定的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
【作者單位】： 昆明醫(yī)科大學(xué);成都軍區(qū)昆明總醫(yī)院骨科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81360274) 第57批博士后科學(xué)基金面上資助項(xiàng)目(2015M572718) 云南省應(yīng)用基礎(chǔ)研究自籌經(jīng)費(fèi)項(xiàng)目(2014F2106) 成都軍區(qū)昆明總醫(yī)院院管項(xiàng)目(2012YG12)
【分類號(hào)】：R68;R318.08
【正文快照】： 因創(chuàng)傷、腫瘤、結(jié)核及痛風(fēng)等代謝性疾病引起軟骨缺損,從而導(dǎo)致的關(guān)節(jié)疼痛、關(guān)節(jié)活動(dòng)受限,是骨科亟待解決的難題之一。目前,臨床上常見的治療方法如自體軟骨膜及骨膜移植、自體/異體骨軟骨移植等修復(fù)的軟骨大多為纖維軟骨,耐磨性差[1],在生物和機(jī)械性能上與透明軟骨有著很大差，

本文編號(hào)：1143629