本文關(guān)鍵詞：大鼠帶瓣血管液氮凍存時(shí)間對(duì)其活性和組織中IGF-I水平的影響

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【摘要】：目的：觀察、檢測經(jīng)液氮凍存不同時(shí)間大鼠帶瓣血管的大體標(biāo)本、管壁結(jié)構(gòu)和細(xì)胞代謝情況及其組織中IGF-Ⅰ的分布和含量,研究帶瓣管道的活性與IGF-Ⅰ之間的關(guān)系,提供一種評(píng)價(jià)帶瓣管道活性的新思路。 方法：健康成年wistar大鼠60只,雌雄不限,體重150至250g,隨機(jī)分為3組：空白對(duì)照組20只(A組),液氮凍存標(biāo)本1個(gè)月20只(B組),液氮凍存標(biāo)本3個(gè)月20只(C組)。采用腹腔內(nèi)注射濃度為10%的水合氯醛麻醉,消毒并用無菌操作直接開胸取帶瓣主動(dòng)脈。將3組帶瓣血管植入含有頭孢西丁鈉、林可霉素、兩性霉素B、多粘菌素及萬古霉素的M199培養(yǎng)基中37℃水浴6h。A組置入含含10%胎牛血清的M199培養(yǎng)基中孵育24h,計(jì)算檢測其糖代謝率,B、C組經(jīng)滅菌后置入含有10%胎牛血清和10%二甲基亞楓的M199培養(yǎng)基的凍存管中密封,經(jīng)控制性階段降溫后分別置于-196℃液氮中凍存1個(gè)月、3個(gè)月。B、C組凍存結(jié)束后取出,放置于37℃水浴箱中快速升溫后亦檢測糖代謝率。3組標(biāo)本經(jīng)福爾馬林固定后,石蠟包埋、切片,行HE染色和二步法免疫組化試劑盒染色,分別觀察、統(tǒng)計(jì)各組標(biāo)本的組織結(jié)構(gòu)和細(xì)胞IGF-Ⅰ陽性染色。 結(jié)果：1、大體標(biāo)本外觀及形態(tài)：肉眼見3組帶瓣大動(dòng)脈均無潰爛、衰敗及鈣化灶,B、C兩組帶瓣主動(dòng)脈的大體外觀、形態(tài)無明顯差異,而顏色較A組略微灰白。 2、葡萄糖代謝率：A組為3.812±0.4768mmol/L·24h,B組3.826±0.3495mmol/L.24hC組3.655±0.3736mmol/L.24h,3組數(shù)據(jù)之間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。 3、組織結(jié)構(gòu)：顯微鏡下觀察A組標(biāo)本病理切片可見管腔內(nèi)被覆平整的單層扁平內(nèi)皮細(xì)胞,胞核清晰,管壁中層有多層完整平滑肌細(xì)胞,胞外基質(zhì)排列整齊,另見少許成纖維細(xì)胞。B組可見管腔一側(cè)內(nèi)皮細(xì)胞排列較為緊密、平整,中層血管平滑肌細(xì)胞輪廓清晰,排列整齊。C組可見管腔面內(nèi)皮細(xì)胞輪廓清晰,無明顯脫落,中層血管平滑肌細(xì)胞完整,較A組稍顯疏松,未見排列紊亂及斷裂現(xiàn)象。 4、免疫組化染色：3組標(biāo)本均觀察到較強(qiáng)陽性染色,可于細(xì)胞胞質(zhì)中觀察到深淺不等的棕黃色著色�！申栃匀旧�(xì)胞多集中分布于管壁中層的平滑肌細(xì)胞和部分成纖維細(xì)胞,內(nèi)皮細(xì)胞亦可見染色。陽性率分別為：A組35%,B組30%,C組30%,3組數(shù)據(jù)之間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。 結(jié)論：1、本實(shí)驗(yàn)采用目前主流的帶瓣管道制備和保存方法可以在短時(shí)期內(nèi)較好的保留組織和細(xì)胞的活性。 2、IGF-Ⅰ在帶瓣主動(dòng)脈中的內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞及成纖維細(xì)胞均有一定比例的陽性染色,提示其在為保留帶瓣管道活性所發(fā)揮的作用方面有明確的細(xì)胞學(xué)證據(jù)。 3、由本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果及IGF-Ⅰ的生物學(xué)作用,推測該分子可以作為評(píng)估帶瓣管道活性的新指標(biāo),也為更為長久的保存帶瓣管道活性提供了一條新思路。
【關(guān)鍵詞】：帶瓣管道 血管活性 IGF-I
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R318.52
【目錄】：

• 主要英文縮寫4-5
• 摘要5-7
• ABSTRACT7-10
• 前言10
• 材料和方法10-17
• 結(jié)果17-20
• 討論20-33
• 結(jié)論33-34
• 參考文獻(xiàn)34-43
• 綜述43-67
• 參考文獻(xiàn)55-67
• 致謝67-68
• 研究生階段發(fā)表論文68

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1012443