本文關(guān)鍵詞：雙重修飾的小口徑人工血管的快速內(nèi)皮化

  更多相關(guān)文章： 人工血管 一氧化氮 硒代聚乙烯亞胺 REDV 內(nèi)皮化

【摘要】：小口徑人工血管應(yīng)用失敗的主要原因是血栓和由內(nèi)膜增生造成的再狹窄,解決這兩個問題的最有效方法是加速小口徑人工血管移植后的內(nèi)皮化。一氧化氮(NO)能夠抑制血小板的黏附和活化以及平滑肌細胞的增殖,有助于預(yù)防急性血栓和內(nèi)膜增生,同時促進內(nèi)皮細胞的生長和遷移,加速血液接觸材料的內(nèi)皮化。人體血液中存在NO供體,它們可以被特定的催化劑加速分解并釋放NO。REDV(Arg-Glu-Asp-Val)是一種來自于細胞外基質(zhì)的四肽,它可以選擇性地促進內(nèi)皮細胞的黏附,而不會吸附其它細胞。本文制備了一種雙重修飾的小口徑人工血管并對其快速內(nèi)皮化能力進行了考察,首先利用靜電紡絲制備了聚己內(nèi)酯血管基質(zhì)材料并對其進行了改性修飾,將能催化NO生成的催化劑—硒代聚乙烯亞胺(SePEI)和接枝有REDV的透明質(zhì)酸(HA)通過層層自組裝技術(shù)負載到基質(zhì)材料表面,然后對材料的性能和生物功能進行了表征和考察。通過掃描電子顯微鏡觀察了層層自組裝和負載REDV前后材料的微觀形貌,發(fā)現(xiàn)靜電紡絲材料和修飾后的材料均具有良好的纖維形態(tài)和高孔隙率。通過熒光顯微鏡觀察和X射線光電子能譜分析證明REDV成功負載到基質(zhì)材料上。水接觸角的測試結(jié)果顯示SePEI和HA的層層自組裝及REDV的負載在一定程度上改善了PCL基質(zhì)材料的親水性。NO催化生成實驗結(jié)果表明負載SePEI的材料具有良好的催化NO生成能力。成纖維細胞增殖實驗表明,引入SePEI、HA和REDV的血管材料細胞相容性良好。在內(nèi)皮細胞黏附實驗中,負載REDV的材料上內(nèi)皮細胞數(shù)量明顯高于其他組。在內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞共培養(yǎng)實驗中,雙重修飾的材料在促進內(nèi)皮細胞黏附的同時抑制了平滑肌細胞的黏附和鋪展,提高了內(nèi)皮細胞/平滑肌細胞比例。最后通過體內(nèi)原位移植實驗考察了雙重修飾的血管的通暢性和內(nèi)皮化情況,結(jié)果顯示本研究設(shè)計的血管具有良好的快速內(nèi)皮化能力,內(nèi)皮層覆蓋比例高,內(nèi)皮細胞形態(tài)接近天然血管內(nèi)皮細胞。綜上所述,本課題制備的雙重修飾的人工血管具有良好的抗凝血性和生物功能,能夠為小口徑人工血管的構(gòu)建和改性提供新的思路。
【關(guān)鍵詞】：人工血管 一氧化氮 硒代聚乙烯亞胺 REDV 內(nèi)皮化
【學(xué)位授予單位】：南開大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R318.1
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-10
• 第一章 前言10-30
• 第一節(jié) 人工血管的研究背景10
• 第二節(jié) 血管移植物的研究歷史及現(xiàn)狀10-15
• 1.2.1 天然生物血管10-11
• 1.2.2 合成血管11
• 1.2.3 組織工程血管11-14
• 1.2.3.1 種子細胞12
• 1.2.3.2 支架材料12-13
• 1.2.3.3 生物信號分子13-14
• 1.2.4 組織誘導(dǎo)性血管14-15
• 第三節(jié) 人工血管制備技術(shù)15-17
• 1.3.1 多孔支架加工15-16
• 1.3.2 表面改性和修飾16-17
• 第四節(jié) 小口徑人工血管快速內(nèi)皮化研究的意義和策略17-28
• 1.4.1 小口徑人工血管快速內(nèi)皮化研究的意義17-18
• 1.4.2 血管內(nèi)皮細胞的生理功能18
• 1.4.3 小口徑人工血管快速內(nèi)皮化策略18-19
• 1.4.4 一氧化氮釋放/生成材料在小口徑人工血管快速內(nèi)皮化中的應(yīng)用研究19-25
• 1.4.4.1 一氧化氮的生理功能19-21
• 1.4.4.2 一氧化氮釋放材料在小口徑人工血管快速內(nèi)皮化中的應(yīng)用研究21-23
• 1.4.4.3 一氧化氮生成材料在小口徑人工血管快速內(nèi)皮化中的應(yīng)用研究23-25
• 1.4.5 細胞外基質(zhì)衍生多肽在小口徑人工血管快速內(nèi)皮化中的應(yīng)用研究25-28
• 第五節(jié) 課題的提出28-30
• 第二章 材料與方法30-43
• 第一節(jié) 材料與試劑30-32
• 第二節(jié) 儀器32-33
• 第三節(jié) 主要試劑配制33-34
• 2.3.1 緩沖液的配制33
• 2.3.2 層層自組裝所用溶液的配制33
• 2.3.3 細胞實驗相關(guān)試劑和培養(yǎng)基的配制33
• 2.3.4 動物實驗相關(guān)試劑的配制33-34
• 第四節(jié) 實驗部分34-43
• 2.4.1 靜電紡絲膜材料的制備34
• 2.4.2 靜電紡絲血管支架的制備34
• 2.4.3 3,3’-聯(lián)硒二丙酸的合成34-35
• 2.4.4 硒代聚乙烯亞胺的合成35
• 2.4.5 透明質(zhì)酸-REDV的合成35-36
• 2.4.6 異硫氰酸熒光素標記REDV36
• 2.4.7 靜電紡絲膜材料的層層自組裝修飾36
• 2.4.8 靜電紡絲血管支架的層層自組裝修飾36-37
• 2.4.9 X射線光電子能譜測試37
• 2.4.10 靜態(tài)水接觸角測試37
• 2.4.11 拉伸力學(xué)測試37-38
• 2.4.12 爆破壓測試38
• 2.4.13 體外催化一氧化氮釋放實驗38-39
• 2.4.14 成纖維細胞增殖實驗39-40
• 2.4.15 內(nèi)皮細胞黏附實驗40
• 2.4.16 內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞共培養(yǎng)實驗40-41
• 2.4.17 原位移植實驗41
• 2.4.18 多普勒超聲檢測41
• 2.4.19 體式顯微鏡及掃描電子顯微鏡觀察41-42
• 2.4.20 H&E染色42
• 2.4.21 免疫熒光染色42
• 2.4.22 統(tǒng)計分析42-43
• 第三章 結(jié)果與討論43-60
• 第一節(jié) 材料的制備與表征43-50
• 3.1.1 靜電紡絲纖維膜的微觀形貌43-44
• 3.1.2 熒光標記REDV并層層自組裝修飾后纖維膜的微觀形貌44-45
• 3.1.3 靜電紡絲血管支架的微觀形貌45
• 3.1.4 SeDPA的結(jié)構(gòu)表征45-46
• 3.1.5 SePEI的結(jié)構(gòu)表征46
• 3.1.6 表面元素分析46-47
• 3.1.7 材料親水性47-48
• 3.1.8 材料力學(xué)性能48-49
• 3.1.9 材料催化GSNO生成NO的能力49-50
• 第二節(jié) 細胞實驗50-53
• 3.2.1 材料細胞相容性50-51
• 3.2.2 內(nèi)皮細胞黏附51-52
• 3.2.3 內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞共培養(yǎng)52-53
• 第三節(jié) 體內(nèi)實驗53-60
• 3.3.1 血管通暢率53-54
• 3.3.2 血管內(nèi)腔面形貌（體視顯微鏡觀察結(jié)果）54-55
• 3.3.3 血管內(nèi)腔面形貌（掃描電子顯微鏡觀察結(jié)果）55-57
• 3.3.4 血管內(nèi)皮化情況57-60
• 第四章 總結(jié)與展望60-62
• 第一節(jié) 全文總結(jié)60-61
• 第二節(jié) 研究展望61-62
• 參考文獻62-73
• 致謝73-74
• 個人簡歷 在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與研究成果74

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本文編號：1005944