發(fā)布時間：2017-09-05 16:07

  本文關(guān)鍵詞：microRNA-181b-5p在卡波西肉瘤組織中的表達及對細胞SLK生物學(xué)功能的影響

  更多相關(guān)文章： miR-181b-5p 卡波氏肉瘤 增殖 遷移 侵襲

【摘要】：目的：探討microRNA-181b-5p(miR-181b-5p)在卡波西肉瘤組織中與瘤旁組織中的表達差異情況以及臨床意義。通過脂質(zhì)轉(zhuǎn)染miR-181b-5p模擬物及抑制物到卡波西肉瘤細胞系SLK，，首次研究miR-181b-5p對卡波西肉瘤細胞SLK細胞增殖、凋亡、遷移、侵襲等一系列生物學(xué)功能的影響，為進一步研究miR-181b-5p在卡波西肉瘤發(fā)病機制中的作用奠定理論基礎(chǔ)。方法：(1）對18對卡波西肉瘤及瘤旁正常冰凍組織行定量PCR檢測，比較其差異性；對18例卡波西肉瘤患者的臨床資料行流行病學(xué)調(diào)查統(tǒng)計描述；對18對卡波西肉瘤組織及瘤旁組織中miR-181b-5p的表達量在年齡、性別、病理分型、HIV感染、HHV-8感染、HIV合并HHV-8感染、病程、皮損面積、全身皮損類型的差異性進行統(tǒng)計描述；(2）應(yīng)用脂質(zhì)體對人卡波西肉瘤細胞株SLK進行轉(zhuǎn)染，通過轉(zhuǎn)染不同濃度的陽性對照測定MTT值確定最佳轉(zhuǎn)染濃度及最佳轉(zhuǎn)染時間，描繪生長曲線；對轉(zhuǎn)染miR-181b-5p模擬物及抑制物后的卡波西肉瘤細胞株行MTT檢測觀察細胞增殖曲線；應(yīng)用流式細胞儀行檢測轉(zhuǎn)染48小時后各組細胞凋亡率比較；(3）轉(zhuǎn)染miR-181b-5p模擬物及抑制物后應(yīng)用transwell小室24小時后行蘇木素染色觀察細胞遷移、細胞侵襲生物學(xué)特性。結(jié)果：定量PCR結(jié)果，miR-181b-5p在卡波西肉瘤中表達明顯升高，卡波西肉瘤組比瘤旁組miR-181b-5p的表達量高約3.10倍；miR-181b-5p的相對表達量與年齡、性別、HIV感染、HHV-8感染、HIV合并HHV-8雙重感染、病程、皮損面積、全身皮損類型無關(guān)，差異無統(tǒng)計學(xué)意義，但卡波西肉瘤組織斑片期分別和斑塊期、結(jié)節(jié)期表達量有差異性。MTT法檢測顯示，最佳轉(zhuǎn)染濃度為94ng/L，最佳轉(zhuǎn)染時間為48小時；與陰性對照組比較，miR-181b-5p模擬物組細胞的增殖能力明顯上升，（P＜0.01）。miR-181b-5p抑制物組細胞的增殖能力明顯下降，（P＜0.01）。miR-181b-5p抑制物陰性對照組細胞的增殖能力無明顯變化。流式細胞儀測定SLK細胞轉(zhuǎn)染miR-181b-5p模擬物后凋亡率（5.5±0.6）%，與陰性對照組凋亡率（7.6±0.4）%相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，明顯下降（P＜0.05）；miR-181b-5p抑制物組凋亡率（14.8±1.0）%明顯增高，有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05）。Transwell小室遷移實驗結(jié)果顯示，與陰性對照組遷移實驗下室面細胞數(shù)目（151±11）個相比miR-181b-5p模擬物組（184±9）個，細胞數(shù)目明顯數(shù)量增多，遷移能力均明顯提高；miR-181b-5p抑制物組（105±10）個，細胞數(shù)目明顯數(shù)量減少；遷移能力均明顯降低；差異有統(tǒng)計學(xué)意義。Transwell小室侵襲實驗結(jié)果顯示，與陰性對照組侵襲實驗下室面細胞數(shù)目（35±6）個相比miR-181b-5p模擬物組（48±5）個，細胞數(shù)目明顯數(shù)量增多，侵襲能力均明顯提高；miR-181b-5p抑制物組（23±4）個，細胞數(shù)目明顯數(shù)量減少；侵襲能力均明顯降低；差異有統(tǒng)計學(xué)意義。且觀察到卡波西肉瘤細胞的侵襲能力較弱，需要提高細胞數(shù)量后才能觀察細胞計數(shù)。結(jié)論：miR-181b-5p可能參與了卡波西肉瘤的致瘤過程，miR-181b-5p有可能成為潛在的分子診斷指標(biāo)之一；通過轉(zhuǎn)染miR-181b-5p模擬物/抑制物，發(fā)現(xiàn)其對SLK細胞的增殖、凋亡、侵襲和遷移能力均造成一定影響，進一步開展miR-181b-5p生物學(xué)特性和其相關(guān)靶基因驗證的相關(guān)研究有十分重要的意義。
【關(guān)鍵詞】：miR-181b-5p 卡波氏肉瘤 增殖 遷移 侵襲
【學(xué)位授予單位】：新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R739.5
【目錄】：

• 中英文縮略詞對照表5-9
• 摘要9-11
• Abstract11-13
• 前言13-18
• 第一部分 miR-181b-5p 在人卡波西肉瘤組織中的表達變化及臨床意義18-40
• 1 研究內(nèi)容與方法18-23
• 1.1 研究對象18-19
• 1.2 內(nèi)容與方法19-23
• 1.3 質(zhì)量控制23
• 1.4 統(tǒng)計方法23
• 2 結(jié)果23-30
• 3 討論30-39
• 4 小結(jié)39-40
• 第二部分 miR-181b-5p 對于卡波西肉瘤細胞 SLK 細胞增殖和凋亡的影響40-62
• 1 研究內(nèi)容與方法40-50
• 1.1 研究對象40-41
• 1.2 內(nèi)容與方法41-49
• 1.3 質(zhì)量控制49-50
• 1.4 統(tǒng)計分析50
• 2 結(jié)果50-54
• 3 討論54-61
• 4 小結(jié)61-62
• 第三部分 miR-181b-5p 對卡波西肉瘤細胞系 SLK 細胞遷移和侵襲的影響62-80
• 1 研究內(nèi)容與方法62-68
• 1.1 研究對象62
• 1.2 內(nèi)容與方法62-67
• 1.3 質(zhì)量控制67-68
• 1.4 統(tǒng)計分析68
• 2 結(jié)果68-71
• 3 討論71-78
• 4 小結(jié)78-80
• 結(jié)論80-81
• 致謝81-82
• 參考文獻82-95
• 附錄95-98
• 綜述98-104
• 參考文獻102-104
• 攻讀學(xué)位期間獲得的學(xué)術(shù)成果104-105
• 個人簡歷105-106
• 導(dǎo)師評閱表106

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 張樹華,阮幼冰,武忠弼,J.N.Kitinya,馬云,朱玉紅,呂增華;Kaposi肉瘤的組織病理學(xué)特征觀察[J];中華皮膚科雜志;2005年01期

2 Jong Y Park;James Helm;Domenico Coppola;Donghwa Kim;Mokenge Malafa;Seung Joon Kim;;MicroRNAs in pancreatic ductal adenocarcinoma[J];World Journal of Gastroenterology;2011年07期

本文編號：798937