本文關(guān)鍵詞：shRNA沉默CDK2基因?qū)16-F1細胞小鼠皮下移植瘤的影響

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【摘要】：目的早期惡性黑色素瘤可以通過手術(shù)切除的方式得到緩解,發(fā)生轉(zhuǎn)移的黑色素瘤由于其耐藥性,預(yù)后較差。為探索治療黑色素瘤的新方法,本研究探討由慢病毒載體pUL介導的shRNA沉默CDK2基因?qū)谏亓黾毎鸅16-F1皮下移植瘤生長的影響。方法于C57BL/6小鼠右側(cè)腹股溝皮下注射B16-F1細胞建立移植瘤模型,采用癌灶多點注射的方法分為空白對照組、陰性對照組和實驗組(n=5)。陰性對照組,采用癌灶多點注射的方法將攜帶NC-shRNA的重組慢病毒(滴度為2×108 TU/mL)導入腫瘤灶,每只小鼠200μL,隔日1次,共6次,觀察18d;空白對照組,用與陰性對照組相同的方式方法向瘤體注射PBS,觀察18d;實驗組,采用癌灶多點注射的方法將攜帶CDK2-shRNA的重組慢病毒(滴度為2×108 TU/mL)導入腫瘤灶,每只小鼠200μL,隔日1次,共6次,觀察18d。觀察腫瘤生長情況并繪制腫瘤生長曲線,18d后殺鼠取瘤稱瘤質(zhì)量,計算腫瘤生長抑制率,TUNEL檢測腫瘤組織細胞凋亡情況,蛋白質(zhì)印跡法檢測腫瘤組織細胞中CDK2蛋白表達情況。結(jié)果 C57BL/6小鼠接種瘤細胞3d后均有腫瘤形成。治療的第6天空白對照組、陰性對照組和實驗組的腫瘤體積分別為(48.7±8.4)、(50.0±8.9)和(31.4±8.7)mm3,實驗組與空白對照組和陰性對照組相比,腫瘤生長速度明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義,F=8.879,P=0.004。空白對照組、陰性對照組和實驗組的腫瘤重量分別為(0.56±0.10)、(0.55±0.11)和(0.28±0.07)g,實驗組與空白對照組和陰性對照組相比,腫瘤體質(zhì)量明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(F=13.659,P=0.001),實驗組與空白對照組相比腫瘤生長抑制率為50.2%;空白對照組、陰性對照組和實驗組的細胞凋亡指數(shù)分別為(7.73±1.08)%、(7.87±1.42)%和(32.27±3.62)%,實驗組與空白對照組和陰性對照組相比,瘤細胞凋亡指數(shù)顯著升高,差異有統(tǒng)計學意義,F=189.748,P0.001。實驗組與空白對照組和陰性對照組相比,組織細胞中CDK2蛋白的表達顯著降低,差異有統(tǒng)計學意義(F=293.346,P0.001),實驗組相對于空白對照組CDK2蛋白表達的抑制率為50.4%。結(jié)論重組慢病毒CDK2-shRNA沉默CDK2基因的表達能有效抑制B16-F1細胞移植瘤的生長,CDK2基因可能成為黑色素瘤基因治療的有效靶點。
【作者單位】： 鶴壁職業(yè)技術(shù)學院醫(yī)學院;湖北省食品藥品監(jiān)督檢驗研究院;鄭州大學第一附屬醫(yī)院檢驗科;
【關(guān)鍵詞】： 黑色素瘤 CDK 基因沉默 CBL/小鼠 移植瘤
【基金】：河南省科技計劃(122300410193) 河南省高等學校青年骨干教師資助計劃(2011GGJS-262)
【分類號】：R739.5
【正文快照】： 2.湖北省食品藥品監(jiān)督檢驗研究院,湖北武漢4300643.鄭州大學第一附屬醫(yī)院檢驗科,河南鄭州450052中華腫瘤防治雜志,2016,23(9):592-596Chin J Cancer Prev Treat,2016,23(9):592-596早期惡性黑色素瘤可以通過手術(shù)切除的方式得到緩解,一旦發(fā)生轉(zhuǎn)移,臨床應(yīng)用各種化學藥物和生物藥

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