本文關(guān)鍵詞：MiR-146a-Smad4在長波紫外線誘導人成纖維細胞光老化中作用機制的研究

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【摘要】：目的:探討長波紫外線(UVA)誘導人皮膚成纖維細胞(HSF)光老化中miR-146a的表達情況,以及上調(diào)miR-146a表達對其靶基因Smad4及細胞光老化的影響。方法:人原代皮膚成纖維細胞來自健康兒童包皮,10代以內(nèi)的細胞用于后續(xù)實驗。以10 J/cm2 UVA照射成纖維細胞(UVA照射組),分別在0、3、7、14 d提取RNA,實時定量PCR檢測miR-146a的表達量。通過慢病毒轉(zhuǎn)染上調(diào)miR-146a的表達(miR-146a過表達組),在7 d、14 d后用熒光顯微鏡觀察轉(zhuǎn)染效率,并通過實時定量PCR驗證細胞內(nèi)miR-146a表達量。正常培養(yǎng)的人皮膚成纖維細胞(不做任何處理)作為空白對照組,慢病毒轉(zhuǎn)染人皮膚成纖維細胞后,再用UVA照射,則為UVA照射+miR-146a過表達組。MTT法檢測空白對照組、UVA照射組、miR-146a過表達組、UVA照射+miR-146a過表達組這4組細胞增殖吸光度(A)值,實時定量PCR檢測各組細胞內(nèi)老化相關(guān)基因p53、p16和p21 mRNA的表達,Western blot法檢測各組細胞內(nèi)Smad4蛋白表達情況。結(jié)果:1.重復測量的方差分析結(jié)果顯示,隨著培養(yǎng)時間的延長,UVA照射組和對照組miR-146a的表達量逐漸下降(F=213.840,P0.01);UVA照射組miR-146a的表達量較對照組出現(xiàn)下調(diào)(F=52.55,P0.01),且照射時間越長,下調(diào)越明顯;時間與分組之間存在交互作用(F=21.241,P0.01)。2.慢病毒轉(zhuǎn)染成纖維細胞后第7、14天,細胞內(nèi)均有較高的熒光表達,同時實時定量PCR結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染后第7、14天,miR-146a過表達組細胞內(nèi)miR-146a的表達較對照組顯著增高,組間差異有統(tǒng)計學意義(F=42.49,P0.01)。3.析因設(shè)計的方差分析結(jié)果顯示,UVA照射對細胞增殖活性有抑制作用(F=128.033,P0.01);慢病毒轉(zhuǎn)染上調(diào)miR-146a的表達對細胞增殖活性也有影響(F=24.838,P0.01);UVA照射和慢病毒轉(zhuǎn)染上調(diào)miR-146a的表達有交互作用(F=28.392,P0.01)。4.實時定量PCR結(jié)果顯示,UVA照射可上調(diào)細胞老化相關(guān)基因p21、p53、p16mRNA的表達(F=444.909、275.110、127.228,均P0.01);慢病毒轉(zhuǎn)染上調(diào)miR-146a的表達則可下調(diào)各老化相關(guān)基因mRNA的表達(F=41.141、28.178、25.932,P0.01);UVA照射與慢病毒轉(zhuǎn)染上調(diào)miR-146a的表達有交互作用(F=41.785、43.101、29.413,均P0.01)。5.Western blot結(jié)果顯示,UVA照射對細胞內(nèi)Smad4蛋白表達有促進作用(F=133.981,P0.01);慢病毒轉(zhuǎn)染上調(diào)miR-146a表達對Smad4表達也有影響(F=22.139,P0.01);UVA照射和慢病毒轉(zhuǎn)染上調(diào)miR-146a表達有交互作用(F=20.076,P0.01)。結(jié)論:在UVA誘導光老化的人成纖維細胞中,miR-146a的表達受到抑制,上調(diào)其表達能夠抑制Smad4的表達,起到抗細胞光老化的作用。
【關(guān)鍵詞】：miR-146a Smad4 成纖維細胞 UVA 光老化
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R758.1
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• Abstract7-10
• 前言10-13
• 材料與方法13-25
• 結(jié)果25-29
• 討論29-31
• 結(jié)論31-32
• 參考文獻32-36
• 綜述36-42
• 參考文獻39-42
• 中英文對照縮略詞表42-43
• 研究生期間發(fā)表文章43-44
• 致謝44-45

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1 吳和巖,周華;光老化的預防與治療[J];國外醫(yī)學(衛(wèi)生學分冊);2003年03期

2 馮燕艷,普雄明;皮膚自然衰老及光老化[J];國外醫(yī)學.皮膚性病學分冊;2004年06期

3 劉娜,王學民;光老化的皮膚改變及其機制[J];嶺南皮膚性病科雜志;2005年02期

4 王醫(yī)林;鄧丹琪;;光老化及其機制[J];醫(yī)學綜述;2009年03期

5 鄭錦芬;陸春;賴維;;基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑抗光老化的研究進展[J];中國美容醫(yī)學;2010年07期

6 孫志文;關(guān)斌;蔡冬玲;;果酸和E光聯(lián)合治療光老化117例療效[J];新疆醫(yī)學;2010年05期

7 Kligman L H;湯愛民;;光老化:臨床表觀、預防和治療[J];國外醫(yī)學.皮膚病學分冊;1987年06期

8 姚春麗;夏建新;陳玉丙;;骨髓間充質(zhì)干細胞對豚鼠皮膚光老化的修復作用[J];中國生物制品學雜志;2008年04期

9 王利鋒;楊高云;;植物提取物在光老化防治中的作用[J];中國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學雜志;2010年01期

10 張芳芳;車雅敏;;環(huán)境污染與紫外輻射量相關(guān)性及對光老化影響[J];中國美容醫(yī)學;2011年12期

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1 黃進華;;光老化研究[A];美麗人生 和諧世界——中華醫(yī)學會第七次全國醫(yī)學美學與美容學術(shù)年會、中華醫(yī)學會醫(yī)學美學與美容學分會20周年慶典暨第三屆兩岸四地美容醫(yī)學學術(shù)論壇論文匯編[C];2010年

2 林彤;;紅外線和光老化的研究進展[A];中華醫(yī)學會第十五次全國皮膚性病學術(shù)會議論文集[C];2009年

3 蘇躍;徐麗敏;;光老化的中醫(yī)藥防治研究進展[A];2011全國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學術(shù)會議論文匯編[C];2011年

4 周展超;;光老化：激光與光子治療[A];華東六省一市第八次皮膚性病學術(shù)會議論文匯編[C];2007年

5 李遠宏;徐媛媛;賈麗麗;祝霞;吳嚴;高興華;陳洪鐸;;光老化的治療[A];中華醫(yī)學會第14次全國皮膚性病學術(shù)年會論文匯編[C];2008年

6 楊鵬;麥躍;李娟;孫林潮;;碳剝脫聯(lián)合長脈寬1064nm Nd:YAG激光治療光老化臨床觀察[A];中華醫(yī)學會第十八次全國皮膚性病學術(shù)年會論文匯編[C];2012年

7 嚴淑賢;周希;盧忠;錢輝;丁蕙琳;;光動力學療法治療面部光老化的自身雙側(cè)對照研究[A];中華醫(yī)學會第十五次全國皮膚性病學術(shù)會議論文集[C];2009年

8 楊珊;普雄明;;E光聯(lián)合激光治療面部光老化療效觀察[A];中華醫(yī)學會第16次全國皮膚性病學術(shù)年會摘要集[C];2010年

9 李遠宏;徐宏慧;賈麗麗;吳嚴;高興華;陳洪鐸;;天然抗氧化劑對光老化、光免疫抑制的防護作用[A];中華醫(yī)學會第十五次全國皮膚性病學術(shù)會議論文集[C];2009年

10 林彤;龔向東;;皮膚激光美容門診就診者光老化認知的問卷調(diào)查[A];2011全國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學術(shù)會議論文匯編[C];2011年

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1 采寫 本報記者 葉芳 通訊員 伍曉毅 受訪專家 廣州醫(yī)學院第二附屬醫(yī)院皮膚科主任 楊健;顏老色衰多因“光老化”[N];廣東科技報;2008年

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1 于海霞;毛竹材紫外光老化機制研究[D];中國林業(yè)科學研究院;2015年

2 張宇;桃紅四物湯對光老化小鼠TGF-β/Smads信號通路及MMPs/TIMPs影響的實驗研究[D];遼寧中醫(yī)藥大學;2015年

3 康玉英;炎癥浸潤細胞及基質(zhì)金屬蛋白酶參與光老化發(fā)生機制研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2009年

4 嚴淑賢;紫外線照射對真皮結(jié)構(gòu)和代謝的影響及氮氧化物Tempol保護作用的研究[D];復旦大學;2005年

5 劉芳芬;水通道蛋白3與人皮膚成纖維細胞光老化的機制研究[D];中南大學;2013年

6 吳嚴;強脈沖光治療面部光老化的臨床應用研究[D];中國醫(yī)科大學;2008年

7 劉羽熙;Vectran纖維的光老化行為及其防護研究[D];哈爾濱工業(yè)大學;2014年

8 王繼慧;絞股藍總皂苷對人皮膚成纖維細胞光老化模型凋亡信號通路的影響[D];遼寧中醫(yī)藥大學;2014年

9 陶冶;絞股藍總皂苷含藥血清對光老化人皮膚角質(zhì)細胞p38MAPK信號通路的影響[D];遼寧中醫(yī)藥大學;2013年

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1 曾繼平;脂肪來源干細胞對光老化成纖維細胞的治療作用[D];復旦大學;2014年

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5 李曉;MiR-146a-Smad4在長波紫外線誘導人成纖維細胞光老化中作用機制的研究[D];蘇州大學;2016年

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7 李文靜;人表皮光老化的蛋白質(zhì)組學研究[D];重慶醫(yī)科大學;2010年

8 劉艷華;二氧化碳點陣激光治療光老化大鼠皮膚的實驗研究[D];南方醫(yī)科大學;2013年

9 章小曼;基于新型光學成像技術(shù)的小鼠皮膚光老化及修復機制的實驗研究[D];福建師范大學;2010年

10 龍亭;人表皮光老化相關(guān)蛋白的比較蛋白質(zhì)組學研究[D];重慶醫(yī)科大學;2010年

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本文編號：761970