發(fā)布時(shí)間：2017-08-23 21:06

  本文關(guān)鍵詞：大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向惡性黑色素瘤組織歸巢能力的探討

  更多相關(guān)文章： 間充質(zhì)干細(xì)胞 黑色素瘤 歸巢 肺部毛細(xì)血管阻滯 靜脈移植

【摘要】：目的：惡性黑色素瘤是一種高度惡性的腫瘤，其發(fā)病率在皮膚科腫瘤中居于第三位，且呈逐年上升的態(tài)勢(shì)。惡性黑色素瘤的惡性程度較高，且多發(fā)生轉(zhuǎn)移，預(yù)后較差�；颊叩乃劳雎蕰�(huì)隨著腫瘤侵襲的深度而增加。目前除了及早發(fā)現(xiàn)并行手術(shù)切除外，并無(wú)其他有效治療手段。但目前許多腫瘤在發(fā)現(xiàn)時(shí)多已發(fā)生轉(zhuǎn)移，所以單純的手術(shù)切除很難達(dá)到根治的目的。而以放、化療為輔助手段的治療對(duì)惡性黑色素瘤收效甚微。所以尋求一種高效、安全的輔助治療手段正成為人類(lèi)迫切的需求。近年來(lái)隨著對(duì)干細(xì)胞研究的不斷深入，間充質(zhì)干細(xì)胞逐漸走入了人們的視野。間充質(zhì)干細(xì)胞因其具有組織來(lái)源豐富，易于體外擴(kuò)增并能向損傷以及腫瘤組織遷移的能力等特性[1]，所以間充質(zhì)干細(xì)胞是一種較為理想的載體，可以攜帶抗腫瘤藥物或者抑癌基因到達(dá)腫瘤組織，以實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤的治療作用。但間充質(zhì)干細(xì)胞向腫瘤組織的歸巢還受到很多因素的影響，能到達(dá)靶組織的細(xì)胞數(shù)量對(duì)于治療的效果將起到?jīng)Q定性的作用。移植途徑的選擇是決定間充質(zhì)干細(xì)胞歸巢的首要因素。目前的細(xì)胞移植途徑主要有靜脈移植、動(dòng)脈移植以及局部移植。通過(guò)靜脈移植較為安全，同時(shí)也利于干細(xì)胞在體內(nèi)的遷移，但是肺部毛細(xì)血管的阻滯作用成為了影響間充質(zhì)干細(xì)胞向腫瘤組織歸巢的首要因素[2]。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立黑色素瘤裸鼠模型，通過(guò)靜脈途徑向荷瘤裸鼠以及正常裸鼠移植PKH26標(biāo)記的間充質(zhì)干細(xì)胞，通過(guò)計(jì)數(shù)荷瘤裸鼠腫瘤組織以及兩組裸鼠肺組織切片中熒光陽(yáng)性的細(xì)胞數(shù)目，從而探討間充質(zhì)干細(xì)胞向黑色素瘤組織歸巢的能力，以及肺部毛細(xì)血管阻滯對(duì)其歸巢的影響。進(jìn)而通過(guò)本實(shí)驗(yàn)對(duì)以間充質(zhì)干細(xì)胞為載體的對(duì)腫瘤的靶向治療提供指導(dǎo)。 方法： 1以密度梯度離心法分離并純化大鼠的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，并且傳代培養(yǎng)。 2通過(guò)誘導(dǎo)，讓所得到的間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞和神經(jīng)元樣細(xì)胞分化，以驗(yàn)證其作為干細(xì)胞具有多向分化的潛能。 3黑色素瘤動(dòng)物模型的制備：向裸鼠的后下肢皮下注射裸鼠黑色素瘤細(xì)胞B16，制備黑色素瘤動(dòng)物模型。 4應(yīng)用PKH26標(biāo)記骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，并計(jì)算標(biāo)記率。 5動(dòng)物實(shí)驗(yàn)將4周齡雌性裸鼠隨機(jī)分為A、B兩組每組各10只，A組通過(guò)皮下注射黑色素瘤細(xì)胞B16建立黑色素瘤裸鼠模型。2周后待A組裸鼠成瘤后通過(guò)鼠尾靜脈向兩組裸鼠移植PKH26標(biāo)記的間充質(zhì)干細(xì)胞。讓裸鼠自由進(jìn)食水，，觀察并記錄A組裸鼠的腫瘤直徑以及兩組裸鼠的狀態(tài)。 6兩周后將裸鼠全部處死，取下A組裸鼠的腫瘤組織，以及A、B兩組裸鼠的肺組織，制作組織切片。熒光顯微鏡下計(jì)數(shù)組織切片中熒光陽(yáng)性的細(xì)胞數(shù)量。 7運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。 結(jié)果： 1以密度梯度離心法分離純化的細(xì)胞，可逐步得到呈長(zhǎng)梭形放射狀排列的細(xì)胞。 2通過(guò)誘導(dǎo)，所得到的間充質(zhì)干細(xì)胞可以向成骨細(xì)胞以及神經(jīng)元樣細(xì)胞分化。 3經(jīng)皮下注射黑色素瘤細(xì)胞的裸鼠，1周后成瘤，2周后腫瘤直徑最大1cm最小0.6cm，裸鼠略顯消瘦但活力正常。 4PKH26標(biāo)記的間充質(zhì)干細(xì)胞胞膜呈均勻的紅色熒光，標(biāo)記率為100%,且子代也帶有熒光。PKH26標(biāo)記后細(xì)胞的生長(zhǎng)與增殖未受影響。 5間充質(zhì)干細(xì)胞移植2周后兩組裸鼠均存活。A組裸鼠皮下最小1.2cm，脂肪基本消失，呈惡病質(zhì)狀態(tài)，A組裸鼠腫瘤直徑最大2.4cm，部分腫瘤組織的頂端出現(xiàn)不同程度的破潰。B組裸鼠未見(jiàn)明顯異常。 6A組裸鼠腫瘤組織切片中熒光陽(yáng)性的細(xì)胞數(shù)平均為為9.9個(gè)，且與A組裸鼠腫瘤組織的直徑呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.976，（P值為0.000.05）具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。A組裸鼠肺組織切片中熒光陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)平均為3.1個(gè)，B組肺組織切片中熒光陽(yáng)性的細(xì)胞數(shù)平均為3.2個(gè)，兩組數(shù)據(jù)相比在統(tǒng)計(jì)學(xué)上無(wú)差別（P值0.8130.05）。 結(jié)論：通過(guò)靜脈移植的間充質(zhì)干細(xì)胞能夠在體內(nèi)遷移并定植到腫瘤組織。腫瘤組織的大小與間充質(zhì)干細(xì)胞歸巢的數(shù)量呈正相關(guān)。通過(guò)靜脈移植的間充質(zhì)干細(xì)胞，由于肺部毛細(xì)血管的阻滯，部分細(xì)胞會(huì)滯留在肺部，且無(wú)論有無(wú)腫瘤的影響，滯留在肺部毛細(xì)血管的細(xì)胞數(shù)并無(wú)差別。
【關(guān)鍵詞】：間充質(zhì)干細(xì)胞 黑色素瘤 歸巢 肺部毛細(xì)血管阻滯 靜脈移植
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類(lèi)號(hào)】：R739.5
【目錄】：

• 摘要4-7
• ABSTRACT7-11
• 前言11-12
• 材料與方法12-17
• 結(jié)果17-18
• 附圖18-26
• 附表26-27
• 討論27-31
• 結(jié)論31
• 參考文獻(xiàn)31-34
• 綜述 間充質(zhì)干細(xì)胞向惡性黑色素瘤組織歸巢能力的探討34-44
• 參考文獻(xiàn)40-44
• 致謝44-45
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷45

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1 林滬;陳黎明;葉文華;施明;王福生;;間充質(zhì)干細(xì)胞在肝臟的歸巢及分化機(jī)制[J];胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志;2010年03期

2 鄧啟垣;陳燦;黃石安;;間充質(zhì)干細(xì)胞歸巢的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2010年05期

3 史明霞;李靜;廖聯(lián)明;陳斌;李炳宗;陳磊;趙春華;;胎兒骨髓源Flk1~+間充質(zhì)干細(xì)胞的歸巢機(jī)制[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2009年14期

4 林志祥;徐皓;;間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性研究現(xiàn)狀[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2011年19期

5 陸曉茜;劉霆;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性及其臨床應(yīng)用[J];四川醫(yī)學(xué);2005年12期

6 郭玲玲;李明;邢爽;羅慶良;;間充質(zhì)干細(xì)胞治療重癥急性放射病研究的新進(jìn)展[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志;2011年03期

7 彭敏鋒;李劍;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與組織損傷修復(fù)的研究進(jìn)展[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2008年08期

8 馬紹華;浦波;舒鈞;;間充質(zhì)干細(xì)胞歸巢的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2011年04期

9 陳娜;葛林阜;;PBSCs與MSCs協(xié)同移植治療惡性血液病的研究進(jìn)展[J];山東醫(yī)藥;2010年43期

10 霍思維;張毅;;間充質(zhì)干細(xì)胞在造血調(diào)控中的作用[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志;2006年01期

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3 杜鳳移;王皓;楊樹(shù)龍;趙繪存;楊英;楊軍;;納米纖維支架對(duì)大鼠間充質(zhì)干細(xì)胞向肝細(xì)胞分化的影響[A];天津市生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會(huì)第29屆學(xué)術(shù)年會(huì)暨首屆生物醫(yī)學(xué)工程前沿科學(xué)研討會(huì)論文集[C];2009年

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1 王秋月　王琳;空軍總醫(yī)院采用間充質(zhì)干細(xì)胞救治小腦萎縮[N];科技日?qǐng)?bào);2009年

2 記者 李素鋒;我市首例間充質(zhì)干細(xì)胞移植手術(shù)取得成功[N];臨汾日?qǐng)?bào);2009年

3 記者 張真真　通訊員 葉逢春 魯斌;讓返鄉(xiāng)民工歸巢不歇業(yè)[N];湖北日?qǐng)?bào);2008年

4 韓小鋒　陳計(jì)智;精心呵護(hù)“歸巢倦鳥(niǎo)”[N];解放軍報(bào);2011年

5 記者 王丹　通訊員 艾素;異染性腦白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)不良治療獲突破[N];健康報(bào);2010年

6 記者 尚志岑;平高集團(tuán)出現(xiàn)萬(wàn)鳥(niǎo)歸巢勝景[N];平頂山日?qǐng)?bào);2006年

7 記者 班彥欽;忻州萬(wàn)余商戶(hù)候鳥(niǎo)歸巢[N];山西日?qǐng)?bào);2002年

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1 于美嬌;系統(tǒng)歸巢的間充質(zhì)干細(xì)胞在牙周組織修復(fù)再生過(guò)程中的作用研究[D];山東大學(xué);2011年

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10 李成華;口腔黏膜間充質(zhì)干細(xì)胞存在及在口腔扁平苔蘚中變化的初步研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2010年

本文編號(hào)：727289