本文關(guān)鍵詞：尋常性痤瘡患者皮膚紫外誘導(dǎo)的熒光：由表及里的研究

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【摘要】：背景尋常性痤瘡是一種常見皮膚疾病,但其發(fā)病原因至今不明。既往研究認(rèn)為痤瘡丙酸桿菌(P. acnes)是痤瘡的致病菌,但從未獲得直接證據(jù),并有爭議。P. acnes能夠分泌卟啉類物質(zhì),在長波紫外線激發(fā)下,可以發(fā)出天然的橘紅色熒光(ultraviolet induced red fluorescence, UVRF)。研究已證實UVRF與P.acnes的密度呈比例相關(guān),可用于皮膚上P.acnes的抑制效果監(jiān)測。但我們偶然發(fā)現(xiàn)一些痤瘡患者的皮損毛孔表面紫外熒光(ultraviolet induced fluorescence, UVF)并不是紅色的,而正常的毛孔卻是紅色的。此現(xiàn)象與"P. acnes是痤瘡的致病菌”這一假說的理論并不相符。以此現(xiàn)象為切入點,我們對尋常性痤瘡患者的皮膚UVF進行了由表及里的研究,并由此繼續(xù)探索痤瘡相關(guān)微生物病因。目的通過下列研究確認(rèn)UVRF(代表P. acnes存在的間接證據(jù))與尋常性痤瘡之間的關(guān)系,并為進一步對痤瘡皮損內(nèi)的相關(guān)微生物研究打下基礎(chǔ),為最終闡明痤瘡的病因、病理,乃至治愈痤瘡提供幫助。1)痤瘡粉刺皮損與非皮損毛孔的表面UVF分布特征,尤其是UVRF的分布；2)單個分離的粉刺角栓UVF顏色特征,與皮膚表面UVF的分布是否一致；3)皮損部位皮膚毛孔的表面UVRF與痤瘡炎癥嚴(yán)重程度之間的關(guān)系,以驗證“卟啉是導(dǎo)致痤瘡炎癥的可能機制”是否成立；4)痤瘡粉刺角栓中的微生物種類觀察、分離與鑒定,以初步探索痤瘡粉刺角栓中的微生物種類分布情況。方法1)用體視顯微鏡分別在紫外光和可見光下拍攝患者皮膚的長波紫外和可見光毛孔照片,統(tǒng)計紅色和非紅色UVF所在的毛孔是皮損還是非皮損,并用x2檢驗皮損和非皮損處的UVF顏色差別。2)隨機選擇患者粉刺皮損毛孔,利用粉刺針分離出粉刺皮損毛孔內(nèi)的角栓,利用熒光顯微鏡以紫外光激發(fā)UVF,拍攝照片,對角栓的UVF色彩模式進行統(tǒng)計,并與表面UVF作比較。3)利用VISIA系統(tǒng)獲取的皮膚血紅素分布照片作為炎癥嚴(yán)重程度研究樣本,并利用Fireworks和ImageJ軟件分離相同部位皮膚毛孔的UVF色彩,計算UVRF的密度與痤瘡嚴(yán)重程度之間的相關(guān)關(guān)系。4)利用一種新設(shè)計的熒光染色方法,觀察角栓標(biāo)本中的各種微生物形態(tài),統(tǒng)計角栓中馬拉色菌的檢出比例,并對典型形態(tài)的微生物進行分離、培養(yǎng)、鑒定。結(jié)果1)統(tǒng)計了45位尋常性痤瘡患者的45組痤瘡皮損區(qū)域398個毛孔的紫外熒光顏色與皮損狀況,86.8%的皮損毛孔UVF不是紅色的,89.1%的非皮損毛孔UVF是紅色的(n=398,x2=222.87,P0.01)2)從粉刺皮損中分離得到276個角栓,50.0%完全沒有紅色熒光,39.0%主要為非紅色,11.0%以紅色為主。單個角栓的UVF色彩分布與皮損毛孔表面UVF的分布一致；3)統(tǒng)計學(xué)檢驗顯示UVRF與炎癥嚴(yán)重程度之間的相關(guān)關(guān)系不具有統(tǒng)計學(xué)意義(n=45,r=0.17,P0.05)4)45位志愿者新鮮標(biāo)本中觀察到的典型疑似微生物形態(tài)10余種,包括高亮的球狀、絮團狀、短棒狀、梭狀、白喉桿菌狀、較小的卵圓狀、高亮的絲狀物、彎曲的長桿狀等。檢出高密度馬拉色菌的占53.0%,檢出少量馬拉色菌的占9.0%,未檢出馬拉色菌的占38.0%,通過培養(yǎng)分離鑒定得到多種／株微生物。結(jié)論本研究通過對痤瘡患者皮膚紫外熒光由表及里的觀察,證實：痤瘡患者粉刺皮損表面和內(nèi)部的紫外熒光顏色主要并不是紅色的。由于毛孔處UVRF由P.acnes合成的卟啉類物質(zhì)發(fā)出,且強度與P.acnes密度比例相關(guān),根據(jù)研究中對P.acnes與UVRF的關(guān)系進行的詳細考證,本研究的結(jié)果提示痤瘡粉刺皮損內(nèi)P.acnes的密度可能不高甚至缺如；色彩和影像學(xué)分析顯示,UVRF與痤瘡患者皮膚的炎癥嚴(yán)重程度不相關(guān),支持前人‘'P.acnes與痤瘡嚴(yán)重程度無關(guān)”的結(jié)論。通過微生物鏡檢、培養(yǎng)觀察發(fā)現(xiàn)痤瘡皮損內(nèi)有大量其它微生物存在。統(tǒng)計顯示53.0%的患者粉刺角栓中馬拉色菌十分密集；鏡檢觀察、分離和培養(yǎng)鑒定顯示痤瘡粉刺皮損中的微生物種類是多樣性的,不同的痤瘡患者皮損中微生物種類有所不同,提示痤瘡可能是一組與不同微生物相關(guān)的毛囊炎,而不一定是一個單一疾病。這些微生物與痤瘡的關(guān)系值得進一步研究。結(jié)合前人在P.acnes是否導(dǎo)致了痤瘡上的研究與爭議,本研究獲得的間接證據(jù)支持"P.acnes可能不是痤瘡的致病菌”這一推測。該推測挑戰(zhàn)了123年來對痤瘡微生物的研究假設(shè)。但是,需要進一步獲取P.acnes在痤瘡皮損中分布的直接證據(jù),以及對其它微生物進行更全面調(diào)查,以確認(rèn)包括P.acnes在內(nèi)的各種微生物在痤瘡發(fā)病過程中的作用。本研究對于推動和突破痤瘡的微生物病因?qū)W研究具有重要意義。
【關(guān)鍵詞】：痤瘡 痤瘡丙酸桿菌 皮膚熒光 皮膚微生物 紫外誘導(dǎo)的紅色熒光 粉刺 角栓 紫外熒光
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R758.733
【目錄】：

• 中文摘要3-5
• Abstract5-9
• 中文對照及縮略詞表9-10
• 研究內(nèi)容10
• 第一部分 緒論10-14
• 1. 背景10-12
• 2. 患者和本研究各部分調(diào)查的共用方法12-14
• 第二部分 痤瘡患者皮損和非皮損毛孔的表面紫外熒光分析14-17
• 1. 引言14
• 2. 材料與方法14-16
• 3. 結(jié)果16
• 4. 小結(jié)16-17
• 第三部分 痤瘡患者粉刺中分離的單個角栓UVF模式與色彩分布17-23
• 1. 引言17
• 2. 材料與方法17-18
• 3. 結(jié)果18-19
• 4. 小結(jié)19-23
• 第四部分 UVRF與痤瘡患者炎癥程度的關(guān)系23-31
• 1 引言23
• 2 方法和原理23-26
• 2.1 患者面部照片拍攝23
• 2.2 分析目標(biāo)區(qū)域的準(zhǔn)備23-25
• 2.3 基于紅色模式照片對炎癥嚴(yán)重程度進行評估25
• 2.4 皮膚毛孔表面熒光的分離及色彩學(xué)分析25-26
• 3 結(jié)果26-29
• 4 小結(jié)29-31
• 第五部分 尋常性痤瘡患者粉刺角栓中微生物的初步觀察與分離31-35
• 0. 引言31-32
• 1. 材料與方法32-33
• 2. 結(jié)果33-34
• 3. 小結(jié)34-35
• 第六部分 討論35-50
• 第七部分 結(jié)論50-52
• 參考文獻52-59
• 附錄59-61
• 致謝61-63
• 課題綜述 痤瘡丙酸桿菌和痤瘡：進展與悖論63-71
• 參考文獻68-71

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 石云;丁大鵬;崔劍平;;冀南地區(qū)城鄉(xiāng)青少年痤瘡流行病學(xué)調(diào)查及危險因素分析[J];中國皮膚性病學(xué)雜志;2008年10期

2 李燦東;高碧珍;成改霞;蔡東華;張永動;;青少年尋常痤瘡發(fā)病規(guī)律的流行病學(xué)研究[J];河南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2006年01期

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本文編號：695569