本文關(guān)鍵詞：Rac1:Rab23促進皮膚鱗癌侵襲的關(guān)鍵分子

  更多相關(guān)文章： Rab23 Rac1 α5β1整合素 鱗癌 皮膚 侵襲 機制

【摘要】：皮膚鱗狀細胞癌(cutaneous squamous cell carcinoma,c SCC)是一種起源于表皮、皮膚附屬器、以及復(fù)層扁平上皮角質(zhì)形成細胞的惡性腫瘤,發(fā)病占皮膚惡性腫瘤的16%,僅次于基底細胞癌,光線性角化病、鮑溫病及角化棘皮瘤均能導(dǎo)致角質(zhì)形成細胞的惡性增殖。c SCC具有侵襲性,可發(fā)生早期轉(zhuǎn)移。因此,鱗狀細胞癌的高轉(zhuǎn)移、易侵襲性是威脅全球人民的公共健康問題,進一步研究皮膚鱗癌侵襲機制,轉(zhuǎn)移以及增值的分子機制,具有重要的價值和深遠的意義。Rab23是小GTP酶Rab超家族成員,具有明顯的細胞內(nèi)囊泡轉(zhuǎn)運功能。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn),Rab23在鱗癌中高表達,且與鱗癌分化負相關(guān);Transwell實驗證實Rab23顯著促進鱗癌細胞侵襲,并調(diào)控侵襲關(guān)鍵分子Rac1的表達。但Rab23促進鱗癌細胞侵襲的機制尚不清楚。本研究擬以皮膚鱗狀細胞癌為研究對象,從臨床標(biāo)本、細胞水平和動物實驗三方面,分別觀察Rab23與Rac1在鱗癌中表達的相關(guān)性,明確Rac1在Rab23促進鱗癌侵襲中的關(guān)鍵作用,探討Rab23調(diào)控Rac1的作用機制,確認Rac1受Rab23調(diào)控后促進鱗癌侵襲的效應(yīng)分子,為全面闡明Rab23促進鱗癌侵襲作用的分子機制奠定基礎(chǔ)。實驗方法:一、穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株的建立及鑒定慢病毒感染建立穩(wěn)定表達不同形式Rab23的Sa3鱗癌細胞株;Western blotting檢測Rab23、Rac1在穩(wěn)定表達不同形式Rab23的Sa3鱗癌細胞株中的表達。二、Rab23促進鱗癌侵襲,并依賴其GTP酶活性1.細胞實驗:Transwell侵襲實驗-檢測表達不同形式Rab23的皮膚鱗癌細胞侵襲力的不同及影響;劃痕實驗-檢測表達不同形式Rab23的鱗癌細胞遷移力的不同及影響;2.動物實驗:裸鼠荷瘤實驗在體觀察Rab23是否促進鱗癌細胞侵襲。三、Rac1在Rab23促鱗癌侵襲中起關(guān)鍵作用1.免疫組化檢測Rab23、Rac1在皮膚鱗狀細胞癌及正常皮膚中的表達,統(tǒng)計分析Rab23、Rac1的陽性表達,分析二者相關(guān)性;2.激光共聚焦檢測Rab23與Rac1在鱗癌細胞中的表達;3.干涉Rac1之后檢測表達不同形式Rab23的鱗癌細胞株侵襲力及遷移力的變化;4.激光共聚焦檢測Rab23與整合素α5β1的關(guān)系;干涉α亞單位后檢測表達不同形式Rab23的鱗癌細胞株侵襲力及遷移力的變化。實驗結(jié)果:1.Rab23在表達不同形式Rab23的鱗癌細胞中的表達:Sa3-Rab23-wt、Sa3-Rab23-Q68L中高表達,在Sa3-Rab23-S23N、Sa3-Rab23-RNAi中低表達,說明Sa3-Rab23不同表達細胞株建系成功;Rac1在表達不同形式Rab23的鱗癌細胞中的表達:Sa3-Rab23-wt、Sa3-Rab23-Q68L中高表達,在Sa3-Rab23-S23N、Sa3-Rab23-RNAi中低表達。2.Transwell實驗檢測Rab23對Sa3鱗癌細胞侵襲力的影響:細胞侵襲能力為Sa3-Rab23-Q68LSa3-Rab23-wtSa3-Rab23-S23NSa3-Rab23-RNAi.3.細胞劃痕實驗檢測Rab23對Sa3鱗癌細胞遷移能力的影響:細胞遷移能力為Sa3-Rab23-Q68LSa3-Rab23-wtSa3-Rab23-S23NSa3-Rab23-RNAi.4.裸鼠荷瘤實驗結(jié)果示:Sa3-Rab23-Q68L組小鼠皮下注射1周后注射部位皮下形成直徑約0.6cm3大小結(jié)節(jié),Sa3-Rab23-S23N、Sa3-Rab23-RNAi各組未成瘤。5.Rab23、Rac1在皮膚鱗狀細胞癌中陽性表達,且在中低分化鱗癌中陽性表達程度較高;Rab23、Rac1在正常皮膚中不表達;Rab23與Rac1的表達正相關(guān)。6.激光共聚焦觀察結(jié)果顯示:Sa3-Rab23-wt、Sa3-Rab23-Q68L細胞株Rab23在包膜上高表達,且Rac1、α5β1整合素在包膜處與Rab23共定位。7.不同方式干涉Rac1后Transwell、細胞劃痕實驗檢測Sa3鱗癌細胞侵襲能力、遷移能力的影響:Sa3細胞系行Rac1-inhibitor后,各株細胞侵襲能力、遷移能力均明顯下降;Sac3細胞系行干涉Rac1表達后,細胞侵襲能力、遷移能力與對照組相比均下降。8.干涉α5β1整合素的α亞單位后Transwell、細胞劃痕實驗檢測Sa3鱗癌細胞侵襲能力的影響:Sa3細胞系行α5β1整合素的α亞單位敲除后,細胞侵襲能力與對照組相比均下降。主要結(jié)論:1.Rab23、Rac1在皮膚鱗癌中高表達,且Rab23與Rac1的表達正相關(guān),說明Rab23可能在皮膚鱗癌中正調(diào)控Rac1的表達。2.Rab23高表達可以促進Sa3鱗癌細胞的侵襲和遷移,并且其可能是通過調(diào)控Rac1促進侵襲和轉(zhuǎn)移的。3.Rab23調(diào)控Rac1是可能是通過調(diào)控α5β1整合素完成的。
【關(guān)鍵詞】：Rab23 Rac1 α5β1整合素 鱗癌 皮膚 侵襲 機制
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R739.5
【目錄】：

• 縮略語表4-6
• 中文摘要6-9
• ABSTRACT9-12
• 前言12-13
• 文獻回顧13-19
• 1 材料19-24
• 2 實驗方法24-31
• 3 實驗結(jié)果31-41
• 4 討論41-48
• 小結(jié)48-49
• 參考文獻49-55
• 個人簡歷和研究成果55-56
• 致謝56

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉云貞;楊頂權(quán);白彥萍;;手術(shù)切除頭部皮膚鱗癌1例[J];實用皮膚病學(xué)雜志;2010年03期

2 許俏;羅俊;潘年松;;中藥抗皮膚鱗癌的體外實驗機制探討[J];中國醫(yī)藥指南;2012年29期

3 戶曉紅;左足巂皮膚鱗癌伴左鎖骨上淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移—例[J];實用癌癥雜志;1995年04期

4 李素卿,成志明,張仁亞;多發(fā)性皮膚鱗癌1例[J];中國皮膚性病學(xué)雜志;1997年01期

5 張淑娟;劉寧;代曉明;李逸松;;皮膚鱗癌動物模型構(gòu)建[J];昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2009年S2期

6 劉寧;張淑娟;代曉明;李逸松;;紫外線引發(fā)皮膚鱗癌的機制研究[J];昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2009年S2期

7 朱楨;曹海鵬;齊鳳琴;張素華;;腫瘤抑癌基因PTEN蛋白在皮膚鱗癌中的表達及其意義[J];中國誤診學(xué)雜志;2011年15期

8 匡玉珍;肖新華;;結(jié)締組織生長因子的表達與皮膚鱗癌臨床分期和病理分級的關(guān)系[J];中南醫(yī)學(xué)科學(xué)雜志;2011年04期

9 吳夢濤;袁瑞敏;趙梅;;皮膚鱗癌轉(zhuǎn)移并發(fā)下肢靜脈血栓1例[J];中華全科醫(yī)學(xué);2012年05期

10 衛(wèi)江華;關(guān)哲;;60例皮膚鱗癌綜合治療分析[J];山西職工醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2012年03期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 楊欣;馬勇光;張潔;尤維濤;侯俊杰;余若輝;郭亮;王俠;李東;李健寧;;游離股前外側(cè)皮瓣修復(fù)巨大皮膚鱗癌切除后缺損[A];中華醫(yī)學(xué)會整形外科學(xué)分會第十一次全國會議、中國人民解放軍整形外科學(xué)專業(yè)委員會學(xué)術(shù)交流會、中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會醫(yī)學(xué)美容專業(yè)委員會全國會議論文集[C];2011年

2 楊欣;馬勇光;張潔;尤維濤;侯俊杰;余若輝;郭亮;王俠;李東;李健寧;;游離股前外側(cè)皮瓣修復(fù)巨大皮膚鱗癌切除后缺損[A];中華醫(yī)學(xué)會整形外科學(xué)分會第十一次全國會議、中國人民解放軍整形外科學(xué)專業(yè)委員會學(xué)術(shù)交流會、中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會醫(yī)學(xué)美容專業(yè)委員會全國會議論文集[C];2011年

3 崔榮;馮捷;閆小寧;李文彬;張彩晴;胡剛;史丙俊;魏玉萍;曹偉;;腫瘤-成纖維細胞相互作用誘導(dǎo)肌成纖維細胞分化及對皮膚鱗癌生長侵襲作用的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第14次全國皮膚性病學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2008年

4 趙娟;顏蘭香;;抑癌基因FHIT在皮膚鱗癌中的表達及其甲基化狀態(tài)[A];中華醫(yī)學(xué)會第14次全國皮膚性病學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2008年

5 王珍;何春滌;陳洪鐸;王雅坤;肖汀;;維甲酸、γ-干擾素誘導(dǎo)皮膚鱗癌細胞發(fā)生細胞凋亡的機制研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第十二次全國皮膚性病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2006年

6 賈近博;林盡染;陳國梁;徐金華;陳明華;;羥基脲相關(guān)多發(fā)疣狀皮膚角化并發(fā)皮膚鱗癌一例[A];中華醫(yī)學(xué)會第16次全國皮膚性病學(xué)術(shù)年會摘要集[C];2010年

7 鄭焱;;皮膚鱗癌中DBPA的升高及其與表皮分化的關(guān)系[A];2010全國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

8 王建力;張捷;;皮膚鱗癌中E-cad表達與微血管密度相關(guān)性的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第十二次全國皮膚性病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2006年

9 段志武;史景祿;王成;;皮膚鱗癌中的Bcl-2表達[A];2001年中國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2001年

10 李泓馨;;皮膚鱗癌A431腫瘤干細胞的檢測以及初步鑒定[A];中華醫(yī)學(xué)會第十八次全國皮膚性病學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2012年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 梁俊琴;皮膚鱗癌組織中SFRPs家族甲基化狀態(tài)及其作用機制的研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2014年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 馬欣欣;腺病毒介導(dǎo)IL-24基因誘導(dǎo)皮膚鱗狀細胞癌細胞凋亡的影響[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2015年

2 王曉杰;DAMPs介導(dǎo)ALA光動力誘導(dǎo)皮膚鱗癌細胞免疫原性死亡的研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

3 苗葉;Rac1:Rab23促進皮膚鱗癌侵襲的關(guān)鍵分子[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

4 趙思成;熊果酸對人皮膚鱗癌的抑制作用及機制研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2010年

5 張淑娟;紫外線誘導(dǎo)裸鼠皮膚鱗癌動物模型的構(gòu)建[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2011年

6 宣敏;基質(zhì)金屬蛋白酶-12及其組織抑制物-1在皮膚鱗癌中的表達研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2011年

7 楊陽;GSK3β調(diào)節(jié)細胞自噬在皮膚鱗癌發(fā)病中的作用及分子機制[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2012年

8 余秀琴;調(diào)控NPM對人皮膚鱗癌細胞增殖活性的影響研究[D];蘇州大學(xué);2013年

9 李桂寅;人類皰疹病毒8型ORF26和ORF75基因亞型在鱗狀細胞癌中的分布[D];石河子大學(xué);2011年

10 石磊;5-氨基酮戊酸聚乳酸羥基乙酸納米粒的制備及其光動力療法抑制人皮膚鱗癌A-431細胞體外增殖研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2012年

，

本文編號：639828