本文關(guān)鍵詞：Rac1:Rab23促進(jìn)皮膚鱗癌侵襲的關(guān)鍵分子

  更多相關(guān)文章： Rab23 Rac1 α5β1整合素 鱗癌 皮膚 侵襲 機(jī)制

【摘要】：皮膚鱗狀細(xì)胞癌(cutaneous squamous cell carcinoma,c SCC)是一種起源于表皮、皮膚附屬器、以及復(fù)層扁平上皮角質(zhì)形成細(xì)胞的惡性腫瘤,發(fā)病占皮膚惡性腫瘤的16%,僅次于基底細(xì)胞癌,光線性角化病、鮑溫病及角化棘皮瘤均能導(dǎo)致角質(zhì)形成細(xì)胞的惡性增殖。c SCC具有侵襲性,可發(fā)生早期轉(zhuǎn)移。因此,鱗狀細(xì)胞癌的高轉(zhuǎn)移、易侵襲性是威脅全球人民的公共健康問(wèn)題,進(jìn)一步研究皮膚鱗癌侵襲機(jī)制,轉(zhuǎn)移以及增值的分子機(jī)制,具有重要的價(jià)值和深遠(yuǎn)的意義。Rab23是小GTP酶Rab超家族成員,具有明顯的細(xì)胞內(nèi)囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)功能。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn),Rab23在鱗癌中高表達(dá),且與鱗癌分化負(fù)相關(guān);Transwell實(shí)驗(yàn)證實(shí)Rab23顯著促進(jìn)鱗癌細(xì)胞侵襲,并調(diào)控侵襲關(guān)鍵分子Rac1的表達(dá)。但Rab23促進(jìn)鱗癌細(xì)胞侵襲的機(jī)制尚不清楚。本研究擬以皮膚鱗狀細(xì)胞癌為研究對(duì)象,從臨床標(biāo)本、細(xì)胞水平和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)三方面,分別觀察Rab23與Rac1在鱗癌中表達(dá)的相關(guān)性,明確Rac1在Rab23促進(jìn)鱗癌侵襲中的關(guān)鍵作用,探討Rab23調(diào)控Rac1的作用機(jī)制,確認(rèn)Rac1受Rab23調(diào)控后促進(jìn)鱗癌侵襲的效應(yīng)分子,為全面闡明Rab23促進(jìn)鱗癌侵襲作用的分子機(jī)制奠定基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)方法:一、穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株的建立及鑒定慢病毒感染建立穩(wěn)定表達(dá)不同形式Rab23的Sa3鱗癌細(xì)胞株;Western blotting檢測(cè)Rab23、Rac1在穩(wěn)定表達(dá)不同形式Rab23的Sa3鱗癌細(xì)胞株中的表達(dá)。二、Rab23促進(jìn)鱗癌侵襲,并依賴其GTP酶活性1.細(xì)胞實(shí)驗(yàn):Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)-檢測(cè)表達(dá)不同形式Rab23的皮膚鱗癌細(xì)胞侵襲力的不同及影響;劃痕實(shí)驗(yàn)-檢測(cè)表達(dá)不同形式Rab23的鱗癌細(xì)胞遷移力的不同及影響;2.動(dòng)物實(shí)驗(yàn):裸鼠荷瘤實(shí)驗(yàn)在體觀察Rab23是否促進(jìn)鱗癌細(xì)胞侵襲。三、Rac1在Rab23促鱗癌侵襲中起關(guān)鍵作用1.免疫組化檢測(cè)Rab23、Rac1在皮膚鱗狀細(xì)胞癌及正常皮膚中的表達(dá),統(tǒng)計(jì)分析Rab23、Rac1的陽(yáng)性表達(dá),分析二者相關(guān)性;2.激光共聚焦檢測(cè)Rab23與Rac1在鱗癌細(xì)胞中的表達(dá);3.干涉Rac1之后檢測(cè)表達(dá)不同形式Rab23的鱗癌細(xì)胞株侵襲力及遷移力的變化;4.激光共聚焦檢測(cè)Rab23與整合素α5β1的關(guān)系;干涉α亞單位后檢測(cè)表達(dá)不同形式Rab23的鱗癌細(xì)胞株侵襲力及遷移力的變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果:1.Rab23在表達(dá)不同形式Rab23的鱗癌細(xì)胞中的表達(dá):Sa3-Rab23-wt、Sa3-Rab23-Q68L中高表達(dá),在Sa3-Rab23-S23N、Sa3-Rab23-RNAi中低表達(dá),說(shuō)明Sa3-Rab23不同表達(dá)細(xì)胞株建系成功;Rac1在表達(dá)不同形式Rab23的鱗癌細(xì)胞中的表達(dá):Sa3-Rab23-wt、Sa3-Rab23-Q68L中高表達(dá),在Sa3-Rab23-S23N、Sa3-Rab23-RNAi中低表達(dá)。2.Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)Rab23對(duì)Sa3鱗癌細(xì)胞侵襲力的影響:細(xì)胞侵襲能力為Sa3-Rab23-Q68LSa3-Rab23-wtSa3-Rab23-S23NSa3-Rab23-RNAi.3.細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)Rab23對(duì)Sa3鱗癌細(xì)胞遷移能力的影響:細(xì)胞遷移能力為Sa3-Rab23-Q68LSa3-Rab23-wtSa3-Rab23-S23NSa3-Rab23-RNAi.4.裸鼠荷瘤實(shí)驗(yàn)結(jié)果示:Sa3-Rab23-Q68L組小鼠皮下注射1周后注射部位皮下形成直徑約0.6cm3大小結(jié)節(jié),Sa3-Rab23-S23N、Sa3-Rab23-RNAi各組未成瘤。5.Rab23、Rac1在皮膚鱗狀細(xì)胞癌中陽(yáng)性表達(dá),且在中低分化鱗癌中陽(yáng)性表達(dá)程度較高;Rab23、Rac1在正常皮膚中不表達(dá);Rab23與Rac1的表達(dá)正相關(guān)。6.激光共聚焦觀察結(jié)果顯示:Sa3-Rab23-wt、Sa3-Rab23-Q68L細(xì)胞株Rab23在包膜上高表達(dá),且Rac1、α5β1整合素在包膜處與Rab23共定位。7.不同方式干涉Rac1后Transwell、細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)Sa3鱗癌細(xì)胞侵襲能力、遷移能力的影響:Sa3細(xì)胞系行Rac1-inhibitor后,各株細(xì)胞侵襲能力、遷移能力均明顯下降;Sac3細(xì)胞系行干涉Rac1表達(dá)后,細(xì)胞侵襲能力、遷移能力與對(duì)照組相比均下降。8.干涉α5β1整合素的α亞單位后Transwell、細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)Sa3鱗癌細(xì)胞侵襲能力的影響:Sa3細(xì)胞系行α5β1整合素的α亞單位敲除后,細(xì)胞侵襲能力與對(duì)照組相比均下降。主要結(jié)論:1.Rab23、Rac1在皮膚鱗癌中高表達(dá),且Rab23與Rac1的表達(dá)正相關(guān),說(shuō)明Rab23可能在皮膚鱗癌中正調(diào)控Rac1的表達(dá)。2.Rab23高表達(dá)可以促進(jìn)Sa3鱗癌細(xì)胞的侵襲和遷移,并且其可能是通過(guò)調(diào)控Rac1促進(jìn)侵襲和轉(zhuǎn)移的。3.Rab23調(diào)控Rac1是可能是通過(guò)調(diào)控α5β1整合素完成的。
【關(guān)鍵詞】：Rab23 Rac1 α5β1整合素 鱗癌 皮膚 侵襲 機(jī)制
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R739.5
【目錄】：

• 縮略語(yǔ)表4-6
• 中文摘要6-9
• ABSTRACT9-12
• 前言12-13
• 文獻(xiàn)回顧13-19
• 1 材料19-24
• 2 實(shí)驗(yàn)方法24-31
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果31-41
• 4 討論41-48
• 小結(jié)48-49
• 參考文獻(xiàn)49-55
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷和研究成果55-56
• 致謝56

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 劉云貞;楊頂權(quán);白彥萍;;手術(shù)切除頭部皮膚鱗癌1例[J];實(shí)用皮膚病學(xué)雜志;2010年03期

2 許俏;羅俊;潘年松;;中藥抗皮膚鱗癌的體外實(shí)驗(yàn)機(jī)制探討[J];中國(guó)醫(yī)藥指南;2012年29期

3 戶曉紅;左足巂皮膚鱗癌伴左鎖骨上淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移—例[J];實(shí)用癌癥雜志;1995年04期

4 李素卿,成志明,張仁亞;多發(fā)性皮膚鱗癌1例[J];中國(guó)皮膚性病學(xué)雜志;1997年01期

5 張淑娟;劉寧;代曉明;李逸松;;皮膚鱗癌動(dòng)物模型構(gòu)建[J];昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2009年S2期

6 劉寧;張淑娟;代曉明;李逸松;;紫外線引發(fā)皮膚鱗癌的機(jī)制研究[J];昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2009年S2期

7 朱楨;曹海鵬;齊鳳琴;張素華;;腫瘤抑癌基因PTEN蛋白在皮膚鱗癌中的表達(dá)及其意義[J];中國(guó)誤診學(xué)雜志;2011年15期

8 匡玉珍;肖新華;;結(jié)締組織生長(zhǎng)因子的表達(dá)與皮膚鱗癌臨床分期和病理分級(jí)的關(guān)系[J];中南醫(yī)學(xué)科學(xué)雜志;2011年04期

9 吳夢(mèng)濤;袁瑞敏;趙梅;;皮膚鱗癌轉(zhuǎn)移并發(fā)下肢靜脈血栓1例[J];中華全科醫(yī)學(xué);2012年05期

10 衛(wèi)江華;關(guān)哲;;60例皮膚鱗癌綜合治療分析[J];山西職工醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2012年03期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 楊欣;馬勇光;張潔;尤維濤;侯俊杰;余若輝;郭亮;王俠;李東;李健寧;;游離股前外側(cè)皮瓣修復(fù)巨大皮膚鱗癌切除后缺損[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)整形外科學(xué)分會(huì)第十一次全國(guó)會(huì)議、中國(guó)人民解放軍整形外科學(xué)專業(yè)委員會(huì)學(xué)術(shù)交流會(huì)、中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)醫(yī)學(xué)美容專業(yè)委員會(huì)全國(guó)會(huì)議論文集[C];2011年

2 楊欣;馬勇光;張潔;尤維濤;侯俊杰;余若輝;郭亮;王俠;李東;李健寧;;游離股前外側(cè)皮瓣修復(fù)巨大皮膚鱗癌切除后缺損[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)整形外科學(xué)分會(huì)第十一次全國(guó)會(huì)議、中國(guó)人民解放軍整形外科學(xué)專業(yè)委員會(huì)學(xué)術(shù)交流會(huì)、中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)醫(yī)學(xué)美容專業(yè)委員會(huì)全國(guó)會(huì)議論文集[C];2011年

3 崔榮;馮捷;閆小寧;李文彬;張彩晴;胡剛;史丙俊;魏玉萍;曹偉;;腫瘤-成纖維細(xì)胞相互作用誘導(dǎo)肌成纖維細(xì)胞分化及對(duì)皮膚鱗癌生長(zhǎng)侵襲作用的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第14次全國(guó)皮膚性病學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

4 趙娟;顏蘭香;;抑癌基因FHIT在皮膚鱗癌中的表達(dá)及其甲基化狀態(tài)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第14次全國(guó)皮膚性病學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

5 王珍;何春滌;陳洪鐸;王雅坤;肖汀;;維甲酸、γ-干擾素誘導(dǎo)皮膚鱗癌細(xì)胞發(fā)生細(xì)胞凋亡的機(jī)制研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二次全國(guó)皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

6 賈近博;林盡染;陳國(guó)梁;徐金華;陳明華;;羥基脲相關(guān)多發(fā)疣狀皮膚角化并發(fā)皮膚鱗癌一例[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第16次全國(guó)皮膚性病學(xué)術(shù)年會(huì)摘要集[C];2010年

7 鄭焱;;皮膚鱗癌中DBPA的升高及其與表皮分化的關(guān)系[A];2010全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

8 王建力;張捷;;皮膚鱗癌中E-cad表達(dá)與微血管密度相關(guān)性的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二次全國(guó)皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

9 段志武;史景祿;王成;;皮膚鱗癌中的Bcl-2表達(dá)[A];2001年中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2001年

10 李泓馨;;皮膚鱗癌A431腫瘤干細(xì)胞的檢測(cè)以及初步鑒定[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十八次全國(guó)皮膚性病學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2012年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 梁俊琴;皮膚鱗癌組織中SFRPs家族甲基化狀態(tài)及其作用機(jī)制的研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2014年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 馬欣欣;腺病毒介導(dǎo)IL-24基因誘導(dǎo)皮膚鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞凋亡的影響[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2015年

2 王曉杰;DAMPs介導(dǎo)ALA光動(dòng)力誘導(dǎo)皮膚鱗癌細(xì)胞免疫原性死亡的研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

3 苗葉;Rac1:Rab23促進(jìn)皮膚鱗癌侵襲的關(guān)鍵分子[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

4 趙思成;熊果酸對(duì)人皮膚鱗癌的抑制作用及機(jī)制研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2010年

5 張淑娟;紫外線誘導(dǎo)裸鼠皮膚鱗癌動(dòng)物模型的構(gòu)建[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2011年

6 宣敏;基質(zhì)金屬蛋白酶-12及其組織抑制物-1在皮膚鱗癌中的表達(dá)研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2011年

7 楊陽(yáng);GSK3β調(diào)節(jié)細(xì)胞自噬在皮膚鱗癌發(fā)病中的作用及分子機(jī)制[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2012年

8 余秀琴;調(diào)控NPM對(duì)人皮膚鱗癌細(xì)胞增殖活性的影響研究[D];蘇州大學(xué);2013年

9 李桂寅;人類皰疹病毒8型ORF26和ORF75基因亞型在鱗狀細(xì)胞癌中的分布[D];石河子大學(xué);2011年

10 石磊;5-氨基酮戊酸聚乳酸羥基乙酸納米粒的制備及其光動(dòng)力療法抑制人皮膚鱗癌A-431細(xì)胞體外增殖研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2012年

，

本文編號(hào)：639828