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基于28S rRNA基因序列的巢式PCR方法快速檢測甲真菌病病原菌種

發(fā)布時間:2017-08-06 15:12

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【摘要】:目的應(yīng)用基于28S rRNA基因序列的巢式PCR的方法快速診斷甲真菌病。方法液氮冷凍甲標本,微量法提取DNA,應(yīng)用特異性引物,巢式PCR方法擴增DNA。結(jié)果本組共收集180例直接鏡檢和培養(yǎng)均為陽性的甲標本,First PCR 144例陽性,Nest PCR 168例陽性。其中127例標本經(jīng)PCR擴增可產(chǎn)生約137bp目的片段,為紅色毛癬菌;26例標本經(jīng)PCR擴增可產(chǎn)生約102bp目的片段,為須癬毛癬菌;10例標本經(jīng)PCR擴增可產(chǎn)生約445bp目的片段,為白念珠菌;5例標本經(jīng)PCR擴增可產(chǎn)生約170bp目的片段,為曲霉。巢式PCR敏感性為93.33%(168/180),特異性為100%(168/168)。結(jié)論此方法是一種快速、敏感、特異的診斷甲真菌病的方法。
【作者單位】: 武漢市第一醫(yī)院皮膚科;武漢市第一醫(yī)院檢驗科;
【關(guān)鍵詞】甲真菌病 巢式PCR
【基金】:湖北省自然基金(2011CDB303)
【分類號】:R756
【正文快照】: 甲真菌病是指任何真菌引起的甲感染。包括皮膚癬菌、酵母菌、絲狀菌及混合感染,其中皮膚癬菌約占全部感染的67%-90%,而皮膚癬菌中約80%~90%為紅色毛癬菌及須癬毛癬菌[1]。目前國內(nèi)診斷的主要依據(jù)為真菌的直接鏡檢和培養(yǎng),前者不能鑒定到真菌的種類,后者敏感性差,耗時。真菌鏡檢

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本文編號:630339

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