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三維培養(yǎng)條件下流體剪切力對人真皮成纖維細胞成骨分化的影響

發(fā)布時間:2017-08-04 01:27

  本文關鍵詞:三維培養(yǎng)條件下流體剪切力對人真皮成纖維細胞成骨分化的影響


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【摘要】:目的通過準靜態(tài)平面流場灌注系統(tǒng),探討不同流體剪切力對三維培養(yǎng)條件下人真皮成纖維細胞增殖和成骨分化的影響。方法將人真皮成纖維細胞按2×105/m L密度接種于膠原水凝膠支架中,同時設置低流速處理組(low flow velocity treatment group,LFV組)和高流速處理組(high flow velocity treatment group,HFV組)與三維靜態(tài)培養(yǎng)的對照組(control group)進行比較。第3、6天和9天對各實驗組進行HE染色并計數(shù)細胞;全程每隔3天測1次培養(yǎng)基中葡萄糖的消耗量;第21天行茜素紅染色觀察各組誘導礦化情況,同時采用FQ-PCR定量測定ALP和BMP-2基因的表達。結(jié)果 3組細胞均增殖明顯,第6、9天LFV組細胞增殖最多,組間比較差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05);實驗周期內(nèi)各組培養(yǎng)基的葡萄糖含量均呈下降趨勢,但組間比較差異無統(tǒng)計學意義;第21天茜素紅染色3組均呈陽性,礦化結(jié)節(jié)面積大小統(tǒng)計顯示HFV組最大,組間比較差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05);ALP和BMP-2基因表達量分別為LFV組:(1.780±0.233)/(2.788±0.241);HFV組:(2.262±0.306)/(4.576±0.253);對照組:(1.147±0.215)/(0.354±0.063),組間比較差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論流體剪切力能促進人真皮成纖維細胞的增殖和成骨分化,且流體剪切力較小時有利于細胞增殖,而較大時會在一定程度抑制細胞增殖。
【作者單位】: 第三軍醫(yī)大學大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所皮膚科;重慶醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院皮膚科;廣州軍區(qū)武漢總院皮膚科;成都軍區(qū)總醫(yī)院皮膚科;第三軍醫(yī)大學大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所整形美容科;
【關鍵詞】人真皮成纖維細胞 灌注培養(yǎng) 流體剪切力 三維支架 成骨分化
【基金】:國家自然科學基金面上項目(31570975)~~
【分類號】:R318.01
【正文快照】: 漢,廣州軍區(qū)武漢總院皮膚科3;610083成都,成都軍區(qū)總醫(yī)院皮膚科4)Supported by the General Program of National Natural Science Foundation of China(31570975).Corresponding author:Wu Jinjin,E-mail:wjjj@163.com近年來隨著研究的不斷深入,成纖維細胞(fibro-blasts,Fbs)

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