本文關(guān)鍵詞：窄譜中波紫外線對人角質(zhì)形成細(xì)胞趨化因子CCL22表達(dá)的調(diào)控作用及其機制研究

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【摘要】：白癜風(fēng)(vitiligo)是一種累及皮膚和黏膜的損容性皮膚病,特征性表現(xiàn)為局限性或泛發(fā)性脫色斑,病理上表現(xiàn)為皮損中具有功能的黑素細(xì)胞減少或消失。大量研究表明,白癜風(fēng)的發(fā)生發(fā)展是遺傳、環(huán)境與免疫共同作用的結(jié)果。白癜風(fēng)患者外周血中CD4+、CD8+T細(xì)胞數(shù)量及比率異常,且CD4+T淋巴細(xì)胞HLA-DR表達(dá)顯著增加,增殖和黏附能力均顯著增強,并檢測到循環(huán)皮膚歸巢的黑素細(xì)胞特異性毒性殺傷性T細(xì)胞(CTL),提示T細(xì)胞免疫應(yīng)答參與白癜風(fēng)的發(fā)生、發(fā)展。CD4+CD25+調(diào)節(jié)型T細(xì)胞(Regulatory T cells,Treg細(xì)胞)是一種具有免疫抑制功能的T細(xì)胞亞群,它在維持機體免疫自穩(wěn)和免疫耐受過程中發(fā)揮重要作用。研究發(fā)現(xiàn),白癜風(fēng)患者外周血及皮損中Treg細(xì)胞數(shù)量下降,且患者皮損周的CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞對Treg反應(yīng)性均降低,表明白癜風(fēng)患者存在Treg細(xì)胞功能受損。最近在白癜風(fēng)動物模型研究發(fā)現(xiàn),通過過繼轉(zhuǎn)移Treg細(xì)胞,或以CCL22基因槍誘導(dǎo)Treg細(xì)胞向皮膚遷移,以雷帕霉素誘導(dǎo)Treg細(xì)胞功能活性增強,均可減緩白癜風(fēng)局部Th1型免疫應(yīng)答,促進白癜風(fēng)復(fù)色,提示增強Treg細(xì)胞皮膚遷移或提高其功能活性是治療白癜風(fēng)的關(guān)鍵。目前臨床上尚無特效白癜風(fēng)治療方法,窄譜中波紫外線(narrow band-ultraviolet B,NB-UVB)因其療效顯著且副作用小而廣泛應(yīng)用。關(guān)于NB-UVB治療皮膚病的作用機制,尚不完全清楚。以往有研究報道,NB-UVB照射皮膚可誘導(dǎo)多種趨化因子表達(dá),從而調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞在皮膚組織的定居及遷移,但NB-UVN是否參與調(diào)控Treg細(xì)胞及其具體機制尚不清楚。目的:本研究擬在體外細(xì)胞水平,觀察NB-UVB對角質(zhì)形成細(xì)胞分泌趨化因子CCL22的影響,并進一步探討其具體機制,從而明確NB-UVB治療是否起到誘導(dǎo)Treg細(xì)胞向皮膚遷移的作用。方法:1.HaCaT細(xì)胞予以不同劑量NB-UVB(0、100、200、400 mJ/cm2)照射,在不同時間點收集細(xì)胞裂解液及上清,采用RT-PCR、Western Blot及ELISA等方法檢測CCL22的表達(dá)及分泌情況;2.HaCaT細(xì)胞予以不同劑量NB-UVB(0、100、200、400 mJ/cm2)照射,采用Western Blot篩選可能參與CCL22表達(dá)的信號通路;3.以NF-κB抑制劑PDTC預(yù)處理HaCaT細(xì)胞后進行NB-UVB照射,收集細(xì)胞裂解液及上清,采用RT-PCR、Western Blot及ELISA等方法檢測CCL22 mRNA表達(dá)及分泌情況。結(jié)果:1.NB-UVB照射后HaCaT細(xì)胞CCL22 mRNA表達(dá)水平顯著升高,并呈現(xiàn)NB-UVB劑量依賴性;ELISA檢測證實NB-UVB照射后CCL22分泌水平呈時間依賴方式顯著上調(diào);2.HaCaT細(xì)胞經(jīng)NB-UVB照射后2小時,隨著NB-UVB照射劑量增強,磷酸化的NF-κB p65水平顯著升高,同時CCL22蛋白表達(dá)水平也呈現(xiàn)上調(diào)趨勢;3.NF-κB p65特異抑制劑PDTC預(yù)處理HaCaT細(xì)胞顯著降低NB-UVB誘導(dǎo)的CCL22 mRNA及分泌水平。結(jié)論:通過本課題研究,我們首次明確NB-UVB可通過活化NF-κB信號促進角質(zhì)形成細(xì)胞表達(dá)分泌趨化因子CCL22,可能促進Treg細(xì)胞向皮膚遷移,從而抑制皮損局部自身免疫反應(yīng),促進白癜風(fēng)臨床治療。
【關(guān)鍵詞】：窄譜中波紫外線(NB-UVB) 人角質(zhì)形成細(xì)胞 調(diào)節(jié)型T細(xì)胞 CCL22
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R758.41
【目錄】：

• 縮略語表4-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-12
• 前言12-14
• 文獻(xiàn)回顧14-18
• 1 材料18-22
• 1.1 主要儀器設(shè)備18-19
• 1.2 主要試劑19-20
• 1.3 主要試劑配制20-22
• 2 方法22-28
• 2.1 人角質(zhì)形成細(xì)胞系（HaCaT）的培養(yǎng)22
• 2.2 NB-UVB照射角質(zhì)形成細(xì)胞的劑量及時間22-23
• 2.3 NB-UVB對角質(zhì)形成細(xì)胞CCL22 mRNA表達(dá)的影響23-25
• 2.4 NB-UVB對角質(zhì)形成細(xì)胞CCL22蛋白分泌的影響25-26
• 2.5 NB-UVB對角質(zhì)形成細(xì)胞中CCL22蛋白表達(dá)的影響26-27
• 2.6 NB-UVB對角質(zhì)形成細(xì)胞NF-kB p65信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的Western-blot檢測27
• 2.7 抑制NF-kB p65活性后NB-UVB對CCL22蛋白表達(dá)及分泌的影響27-28
• 2.8 實驗數(shù)據(jù)分析方法28
• 3 結(jié)果28-30
• 3.1 NB-UVB誘導(dǎo)HaCaT細(xì)胞表達(dá)分泌CCL2228-29
• 3.2 NB-UVB誘導(dǎo)HaCaT細(xì)胞表達(dá)分泌CCL22與NF-κB信號通路活化相關(guān)29
• 3.3 NB-UVB通過活化NF-κB信號通路誘導(dǎo)HaCaT細(xì)胞表達(dá)分泌CCL2229-30
• 4 討論30-33
• 小結(jié)33-35
• 參考文獻(xiàn)35-41
• 個人簡歷和研究成果41-42
• 致謝42

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1 孫鳳蘭,王國英,李其平,吳延芳;氮氧化物對人角質(zhì)形成細(xì)胞氧化性損傷的保護作用[J];中華皮膚科雜志;2002年06期

2 盧寧,劉玉峰,王剛,張海龍,趙小東;人角質(zhì)形成細(xì)胞培養(yǎng)的實驗研究[J];中國美容醫(yī)學(xué);2004年05期

3 趙春霞;在體外用腺病毒增強受體介導(dǎo)系統(tǒng)有效轉(zhuǎn)染人角質(zhì)形成細(xì)胞[J];國外醫(yī)學(xué).皮膚性病學(xué)分冊;2001年03期

4 王亭;楊雪瑩;何瑞;曹玉廣;;構(gòu)樹總黃酮對長波紫外線引起人角質(zhì)形成細(xì)胞損傷的防護作用[J];中華勞動衛(wèi)生職業(yè)病雜志;2005年06期

5 郭慶;方圣;曾凡欽;李伯友;朱曉浚;譚國珍;;人角質(zhì)形成細(xì)胞蛋白質(zhì)雙向電泳技術(shù)的建立和優(yōu)化[J];中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2008年23期

6 董秀芹,王寶璽,袁兆莊;中波紫外線誘導(dǎo)的人角質(zhì)形成細(xì)胞凋亡與SSA/Ro抗原表達(dá)[J];中華皮膚科雜志;2003年06期

7 張瑞芳;甄莉;;腫瘤壞死因子誘導(dǎo)人角質(zhì)形成細(xì)胞β-防御素-2表達(dá)的研究[J];中國藥物與臨床;2007年02期

8 史毓杰;曾抗;楊健;楊文林;;人角質(zhì)形成細(xì)胞的體外改良培養(yǎng)及生物學(xué)特征[J];嶺南皮膚性病科雜志;2009年05期

9 史毓杰;曾抗;李國鋒;楊健;;POD-SLN對人角質(zhì)形成細(xì)胞凋亡的影響及其在細(xì)胞內(nèi)的分布[J];山東醫(yī)藥;2010年48期

10 周建大,羅成群,陳勇,夏昆,陳道瑾;硅納米載體轉(zhuǎn)染成人角質(zhì)形成細(xì)胞的初步研究[J];中國醫(yī)師雜志;2005年10期

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1 鐘華;郝飛;夏汝山;翟志芳;張瑛;鐘白玉;唐書謙;;人角質(zhì)形成細(xì)胞中半胱氨酰白三烯受體的表達(dá)和功能研究[A];2008全國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2008年

2 鐘華;郝飛;夏汝山;鐘白玉;唐書謙;翟志芳;張瑛;;人角質(zhì)形成細(xì)胞中半胱氨酰白三烯受體的表達(dá)和功能[A];中華醫(yī)學(xué)會第14次全國皮膚性病學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2008年

3 方圣;郭慶;曾凡欽;李伯友;;人角質(zhì)形成細(xì)胞蛋白質(zhì)雙向電泳技術(shù)的建立和優(yōu)化[A];中華醫(yī)學(xué)會第14次全國皮膚性病學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2008年

4 王曉艷;杜娟;張建中;;過氧化氫對正常人角質(zhì)形成細(xì)胞的氧化損傷研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第14次全國皮膚性病學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2008年

5 王菲菲;李紅文;吳景蘭;鄭乃剛;王一菱;;維生素C和維生素PP對原代培養(yǎng)人角質(zhì)形成細(xì)胞的效應(yīng)[A];中華醫(yī)學(xué)會第14次全國皮膚性病學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2008年

6 王麗華;彭代智;劉敬;周新;王勇;何升東;何斌;鄭必祥;董征學(xué);;不同質(zhì)粒導(dǎo)入人角質(zhì)形成細(xì)胞的實驗研究[A];中華醫(yī)學(xué)會燒傷外科學(xué)分會2009年學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2009年

7 王麗華;彭代智;劉敬;周新;王勇;何升東;何斌;鄭必祥;董征學(xué);;不同質(zhì)粒導(dǎo)入人角質(zhì)形成細(xì)胞的實驗研究[A];第八屆西南五省一市燒傷整形學(xué)術(shù)會議暨貴州省醫(yī)學(xué)會燒傷整形分會2010年學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2010年

8 王懿娜;方紅;吳煒;彭國平;;UVB誘導(dǎo)人角質(zhì)形成細(xì)胞衰老的作用與端粒酶表達(dá)無關(guān)[A];2009年浙江省皮膚病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2009年

9 王懿娜;方紅;吳煒;彭國平;;UVB誘導(dǎo)人角質(zhì)形成細(xì)胞衰老的作用與端粒酶表達(dá)無關(guān)[A];中華醫(yī)學(xué)會第十五次全國皮膚性病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2009年

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1 張中橋;人角質(zhì)形成細(xì)胞研究有進展[N];中國醫(yī)藥報;2005年

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1 馬翠玲;HPV16E6/E7對人角質(zhì)形成細(xì)胞的生物學(xué)特性及其生長調(diào)控因子的影響[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2000年

2 王平;中波紫外線輻射損傷人角質(zhì)形成細(xì)胞的分子機制研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2005年

3 王勇;CCL20基因修飾人角質(zhì)形成細(xì)胞的克隆篩選及相關(guān)干細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2009年

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1 陳志勇;633nm低能量紅光刺激活性氧增加對人角質(zhì)形成細(xì)胞增殖的影響研究[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2015年

2 段小冬;銀、銅離子對人角質(zhì)形成細(xì)胞增殖的影響及機制探索[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

3 孫百慧;晚期氧化蛋白產(chǎn)物誘導(dǎo)人角質(zhì)形成細(xì)胞凋亡機制的研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2016年

4 陶羽;人角質(zhì)形成細(xì)胞中TLR4對緊密連接蛋白的調(diào)控及Calycosin干預(yù)過敏性疾病機制探索[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2016年

5 王延婷;窄譜中波紫外線對人角質(zhì)形成細(xì)胞趨化因子CCL22表達(dá)的調(diào)控作用及其機制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2016年

6 陳瀟;5-氮雜胞苷對人角質(zhì)形成細(xì)胞增殖及誘導(dǎo)型一氧化氮合酶表達(dá)的影響[D];中南大學(xué);2008年

7 李薇;長波紫外線對人角質(zhì)形成細(xì)胞和成纖維細(xì)胞的形態(tài)、數(shù)目及誘導(dǎo)型一氧化氮合酶表達(dá)的影響[D];中南大學(xué);2007年

8 趙陽;重組人表皮生長因子對體外培養(yǎng)人角質(zhì)形成細(xì)胞增殖的影響[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2005年

9 趙丹;水楊酸對人角質(zhì)形成細(xì)胞絲聚蛋白和激肽釋放酶7表達(dá)的影響[D];大連醫(yī)科大學(xué);2012年

10 李坦君;輔酶Q10對UVB損傷人角質(zhì)形成細(xì)胞保護作用研究[D];暨南大學(xué);2005年

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本文編號：613407