論文一:羊痘1例 論文二:miR-181b-5p抑制物對人皮膚鱗癌SCC12細(xì)胞增殖、周期、凋亡、遷移和侵襲的影響
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更多相關(guān)文章: 羊痘 人類 臨床特點(diǎn) 預(yù)防 miR-181b-5p 皮膚鱗狀細(xì)胞癌 增殖 周期 凋亡
【摘要】:目的:討論羊痘的臨床特點(diǎn)及預(yù)防。方法:分析我院收治的1例羊痘的臨床特點(diǎn)、診療經(jīng)過并進(jìn)行文獻(xiàn)綜述。結(jié)果:患者發(fā)病前給病山羊喂藥1次,病羊口周有多處破潰。1周后患者右手拇指、手背及前臂出現(xiàn)結(jié)節(jié)伴瘙癢。皮損為暗紅色結(jié)節(jié),質(zhì)地堅硬,中央有臍凹、結(jié)痂,結(jié)痂周圍有灰白色暈。組織病理示:表皮棘層肥厚,呈指狀向下延伸,真皮可見大量增生和擴(kuò)張的毛細(xì)血管及彌漫性炎細(xì)胞浸潤,以淋巴細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、中性粒細(xì)胞為主。診斷:羊痘。結(jié)論:(1)在非牧區(qū)偶爾接觸病羊也有感染羊痘病毒的風(fēng)險,要引起重視。(2)直接與病羊及病羊污染的物質(zhì)接觸是發(fā)生人山羊痘病毒感染的主要原因,因此與病羊接觸時要做好個體防護(hù)。并且對羊痘病羊隔離并對其污染物進(jìn)行嚴(yán)格消毒處理。目的:通過脂質(zhì)體Lipofectamine 2000轉(zhuǎn)染mi R-181b-5p抑制物到皮膚鱗狀細(xì)胞癌SCC12細(xì)胞,探討mi R-181b-5p抑制物對皮膚鱗狀細(xì)胞癌SCC12細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期、凋亡、侵襲、遷移功能的影響。方法:1.應(yīng)用RT-PCR法(Real-time PCR,實時熒光定量PCR)檢測mi R-181b-5p在人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞Ha Ca T細(xì)胞與人皮膚鱗狀細(xì)胞癌SCC12細(xì)胞中的表達(dá)差異。2.通過脂質(zhì)體Lipofectamine 2000轉(zhuǎn)染GFP到SCC12,并先后用倒置熒光顯微鏡和流式細(xì)胞術(shù)測定轉(zhuǎn)染狀態(tài)和效率。3.將SCC12細(xì)胞隨機(jī)分為實驗組、陰性對照組和正常細(xì)胞對照組。實驗組轉(zhuǎn)染mi R-181b-5p抑制物(mi R-181b-5p inhibitors)抑制其細(xì)胞內(nèi)mi R-181b-5p的表達(dá),陰性對照組轉(zhuǎn)染抑制物陰性對照核苷酸序列(micro RNA inhibitors negative control),正常細(xì)胞對照組不做轉(zhuǎn)染。4.用RT-PCR法分別測轉(zhuǎn)染48小時后三組細(xì)胞內(nèi)mi R-181b-5p表達(dá)情況。5.采用CCK8法、細(xì)胞周期實驗檢測mi R-181b-5p inhibitors對SCC12細(xì)胞增殖的影響。6.采用流式細(xì)胞術(shù)檢測mi R-181b-5p inhibitors對SCC12細(xì)胞凋亡的影響。7.采用transwell檢測mi R-181b-5p inhibitors對SCC12細(xì)胞侵襲、遷移的影響。結(jié)果:1.Mi R-181b-5p在SCC12細(xì)胞中的表達(dá)明顯高于Ha Ca T細(xì)胞(P0.05),其表達(dá)量約為Ha Ca T細(xì)胞的1.82倍。2.轉(zhuǎn)染后細(xì)胞狀態(tài)良好,且轉(zhuǎn)染效率可達(dá)(95.6±0.4)%。3.實驗組SCC12細(xì)胞中mi R-181b-5p的表達(dá)水平明顯低于陰性對照組和正常細(xì)胞對照組(P0.05)。4.CCK8法檢測顯示,與陰性對照組和正常細(xì)胞對照組比較,實驗組細(xì)胞的增殖能力均顯著下降(P0.05),陰性對照組和正常細(xì)胞對照組之間的增殖能力無明顯差異(P0.05)。5.流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期,分析結(jié)果顯示,實驗組G1期細(xì)胞所占百分比明顯高于陰性對照組和正常細(xì)胞對照組(P0.05),而S期細(xì)胞所占百分比明顯低于陰性對照組組和正常細(xì)胞對照組(P0.05),而陰性對照組和正常細(xì)胞對照組之間的G1期和S期無明顯差異(P0.05)。即mi R-181b-5p inhibitors可將SCC12細(xì)胞阻滯于G1期。6.流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡率,分析結(jié)果顯示,實驗組與陰性對照組和正常細(xì)胞對照組相比,其凋亡率均顯著上升(P0.05),陰性對照組和正常細(xì)胞對照組相比凋亡率無明顯差異(P0.05)。7.Transwell小室遷移實驗結(jié)果顯示,與陰性對照組和正常細(xì)胞對照組相比,實驗組遷移到下室的細(xì)胞數(shù)目無明顯差異(P0.05),即mi R-181b-5p inhibitors對SCC12細(xì)胞遷移能力無影響。8.Transwell小室侵襲實驗結(jié)果顯示,實驗組侵襲到下室的細(xì)胞數(shù)目分別與陰性對照組和正常細(xì)胞對照組相比,細(xì)胞數(shù)目無明顯差異(P0.05),即mi R-181b-5p inhibitors對SCC12細(xì)胞侵襲能力無影響。結(jié)論:1.皮膚鱗狀細(xì)胞癌SCC12細(xì)胞中mi R-181b-5p較Ha Ca T細(xì)胞高表達(dá)。2.Mi R-181b-5p inhibitors可通過抑制皮膚鱗狀細(xì)胞癌SCC12細(xì)胞內(nèi)mi R-181b-5p的表達(dá),顯著抑制SCC12細(xì)胞增殖,并且可將細(xì)胞周期阻滯于G1期,促進(jìn)凋亡。Mi R-181b-5p可能成為人皮膚鱗狀細(xì)胞癌診斷和治療的新靶點(diǎn)。
【關(guān)鍵詞】:羊痘 人類 臨床特點(diǎn) 預(yù)防 miR-181b-5p 皮膚鱗狀細(xì)胞癌 增殖 周期 凋亡
【學(xué)位授予單位】:大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R752
【目錄】:
- 論文一 羊痘1例7-14
- 中文摘要7-8
- 英文摘要8-9
- 前言9
- 臨床資料9-11
- 討論11-12
- 結(jié)論12-13
- 參考文獻(xiàn)13-14
- 論文二 miR-181b-5p抑制物對人皮膚鱗癌SCC12細(xì)胞增殖、 周期、凋亡、遷移和侵襲的影響14-40
- 中文摘要14-16
- 英文摘要16-18
- 前言18-20
- 研究材料和方法20-30
- 實驗結(jié)果30-36
- 討論36-38
- 參考文獻(xiàn)38-40
- 綜述40-50
- 參考文獻(xiàn)45-50
- 致謝50-51
【相似文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條
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9 楊穎濤;劉林],
本文編號:587664
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