本文關鍵詞：氧化亞銅納米粒（CONPs）對人黑色素瘤干細胞的抑制和殺傷作用研究

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【摘要】：惡性黑色素瘤是一種非常嚴重的皮膚惡性腫瘤,由于它極易轉(zhuǎn)移到肺、腦等重要器官,因此患者死亡率極高。隨著我國社會經(jīng)濟的發(fā)展,惡性黑色素瘤已成為我國所有惡性腫瘤中發(fā)病率增長最快的腫瘤之一。由于傳統(tǒng)的手術(shù)切除、放化療等手段在改善預后、提高患者遠期生存率等方面效果不顯著,所以新型藥物和療法的建立就顯得尤為重要。納米醫(yī)學及其分支納米腫瘤學的發(fā)展給腫瘤治療及抗腫瘤藥物研發(fā)提供了可行的方法和思路。腫瘤干細胞學說認為,腫瘤的形成和發(fā)展與其中一小部分被稱為腫瘤干細胞的群體關系密切。這群細胞具有高度的增殖、自我更新能力和多向分化潛能,同時可逃逸免疫監(jiān)視。它們在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展中發(fā)揮著重要作用,與腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移、抗藥性的產(chǎn)生以及治療后的復發(fā)有密切的相關性,所以針對腫瘤干細胞的治療才是治療腫瘤和預防腫瘤復發(fā)的關鍵。傳統(tǒng)的化療藥物不具有腫瘤干細胞的靶向性,無法徹底清除病人體內(nèi)腫瘤干細胞,導致化療后腫瘤的復發(fā)和轉(zhuǎn)移。因此我們認為,能否有效殺傷腫瘤干細胞和能否有效降低腫瘤干細胞的干性特征應該成為一個評價藥物腫瘤治療有效性的重要指標。本課題組在之前的研究中對氧化亞銅納米粒(Cuprous Oxide Nanoparticles,CONPs)抑制小鼠黑色素瘤生長和轉(zhuǎn)移的能力進行了評價。研究結(jié)果顯示CONPs在體內(nèi)能夠顯著抑制小鼠黑色素瘤的生長,顯著延長荷瘤小鼠的生存期,提高荷瘤小鼠的生存率;更重要的是能抑制黑色素瘤細胞的轉(zhuǎn)移,減少肺內(nèi)轉(zhuǎn)移瘤的數(shù)量和單個瘤體的大小;同時還發(fā)現(xiàn)CONPs對小鼠具有很低的毒性。我們也對CONPs的腫瘤治療作用的相關機制進行了探討,結(jié)果證實了CONPs進入細胞后具有線粒體靶向性,通過啟動線粒體介導的細胞凋亡程序從而誘導腫瘤細胞凋亡,但是并未對CONPs能否根治人的黑色素瘤,即能否有效殺傷人黑色素瘤腫瘤干細胞的問題做出回答。令人高興的是,人黑色素瘤腫瘤干細胞鑒定標志物的明確,使這一問題的闡明成為可能。本課題作為CONPs潛在抗腫瘤藥物評價的一部分,我們著重于低劑量CONPs在抑制人的黑色素細胞增殖、殺傷黑色素瘤干細胞和降低細胞群體的干性等方面的作用作了系統(tǒng)地研究。我們首先利用人黑色素瘤干細胞標志物CD271分選了A375、WM266-4黑色素瘤細胞系中的CD271~(+/high)細胞,利用NOD/SCID的成瘤實驗證明CD271~(+/high)細胞具有較高的成瘤能力;然后確認了不同濃度CONPs抑制細胞增殖以及誘導CD271~(+/high)細胞和CD271~(-/low)細胞凋亡的作用,發(fā)現(xiàn)低劑量的CONPs雖然只能引起少量黑色素瘤細胞凋亡,但是卻可以明顯抑制黑色素瘤細胞的增殖速度,顯著降低細胞成球比例和在NOD/SCID小鼠的成瘤能力。低劑量處理后的黑色素瘤細胞中腫瘤干細胞干性關鍵性基因CD271、SOX10顯著下調(diào),與黑色素瘤增殖、轉(zhuǎn)移和耐藥相關的MITF基因表達水平顯著下調(diào)。最后,我們證實了黑色素瘤細胞可以通過網(wǎng)格蛋白介導的內(nèi)吞作用攝取CONPs,具有一定的特異性,而且CD271~(+/high)細胞同CD271~(-/low)細胞相比,可攝取和積累更多的CONPs,提示CONPs可能具有一定的黑色素瘤干細靶向性,具備通過抑制和殺傷黑色素瘤干細胞而抑制黑色素瘤生長、轉(zhuǎn)移和形成抗藥性的能力�？傊�,本研究證明低劑量的CONPs不但可以抑制人黑色素瘤細胞增殖,而且可以通過誘導黑色素腫瘤干細胞凋亡、降低腫瘤細胞的干性以及抑制耐藥性的形成來抑制黑色素瘤的生長。該研究為CONPs作為一種潛在的新型藥物的進一步開發(fā)提供了有價值的實驗和理論方面的支持。
【關鍵詞】：黑色素瘤 腫瘤干細胞 CONPs CD271
【學位授予單位】：第二軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R739.5
【目錄】：

• 摘要6-8
• Abstract8-10
• 縮略詞表10-11
• 前言11-15
• 實驗材料15-18
• 一、主要器材和設備15-16
• 二、主要試劑及其制備16-18
• 試驗方法18-25
• 一、氧化亞銅納米粒的合成18
• 二、細胞中微量元素銅（Cu）的測定18-19
• 三、細胞生物學實驗19-21
• 四、分子生物學實驗21-22
• 五、免疫組織化學22-23
• 六、動物實驗23-25
• 實驗結(jié)果25-45
• 一、A375和WM266-4 黑色素瘤細胞系含有較高比例的CD271~(+/high)細胞，具有較強的成瘤能力25-26
• 二、CONPs誘導人黑色素瘤細胞凋亡26-29
• 三、經(jīng)CONPs處理后的存活細胞的增殖和自我更新能力顯著下降， 而且作用效果呈現(xiàn)劑量依賴性29-30
• 四、低劑量CONPs處理對黑色素瘤細胞增殖和干性的影響30-37
• 五、CONPs殺傷黑色瘤干細胞的作用及相關機制37-41
• 六、CONPs可有效抑制NOD/SCID小鼠體內(nèi)黑色素瘤生長41-45
• 討論45-47
• 綜述 納米技術(shù)在癌癥治療中的應用47-56
• 參考文獻56-61
• 在讀期間論文發(fā)表情況61-62
• 致謝62

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1 紀小龍,徐薪,申明識;黏膜黑色素瘤的常見臨床病理特點[J];診斷病理學雜志;2002年02期

2 李凌,徐慶中;黑色素瘤高頻超聲表現(xiàn)1例[J];中華超聲影像學雜志;2002年09期

3 陳燁 ,劉敏賢 ,安秀珍 ,林昌萬 ,姜影;淚囊黑色素瘤1例報告[J];吉林醫(yī)學;2003年01期

4 蔡振鑫;黑色素瘤:預測致死性特征的30年臨床經(jīng)驗[J];國外醫(yī)學.外科學分冊;2004年02期

5 Helsing P.,Loeb M. ,馮義國;小直徑黑色素瘤:挪威黑色素瘤隨訪項目[J];世界核心醫(yī)學期刊文摘(皮膚病學分冊);2005年04期

6 Murray C.S.;Stockton D.L.;Doherty V.R. ;黨倩麗;;增厚的黑色素瘤:長久面對的挑戰(zhàn)[J];世界核心醫(yī)學期刊文摘(皮膚病學分冊);2005年08期

7 High W.A. ,Quirey R.A. ,Guillén D.R ,R.S. Taylor,劉超;7例甲單元原位黑色素瘤的臨床表現(xiàn)、組織病理和臨床預后[J];世界核心醫(yī)學期刊文摘(皮膚病學分冊);2005年02期

8 Curtin J.A.;Fridlyand J.;Kageshita T. ;B.C. Bastian;黨倩麗;;黑色素瘤不同位置的基因改變[J];世界核心醫(yī)學期刊文摘(皮膚病學分冊);2006年02期

9 Blaise S.;Rumeau-Trividic M.;Le Brun V.;周少娜;;黑色素瘤伴亞急性原發(fā)性纖維蛋白溶解[J];世界核心醫(yī)學期刊文摘(皮膚病學分冊);2006年04期

10 Weatherhead S.C.;Lawrence C.M. ;潘敏;;黑色素瘤篩查診所:檢出更多的黑色素瘤還是使患者消除顧慮?[J];世界核心醫(yī)學期刊文摘(皮膚病學分冊);2006年Z1期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李東;謝遵江;賀業(yè)春;劉穎;劉麗;;在黑色素瘤組織中免疫細胞的形態(tài)學觀察[A];中國解剖學會第八屆組織學與胚胎學專業(yè)青年研討會論文集[C];2004年

2 安菊生;吳令英;李寧;俞高志;劉麗影;;原發(fā)女性生殖道黑色素瘤42例臨床分析[A];中華醫(yī)學會第九次全國婦科腫瘤學術(shù)會議論文匯編[C];2006年

3 陳陸霞;孫保存;張詩武;賀忠江;;眼內(nèi)移植性黑色素瘤微循環(huán)模式的初步研究[A];中華醫(yī)學會第十二屆全國眼科學術(shù)大會論文匯編[C];2007年

4 楊志濤;陸洪光;;死亡受體和黑色素瘤的抗凋亡作用[A];中華醫(yī)學會第14次全國皮膚性病學術(shù)年會論文匯編[C];2008年

5 鐘傳華;楊文治;王曉蘭;;黑色素瘤與痔診治失誤的啟迪[A];2012醫(yī)學前沿——中華中醫(yī)藥學會肛腸分會第十四次全國肛腸學術(shù)交流大會論文精選[C];2012年

6 郭軍;;黑色素瘤最新進展和未來趨勢[A];中國腫瘤內(nèi)科進展 中國腫瘤醫(yī)師教育（2014）[C];2014年

7 孫保存;張詩武;劉志勇;張丹芳;郭華;;多西環(huán)素影響黑色素瘤微循環(huán)模式的形成[A];第四屆中國腫瘤學術(shù)大會暨第五屆海峽兩岸腫瘤學術(shù)會議論文集[C];2006年

8 郭偉;;口腔頜面-頭頸黏膜黑色素瘤的個體化診治與思考[A];中國腫瘤內(nèi)科進展 中國腫瘤醫(yī)師教育（2014）[C];2014年

9 孫保存;張丹芳;張詩武;郭華;張文治;趙秀蘭;;缺血缺氧對黑色素瘤局部浸潤的相關分子機制影響的初步研究[A];中華醫(yī)學會病理學分會2006年學術(shù)年會論文匯編[C];2006年

10 唐亮;;手術(shù)治療足跟底部皮膚黑色素瘤6例臨床分析[A];2013年全國激光醫(yī)學學術(shù)聯(lián)合會議暨2013年浙江省醫(yī)學會整形美容學術(shù)年會論文匯編[C];2013年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王倫邋王晨;早期發(fā)現(xiàn)黑色素瘤可挽救生命[N];科技日報;2007年

2 倪方;黑色素瘤早治療可痊愈（三）[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報;2008年

3 健康時報特約記者 管九蘋;澳大利亞免費普查黑色素瘤[N];健康時報;2010年

4 實習生 易立;黑色素瘤,是否無藥可治？[N];科技日報;2011年

5 記者 張e，

本文編號：565198