本文關(guān)鍵詞：NRIP1在銀屑病發(fā)病機(jī)制中的作用初步研究

  更多相關(guān)文章： 銀屑病 核受體相互作用蛋白1(NRIP1) 核因子κ B(NF-κ B) 動(dòng)物模型 CD4~+T細(xì)胞

【摘要】：背景：銀屑病是一種反復(fù)發(fā)作的慢性炎癥性疾病,困擾著世界上大約1-3%的人口。主要的病理表現(xiàn)為表皮角化過度及角化不全,棘層肥厚,炎性細(xì)胞浸潤(rùn),及毛細(xì)血管擴(kuò)張等。銀屑病的發(fā)病與角質(zhì)形成細(xì)胞和免疫反應(yīng)功能紊亂密切相關(guān),尤其是T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)異常在銀屑病發(fā)病中起到重要作用。而NF-κB作為細(xì)胞增殖、分化和凋亡以及炎癥反應(yīng)通路中的關(guān)鍵調(diào)節(jié)元件,已被證實(shí)在銀屑病的發(fā)病中起到重要作用。NRIP1 (Nuclear Receptor Interacting protein 1),又被稱作RIP 140 (Receptor Interacting Protein of 140 kDa),可與多種核受體相互作用,除了作為一種非典型的轉(zhuǎn)錄輔阻遏物,負(fù)性調(diào)節(jié)參與糖攝取、糖酵解、三羧酸循環(huán)、脂肪酸氧化、線粒體生成以及氧化磷酸化反應(yīng)的基因轉(zhuǎn)錄外,也可以激活轉(zhuǎn)錄,如可促進(jìn)NF-κB的激活并上調(diào)參與炎癥反應(yīng)的細(xì)胞因子的基因的表達(dá),包括TNFα和IL-6等。結(jié)合NRIP1對(duì)NF-κB信號(hào)通路的激活作用以及NF-κB信號(hào)通路在銀屑病發(fā)病機(jī)制中起到重要作用,我們推測(cè)NRIP1在銀屑病的發(fā)病機(jī)制中可能起到一定作用。目的：檢測(cè)銀屑病患者皮膚組織及外周血單核細(xì)胞中NRIP1的表達(dá)情況；研究NRIP1對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞和CD4+T細(xì)胞的活性、增殖和凋亡以及炎性信號(hào)通路的影響：通過構(gòu)建銀屑病樣皮損的小鼠模型,研究Nrip1基因敲除對(duì)銀屑病皮損的影響和機(jī)制。方法：1. 收集銀屑病患者及正常對(duì)照者的皮膚組織及外周血單核細(xì)胞,通過免疫組化及real-time PCR方法,從蛋白質(zhì)和mRNA水平檢測(cè)NRIP1和NF-KB在銀屑病患者的皮損及外周血中表達(dá),分析其相關(guān)性。2. 利用sh-NRIP1轉(zhuǎn)染沉默HaCaT細(xì)胞,分別用MTT法、Annexin V/PI staining法檢測(cè)細(xì)胞的活性、增殖和凋亡情況,用real-time PCR及western-blot法檢測(cè)NF-κB表達(dá)水平。3. 用不同劑量的UVB照射sh-NRIP1轉(zhuǎn)染后的HaCaT細(xì)胞,分別用MTT法和Annexin V/PI staining法檢測(cè)其增殖和凋亡水平的變化。4. 分離銀屑病患者外周血的CD4+T細(xì)胞,利用siRNA轉(zhuǎn)染沉默NRIP1的表達(dá)后,通過real-time PCR及ELISA法檢測(cè)CD4+T細(xì)胞中NF-kB表達(dá)水平及細(xì)胞培養(yǎng)上清液中IL-17的分泌水平。5. 用C57BL/6野生型(WT)和Nrip1基因敲除(KO)小鼠,連續(xù)外用5%咪喹莫特(IMQ)乳膏5天,誘導(dǎo)銀屑病樣皮損,依據(jù)PASI評(píng)分和組織學(xué)檢查評(píng)價(jià)皮損的嚴(yán)重程度；利用免疫熒光檢測(cè)皮損中Nrip1、 NF-k B表達(dá)。結(jié)果：1. 免疫組化及real-time PCR結(jié)果顯示NRIP1在銀屑病患者皮損中表達(dá)明顯高于非皮損及正常對(duì)照皮膚,而非皮損及正常皮膚間無顯著差異；2. Real-time PCR結(jié)果顯示NF- B (p65)在銀屑病患者皮損中表達(dá)明顯高于非皮損及正常對(duì)照皮膚,而非皮損及正常皮膚間無顯著差異,且NF-KB(p65)與NRIP1表達(dá)無明顯相關(guān)性：3. NRIP1在銀屑病患者外周血單核細(xì)胞中的mRNA表達(dá)水平明顯高于正常對(duì)照者；4. NF-κ B (p65)在銀屑病患者外周血單核細(xì)胞中的mRNA表達(dá)水平明顯高于正常對(duì)照者,且與NRIP1表達(dá)無明顯相關(guān)性；-5. 特異性shRNA轉(zhuǎn)染可有效沉默HaCaT細(xì)胞中NRIP1基因的表達(dá)；6. 沉默NRIP1基因可抑制HaCaT細(xì)胞的增殖,并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡：7. UVB照射可促進(jìn)沉默NRIP1基因?qū)aCaT細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)；8. 特異性siRNA轉(zhuǎn)染可有效沉默銀屑病患者外周血 CD4+T細(xì)胞NRIP1基因的表達(dá),并可降低NF-κB的表達(dá)水平和IL-17的分泌水平；9. 連續(xù)外用咪喹莫特乳膏可誘導(dǎo)WT和KO小鼠出現(xiàn)銀屑病樣皮損；10. Nripl基因敲除可延遲小鼠對(duì)咪喹莫特誘導(dǎo)的銀眉病樣皮損反應(yīng)：11. Nrip1基因敲除可降低小鼠銀屑病樣皮損中NF-k B的表達(dá)水甲。結(jié)論：在銀屑病忠者皮損及外閌血中,NRIPκ和NF-κB在mRNA和蛋白質(zhì)水平均高表達(dá)；沉默NRI1可抑制HaCaT細(xì)胞增殖,促進(jìn)細(xì)胞凋亡,降低NF-κB (p65)的表達(dá)水平,并可顯著抑制銀屑病患者外周血CD4+T細(xì)胞中NF-κB (p65)的表達(dá)和IL-17的分泌；在小鼠模型中,Nrip1基因敲除可通過抑制NF-κB表達(dá)從而延遲咪喹莫特誘導(dǎo)的銀屑病樣皮損炎癥反應(yīng)。綜上所述,NRIP1可影響角質(zhì)形成細(xì)胞的增殖和凋亡,并通過NF-κB通路影響CD4+T細(xì)胞的活化,從而影響銀屑病皮損的形成,在銀屑病的發(fā)病機(jī)制中起重要作用。
【關(guān)鍵詞】：銀屑病 核受體相互作用蛋白1(NRIP1) 核因子κ B(NF-κ B) 動(dòng)物模型 CD4~+T細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R758.63
【目錄】：

• 英文縮略詞表5-6
• 中文摘要6-9
• ABSTRACT9-12
• 前言12-19
• 參考文獻(xiàn)16-19
• 第一部分 NRIP1在銀屑病患者皮損及外周血中的表達(dá)情況研究19-31
• 引言19-20
• 材料與方法20-25
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果25-28
• 討論28-29
• 參考文獻(xiàn)29-31
• 第二部分 沉默NRIP1基因?qū)ACAT細(xì)胞及銀屑病患者外周血CD4~+T細(xì)胞的影響31-50
• 引言31-32
• 材料與方法32-40
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果40-46
• 討論46-48
• 參考文獻(xiàn)48-50
• 第三部分 NRIP1基因敲除對(duì)咪喹莫特誘導(dǎo)小鼠銀屑病樣皮損的影響50-61
• 引言50-51
• 材料與方法51-54
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果54-58
• 討論58-59
• 參考文獻(xiàn)59-61
• 全文小結(jié)61-62
• 綜述一銀屑病的表觀遺傳研究進(jìn)展62-67
• 參考文獻(xiàn)65-67
• 所獲榮譽(yù)及發(fā)表文章67-69
• 致謝69-71

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 吳京海,金嵐,吳惠t ,秦立模,朱麗芬,吳文媛,秦萬章;可溶性細(xì)胞粘附分子表達(dá)與銀屑病疾病活動(dòng)的相關(guān)性[J];中國皮膚性病學(xué)雜志;2000年04期

2 張曉紅,瞿幸,周志強(qiáng),牛福林,張建中;消銀解毒飲對(duì)銀屑病患者鱗屑白介素8的影響[J];中華皮膚科雜志;2000年02期

3 劉濤峰,張學(xué)軍,楊森,王福喜,魏生才,陳珊宇;銀屑病誘發(fā)因素的病例對(duì)照研究[J];中華皮膚科雜志;2000年05期

4 張力軍,楊雪琴,樊建勇,劉秀清;銀屑病患者血漿血管緊張素Ⅱ水平檢測(cè)[J];中華皮膚科雜志;2000年06期

5 馮素英,靳培英;飲酒和銀屑病[J];國外醫(yī)學(xué).皮膚性病學(xué)分冊(cè);2000年04期

6 孫軍紅,方躍明,鄭茂榮;銀屑病與中性粒細(xì)胞趨化因子[J];國外醫(yī)學(xué).皮膚性病學(xué)分冊(cè);2000年05期

7 李占國,秦社玲,張素紅,張長(zhǎng)軍;整體綜合思維在銀屑病診治中的應(yīng)用[J];皮膚病與性病;2000年02期

8 曹序浦;老藥新用治療銀屑病[J];天津藥學(xué);2000年03期

9 陳英,智強(qiáng),朱年春;重組人白細(xì)胞介素-10對(duì)銀屑病患者外周血單個(gè)核細(xì)胞的作用[J];中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué);2000年04期

10 霍秀琪;銀屑病治療的進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)文選;2000年05期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 范斌;李斌;;銀屑病與肥胖新進(jìn)展[A];2009全國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

2 范平;張禁;黎超;;127例長(zhǎng)期緩解的銀屑病共同點(diǎn)調(diào)查分析[A];2009全國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

3 鄭厚峰;;根據(jù)三個(gè)基因分類的銀屑病臨床特征比較[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十五次全國皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2009年

4 涂彩霞;齊曉怡;;銀屑病治療的整體觀——生活方式和飲食[A];2010全國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

5 楊雪琴;;對(duì)銀屑病30年的研究和認(rèn)識(shí)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第16次全國皮膚性病學(xué)術(shù)年會(huì)摘要集[C];2010年

6 付翔宇;陳宏;;銀屑病的危險(xiǎn)因素(摘要)[A];第五屆全國中西醫(yī)結(jié)合變態(tài)反應(yīng)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2011年

7 王剛;;特殊類型銀屑病的治療[A];2011全國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

8 沙海松;;陳凱教授對(duì)銀屑病的中西醫(yī)治療經(jīng)驗(yàn)[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)會(huì)議、國家中醫(yī)藥管理局繼續(xù)教育項(xiàng)目——銀屑病中醫(yī)藥防治交流會(huì)暨趙炳南學(xué)術(shù)思想高級(jí)研修班論文集[C];2011年

9 樊建勇;楊雪琴;張力軍;劉秀清;;銀屑病患者血中糖皮質(zhì)激素及其受體mRNA的測(cè)定及其意義[A];2001年中國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2001年

10 潘德海;張曉艷;鄭占財(cái);劉永生;;染發(fā)劑過敏誘發(fā)銀屑病8例[A];第一屆全國變態(tài)反應(yīng)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2001年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 蒲成學(xué);煙酒與銀屑病[N];中藥報(bào);2000年

2 牧童;銀屑病怎樣防[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2007年

3 記者嚴(yán)少衛(wèi);銀屑病診治應(yīng)重視心理疏導(dǎo)[N];健康報(bào);2009年

4 本報(bào)記者 海霞　吳大衛(wèi) 夏廈;關(guān)愛銀屑病患者[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2009年

5 郭艷麗;引起銀屑病的4大因素[N];農(nóng)村醫(yī)藥報(bào)（漢）;2009年

6 本報(bào)記者 徐亞靜;銀屑病寧可不治莫亂治[N];中國醫(yī)藥報(bào);2009年

7 山西省晉中市第三人民醫(yī)院 張英棟;治銀屑病當(dāng)重療心[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2010年

8 記者 顧泳;上海銀屑病發(fā)病率約0.2%[N];解放日?qǐng)?bào);2010年

9 山西中醫(yī)學(xué)院中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院 張英棟;從系統(tǒng)理論解讀汗對(duì)銀屑病防治的重要性[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2012年

10 記者 田雅婷;我國銀屑病患者僅15%接受正規(guī)治療[N];光明日?qǐng)?bào);2012年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 楊海平;銀屑病激發(fā)因素的調(diào)查與防治對(duì)策的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);1999年

2 李龍年;漢族人群與歐美人群銀屑病易感基因的遺傳異質(zhì)性研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

3 金海蓉;白藜蘆醇脂質(zhì)體凝膠對(duì)小鼠銀屑病模型的治療及經(jīng)皮給藥藥代動(dòng)力學(xué)研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2015年

4 吳文中;Th17細(xì)胞在銀屑病發(fā)病機(jī)制中的作用及復(fù)方甘草酸苷對(duì)HaCaT細(xì)胞增殖和相關(guān)因子表達(dá)的研究[D];山東大學(xué);2015年

5 陳曦;JAK/STAT信號(hào)通路與銀屑病辨證分型的關(guān)聯(lián)機(jī)制研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2016年

6 姚鳳鳴;插入/缺失變異與漢族人群銀屑病關(guān)聯(lián)研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

7 欒超;NRIP1在銀屑病發(fā)病機(jī)制中的作用初步研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2016年

8 丁旭;許銑教授學(xué)術(shù)思想及從肝肺論治銀屑病傳承研究[D];中國中醫(yī)科學(xué)院;2016年

9 張心瑜;皮膚鏡在尋常型銀屑病皮損嚴(yán)重程度評(píng)估研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2016年

10 張明;劉巧教授辯治皮膚病學(xué)術(shù)思想及治療銀屑病臨床觀察[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2015年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李懷軍;銀屑病臨床相關(guān)因素的回顧性分析[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2009年

2 羅慶;銀屑病社會(huì)心理因素調(diào)查研究[D];湖北中醫(yī)學(xué)院;2009年

3 吉莉;銀屑病患者的疾病感知和應(yīng)激、應(yīng)對(duì)[D];華東師范大學(xué);2009年

4 任為;IL23R基因多態(tài)性與漢族人銀屑病易感性關(guān)聯(lián)分析研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2009年

5 田雅;527例銀屑病住院患者臨床分析[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2009年

6 趙艷霞;銀屑病的發(fā)病與治療的回顧性分析[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2003年

7 劉愛花;銀屑病危險(xiǎn)因素研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2007年

8 梁興龍;62例銀屑病住院患者回顧性臨床分析[D];汕頭大學(xué);2011年

9 李俊麗;銀屑病治療現(xiàn)狀及進(jìn)展[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2013年

10 呂艷;阿維A對(duì)銀屑病患者血脂影響的回顧性分析[D];鄭州大學(xué);2015年

，

本文編號(hào)：542520