本文關(guān)鍵詞：氨甲環(huán)酸對人培養(yǎng)黑素細(xì)胞生物學(xué)影響和相關(guān)分子機(jī)制的研究

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【摘要】：目的：探討氨甲環(huán)酸對體外培養(yǎng)人黑素細(xì)胞增殖及黑素合成和酪氨酸酶代謝的影響,并進(jìn)一步從基因水平研究氨甲環(huán)酸作用于黑素細(xì)胞的分子機(jī)制,觀察氨甲環(huán)酸對黑素細(xì)胞酪氨酸酶,酪氨酸酶相關(guān)蛋白-1、小眼畸形轉(zhuǎn)錄因子MITF的mRNA表達(dá)的影響,探討氨甲環(huán)酸藥物治療黃褐斑的作用機(jī)理。方法：取正常人包皮組織,于體外培養(yǎng)純的黑素細(xì)胞,選擇對數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),設(shè)紫外線照射和非照射組,在黑素細(xì)胞培養(yǎng)液中加入不同濃度的氨甲環(huán)酸,并以空白做為對照,繼續(xù)培養(yǎng)24-72小時(shí)后,用cck-8法觀察氨甲環(huán)酸對黑素細(xì)胞增殖的影響；采用多巴氧化方法測定黑素細(xì)胞酪氨酸酶活性,用NaOH法測定黑素細(xì)胞黑素的含量,并用RT-PCR的方法檢測酪氨酸酶,酪氨酸酶相關(guān)蛋白-1、小眼畸形轉(zhuǎn)錄因子MITF的mRNA表達(dá)。結(jié)果：氨甲環(huán)酸對紫外線照射和非照射組的黑素細(xì)胞的增殖均無明顯抑制作用；500mg/ml和1000mg/ml濃度的氨甲環(huán)酸對紫外線照射和非照射的黑素細(xì)胞的酪氨酸酶活性有明顯抑制作用,而1000mg/ml濃度的氨甲環(huán)酸對黑素含量的抑制作用與空白對照組比較,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),氨甲環(huán)酸的濃度對體外培養(yǎng)的黑素細(xì)胞的增殖無相關(guān)性(P0.05)、而與黑素合成和酪氨酸酶的抑制效應(yīng)有相關(guān)性(P0.05)：與空白組比較,500mg/ml和1000mg/ml濃度的氨甲環(huán)酸使酪氨酸酶相關(guān)蛋白-1、酪氨酸酶的mRNA的表達(dá)均減少,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);而1000mg/ml濃度氨甲環(huán)酸使MITF的mRNA的表達(dá)減少,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)、氨甲環(huán)酸的濃度與作用之間有相關(guān)(P0.05)。結(jié)論：氨甲環(huán)酸對于體外培養(yǎng)人黑素細(xì)胞具有直接作用,可以抑制酪氨酸酶活性及黑素合成,且與藥物濃度呈劑量依賴,但對黑素細(xì)胞的增殖無明顯作用;在基因水平可以降低黑素細(xì)胞酪氨酸酶、酪氨酸酶相關(guān)蛋白-1及轉(zhuǎn)錄因子MITF的mRNA表達(dá),并與其藥物濃度有劑量相關(guān)：氨甲環(huán)酸通過下調(diào)MITF的表達(dá),抑制酪氨酸酶的合成,從而減少黑素合成量,減淡色斑。
【關(guān)鍵詞】：氨甲環(huán)酸 黑素細(xì)胞 酪氨酸酶 mRNA
【學(xué)位授予單位】：新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R751
【目錄】：

• 中英文縮略詞對照表5-9
• 摘要9-10
• Abstract10-12
• 前言12-17
• 第一部分 氨甲環(huán)酸對黑素細(xì)胞增殖及黑素合成代謝的影響17-44
• 1 研究內(nèi)容與方法17-21
• 1.1 研究對象18-19
• 1.1.1 主要材料與試劑18-19
• 1.1.2 主要儀器和器皿19
• 1.2 研究內(nèi)容與方法19-20
• 1.2.1 研究內(nèi)容19
• 1.2.2 研究方法19-20
• 1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法20-21
• 2 結(jié)果21-26
• 3 討論26-42
• 4 小結(jié)42-44
• 第二部分 氨甲環(huán)酸對黑素細(xì)胞酪氨酸酶及相關(guān)蛋白和轉(zhuǎn)錄因子的mRNA表達(dá)的影響44-64
• 1 研究內(nèi)容和方法45-48
• 1.1 研究對象45-46
• 1.1.1 主要材料與試劑45
• 1.1.2 主要儀器和器皿45-46
• 1.2 研究內(nèi)容與方法46-48
• 1.2.1 研究內(nèi)容46
• 1.2.2 研究方法46-48
• 1.3 統(tǒng)計(jì)方法48
• 2 結(jié)果48-49
• 3 討論49-62
• 4 小結(jié)62-64
• 結(jié)論64-65
• 致謝65-66
• 參考文獻(xiàn)66-79
• 綜述79-89
• 參考文獻(xiàn)84-89
• 攻讀博士學(xué)位期間獲得的學(xué)術(shù)成果89-90
• 個(gè)人簡歷90-91
• 導(dǎo)師評閱表91

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：525357