發(fā)布時(shí)間：2017-06-30 00:14

  本文關(guān)鍵詞：Hog1p基因?qū)π律[球菌不同變種毒力影響的初步研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：新生隱球菌是一種在全球范圍分布的致病真菌病原體。大部分病例報(bào)道感染菌株主要以新生隱球菌新生變種為主,新生隱球菌格特變種(又叫格特隱球菌)次之,但近年來格特隱球菌致病報(bào)道有逐漸增多的趨勢(shì)。作為一種重要的病原真菌,新生隱球菌多感染免疫功能低下的患者。在我國,隱球菌病還是以非AIDS人群為主,但伴發(fā)于AIDS的病例報(bào)道也在逐年增多。 目前研究比較多的新生隱球菌的致病因子包括37℃生長、黑素、莢膜、胞外蛋白酶等,然而我們對(duì)新生隱球菌的具體致病機(jī)制的了解仍然有限。新生隱球菌要侵入宿主并在宿主中生存和繁殖必須要適應(yīng)宿主環(huán)境的高滲壓力。在所有致病真菌中,MAPK通路的致病機(jī)制已經(jīng)在白念珠菌中得到最詳細(xì)的描述,可能是由于其介導(dǎo)白念珠菌感染中關(guān)鍵的形態(tài)學(xué)變化：酵母相向菌絲相的轉(zhuǎn)換。近來,越來越多的證據(jù)表明,新生隱球菌的MAPK通路與釀酒酵母菌和白念珠菌的MAPK通路相似,但同時(shí)具備自身的特點(diǎn)。因此我們推測(cè)MAPK通路中的hogl蛋白也可能在新生隱球菌的感染致病中扮演了重要角色。目前幾乎所用HOG-MAPK通路的研究都集中于新生隱球菌血清A型菌株,而本實(shí)驗(yàn)我們將主要通過對(duì)hoglp的敲除與回復(fù),探索其在格特隱球菌中毒力調(diào)控中的作用,并嘗試找出該基因在新生隱球菌血清A型和B型菌株毒力調(diào)控中的差異。 實(shí)驗(yàn)中,我們分別敲除新生隱球菌比利時(shí)標(biāo)準(zhǔn)株(BLS71,血清A型)和臨床分離株(CZ2012,血清B型)的hoglp基因構(gòu)建缺陷株,再將hoglp基因重新整合到缺陷株中獲得重建株。然后比較原始株、缺陷株和重建株三種不同菌株對(duì)體外毒力因子如壓力應(yīng)激敏感性、莢膜和黑素生成、尿素酶活性及抗真菌藥物敏感性的差異；選用健康C57BL/6雌性小鼠,在正常免疫情況下和腹腔注射環(huán)磷酰胺進(jìn)行免疫抑制情況下,通過尾靜脈注射菌懸液的方法分別建立新生隱球菌系統(tǒng)感染模型。分別在感染后24h和72h后,取出組織,勻漿,分離菌株進(jìn)行培養(yǎng),觀察各組小鼠主要臟器在感染早期的感染情況,記錄小鼠生存時(shí)間,進(jìn)行生存分析,從而比較免疫狀態(tài)和菌株hoglp基因?qū)Ω腥拘∈笊鏁r(shí)間的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)hoglp缺陷株莢膜和黑素生成減少,對(duì)兩性霉素B和唑類藥物敏感性明顯增高,早期小鼠主要臟器均有隱球菌感染,hoglp缺陷株感染小鼠和免疫正常小鼠生存時(shí)間明顯延長,說明敲除hoglp基因后的缺陷株的毒力減弱,小鼠被免疫抑制后更容易受新生隱球菌感染,但對(duì)壓力應(yīng)激敏感性未發(fā)現(xiàn)顯著差異。因此,我們推斷hoglp對(duì)新生隱球菌的毒力的影響至關(guān)重要,HOG-MAPK通路可以作為抗真菌藥的潛在作用靶點(diǎn)。
【關(guān)鍵詞】：新生隱球菌 Hog1p基因 毒力 MAPK
【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R756
【目錄】：

• 中文摘要5-6
• 英文摘要6-8
• 中英文縮略詞對(duì)照表8-9
• 第一部分、新生隱球菌hog1p基因的克隆、敲除、重建及表達(dá)載體的構(gòu)建9-20
• 前言9-10
• 一、材料和方法10-13
• 二、結(jié)果13-16
• 四、討論16-18
• 參考文獻(xiàn)18-20
• 第二部分、Hog1p基因?qū)π律[球菌毒力的影響-毒力因子和動(dòng)物模型研究20-48
• 前言20-21
• 一、材料和方法21-22
• 二、實(shí)驗(yàn)方法22-27
• 三、結(jié)果27-42
• 四、討論42-45
• 參考文獻(xiàn)45-48
• 全文總結(jié)48-49
• 綜述49-57
• 參考文獻(xiàn)54-57
• 碩士在讀期間發(fā)表文章和科研工作情況57-58
• 致謝58

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 饒玉春;丁正中;陳析豐;曾大力;馬伯軍;顧志敏;;稻曲病菌UvHog1基因的克隆及表達(dá)分析[J];中國水稻科學(xué);2014年01期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 王莎;構(gòu)巢曲霉高親和性鈣離子吸收系統(tǒng)參與生長發(fā)育調(diào)控的機(jī)制研究[D];南京師范大學(xué);2013年

2 李平;甘露糖受體MR參與隱球菌免疫逃逸及S100A10促進(jìn)隱球菌穿過血腦屏障的機(jī)制研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2013年

3 周潔;新生隱球菌對(duì)小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞氧化磷酸化作用及凋亡的影響[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2013年

4 侯彬彬;組氨酸激酶DRK1在申克孢子絲菌雙相轉(zhuǎn)換及致病性形成中的作用及黃芪抗小鼠孢子絲菌感染機(jī)制的初探[D];大連醫(yī)科大學(xué);2013年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 丁文婷;β-arrestin2及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在隱腦患者發(fā)病機(jī)制中的探討[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

2 王云燦;Th1-Th2免疫應(yīng)答系統(tǒng)在隱球菌性腦膜炎患者腦脊液中的表達(dá)[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

3 黃英子;冰酒發(fā)酵過程中酵母菌的多樣性及動(dòng)態(tài)變化研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2013年

4 賀婷;新型隱球菌感染臨床分布及其特征分析[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2013年

5 魏旺麗;DJ-1基因在肺癌中的作用及其相互作用蛋白質(zhì)分析[D];中南大學(xué);2013年

6 褚小靜;黃瓜枯萎病菌磷脂酶C4基因的克隆與功能分析[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

  本文關(guān)鍵詞：Hog1p基因?qū)π律[球菌不同變種毒力影響的初步研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：499883