ID-1、Survivin和Caspase-3在ALA-光動力誘導(dǎo)皮膚鱗狀細(xì)胞癌A431細(xì)胞增殖、凋亡中的作用
本文關(guān)鍵詞:ID-1、Survivin和Caspase-3在ALA-光動力誘導(dǎo)皮膚鱗狀細(xì)胞癌A431細(xì)胞增殖、凋亡中的作用,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:皮膚鱗狀細(xì)胞癌(squamous cell carcinoma, SCC),是起源于表皮附屬器角質(zhì)形成細(xì)胞的一種惡性腫瘤,具有病因復(fù)雜、臨床誤診率高、惡性度大及侵襲性和破壞性強(qiáng)等特點(diǎn)。目前皮膚鱗癌的治療方法有手術(shù)切除、放射治療、外用藥物治療及光動力治療等。光動力療法(Photodynamic therapy, PDT)又被稱為光輻射療法(Photoratiation Therapy, PRT)或光化學(xué)療法(Photochemotherapy),是一種正在研究發(fā)展中的,治療某些體表良、惡性病變的有效方法,部分成果已經(jīng)應(yīng)用于臨床。近年來,5-ALA (5-aminolevulinic acid,5-氨基酮戊酸)介導(dǎo)的光動力療法(5-ALA-PDT)成功應(yīng)用于非黑素性皮膚癌的治療,但其作用機(jī)制還有待于研究闡明。 目的: 1.檢測ID-1、Survivin和Caspase-3蛋白和mRNA在人皮膚鱗狀細(xì)胞癌A431細(xì)胞中的表達(dá),探討其臨床意義; 2.觀察5-ALA-PDT對人皮膚鱗狀細(xì)胞癌A431細(xì)胞的殺傷滅活作用; 3.觀察5-ALA-PDT后人皮膚鱗狀細(xì)胞癌A431細(xì)胞中ID-1、Survivin和Caspase-3蛋白表達(dá)水平的變化,探討5-ALA-PDT誘導(dǎo)人皮膚鱗狀細(xì)胞癌A431細(xì)胞增殖、凋亡的可能機(jī)制,為光動力治療皮膚鱗狀細(xì)胞癌提供理論依據(jù)。 方法: 1、采用Western Blot法和RT-PCR法檢測ID-1、Survivin和Caspase-3在人皮膚鱗狀細(xì)胞癌A431細(xì)胞和角質(zhì)形成細(xì)胞(Hacat細(xì)胞)中的表達(dá)水平; 2、A431細(xì)胞與5-ALA共同培育,經(jīng)630nm激光照射后,采用MTT法測其細(xì)胞抑制率,探討培育時(shí)間、5-ALA濃度及光照劑量對其介導(dǎo)的光動力效應(yīng)的影響; 3、A431細(xì)胞經(jīng)5-ALA-PDT處理后,分別于0h、2h、6h、12h、24h、48h后提取蛋白,采用Western Blot法檢測ID-1、Survivin和Caspase-3蛋白的變化。 結(jié)果: 1、ID-1和Survivin蛋白和mRNA在人皮膚鱗狀細(xì)胞癌A431細(xì)胞中高表達(dá),而在Hacat細(xì)胞中低表達(dá)或不表達(dá),其表達(dá)強(qiáng)弱差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);而Caspase-3蛋白和mRNA的表達(dá)與之相反,其表達(dá)差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05); 2、光照劑量和5-ALA濃度相同時(shí),5-ALA與A431細(xì)胞共同培養(yǎng)120min時(shí),其介導(dǎo)PDT的殺傷作用最強(qiáng); 3、光照劑量和培養(yǎng)時(shí)間相同時(shí),5-ALA濃度為3.2mmol/L時(shí),其介導(dǎo)PDT的殺傷作用達(dá)到了飽和; 4、培養(yǎng)時(shí)間和5-ALA濃度相同時(shí),光照劑量為80J/cm2時(shí),其對A431細(xì)胞的抑制率達(dá)到最大; 5、單獨(dú)照光及單獨(dú)加藥對A431細(xì)胞并無殺傷或促進(jìn)其生長的作用; 6、ID-1和Survivin在5-ALA-PDT處理后的A431細(xì)胞中蛋白表達(dá)水平隨時(shí)間延長呈下降趨勢,其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05); 7、Caspase-3在5-ALA-PDT處理后的A431細(xì)胞中蛋白表達(dá)水平隨時(shí)間延長呈上升趨勢,其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論: 1、高表達(dá)的ID-1和Survivin,低表達(dá)的Caspase-3可能參與皮膚鱗癌的形成; 2、5-ALA-PDT對人皮膚鱗狀細(xì)胞癌A431細(xì)胞有明顯的殺傷效應(yīng); 3、5-ALA-PDT誘導(dǎo)人皮膚鱗狀細(xì)胞癌A431細(xì)胞增殖或凋亡的機(jī)制,可能與 5-ALA-PDT直接或間接抑制ID-1和Survivin的表達(dá)、促進(jìn)Caspase-3的表達(dá)有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】:光動力療法 人皮膚鱗癌A431細(xì)胞 ID-1 Survivin Caspase-3
【學(xué)位授予單位】:山東大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:R739.5
【目錄】:
- 中文摘要6-8
- 英文摘要8-10
- 符號說明10-12
- 前言12-15
- 實(shí)驗(yàn)材料與方法15-25
- 結(jié)果25-27
- 討論27-37
- 結(jié)論37-38
- 附圖38-44
- 參考文獻(xiàn)44-51
- 綜述51-57
- 參考文獻(xiàn)55-57
- 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文57-58
- 附錄58-60
- 致謝60-61
- 學(xué)位論文評閱及答辯情況表61
【參考文獻(xiàn)】
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本文關(guān)鍵詞:ID-1、Survivin和Caspase-3在ALA-光動力誘導(dǎo)皮膚鱗狀細(xì)胞癌A431細(xì)胞增殖、凋亡中的作用,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號:430552
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