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人表皮黑素細(xì)胞—角質(zhì)形成細(xì)胞共培養(yǎng)及11種化合物對(duì)黑素沉著的影響研究

發(fā)布時(shí)間:2024-10-04 19:50
  目的建立人表皮黑素細(xì)胞與角質(zhì)形成細(xì)胞共培養(yǎng)的體外模型,利用一些已知化合物對(duì)B16F10細(xì)胞、黑素細(xì)胞及黑素細(xì)胞與角質(zhì)形成細(xì)胞共培養(yǎng)模型進(jìn)行比較性研究,在B16F10細(xì)胞、黑素細(xì)胞及黑素細(xì)胞與角質(zhì)形成細(xì)胞共培養(yǎng)模型中對(duì)一些中藥單體進(jìn)行有關(guān)黑素合成以及黑素轉(zhuǎn)運(yùn)方面的篩選,對(duì)篩選出的優(yōu)勢(shì)中藥單體進(jìn)行進(jìn)一步機(jī)制研究及臨床效果初探。 方法分別培養(yǎng)鼠黑素瘤細(xì)胞系B16F10、人表皮永生化細(xì)胞系HaCat、人表皮黑素細(xì)胞以及人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞;建立人表皮黑素細(xì)胞-角質(zhì)形成細(xì)胞共培養(yǎng)的體外模型,分別利用倒置顯微鏡、共聚焦顯微鏡以及電鏡觀察共培養(yǎng)模型以及黑素小體的轉(zhuǎn)運(yùn)。利用鼠黑素瘤細(xì)胞系B16F10、人表皮黑素細(xì)胞以及共培養(yǎng)模型對(duì)一些化學(xué)合成藥物(氫醌、熊果甙、8-MOP、RA、NO、維胺酯以及煙酰胺)及一些中藥單體(丹皮酚、苦參堿、氧化苦參堿、大黃素)進(jìn)行黑素合成過程(黑素生成及酪氨酸酶活性)影響的研究。同時(shí)利用流式細(xì)胞儀在共培養(yǎng)體系中觀察這些藥物對(duì)黑素轉(zhuǎn)運(yùn)過程的影響。利用RT—PCR以及Western—Blot技術(shù)檢測(cè)丹皮酚對(duì)于黑素細(xì)胞酪氨酸酶mRNA及蛋白表達(dá)的變化,同時(shí)探討了其對(duì)共培養(yǎng)細(xì)胞P...

【文章頁(yè)數(shù)】:168 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【文章目錄】:
縮略語(yǔ)
摘要
ABSTRACT
1. 引言
實(shí)驗(yàn)流程圖
2. 實(shí)驗(yàn)材料
    2.1 組織材料
    2.2 藥物及化合物
    2.3 儀器及器皿
    2.4 生物化學(xué)試劑
    2.5 其它化學(xué)試劑
第一部分 人表皮黑素細(xì)胞與角質(zhì)形成細(xì)胞共培養(yǎng)模型的建立
    1.1 材料和方法
    1.2 結(jié)果
    1.3 討論
第二部分 B16F10細(xì)胞、黑素細(xì)胞及共培養(yǎng)體系的比較研究
    2.1 材料及方法
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 氫醌
        2.2.2 熊果甙
        2.2.3 8-MOP
        2.2.4 SNP
        2.2.5 全反式維甲酸
        2.2.6 維胺酯
        2.2.7 煙酰胺
    2.3 討論
第三部分 中藥單體篩選
    3.1 材料及方法
    3.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.2.1 丹皮酚
        3.2.2 大黃素
        3.2.3 氧化苦參堿
        3.2.4 苦參堿
    3.3 討論
第四部分 丹皮酚抑制黑素合成及轉(zhuǎn)運(yùn)的機(jī)制研究
    4.1實(shí)驗(yàn)方法
    4.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.3 討論
第五部分 丹皮酚霜臨床初探
    5.1 試驗(yàn)方法
    5.2 試驗(yàn)結(jié)果
    5.3 討論
全文小結(jié)
文獻(xiàn)綜述
    一、銀屑病的生物治療進(jìn)展
    二、黑素轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制研究進(jìn)展
    三、遺傳性色素性皮膚病研究進(jìn)展
附件
致謝



本文編號(hào):4007075

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