天皰瘡(pemphigus)是自身抗體介導(dǎo)作用于表皮角質(zhì)形成細(xì)胞橋粒芯糖蛋白的自身免疫性大皰性皮膚和粘膜疾病，尋常型天皰瘡(pemphigus vulgaris，PV)是其中最為常見(jiàn)的亞型。盡管已經(jīng)公認(rèn)橋粒芯糖蛋白-1(desmoglein 1，Dsg1)和橋粒芯糖蛋白-3(desmoglein 3，Dsg3)及其自身抗體與天皰瘡發(fā)病相關(guān)，但其確切的發(fā)病機(jī)制仍不清楚。新近有研究發(fā)現(xiàn)了人體組織橋粒芯糖蛋白-4(desmoglein4，Dsg4)是PV自身抗體的靶抗原，為該病的研究提供了新的線索。 本項(xiàng)研究目的是擴(kuò)增人皮膚組織Dsg4胞外域(extracellular domains，ECD)EC1、EC2、EC3和EC4的核酸序列，進(jìn)一步探討其在PV發(fā)病中的作用。 首先根據(jù)Genebank中人Dsg4的cDNA序列資料，設(shè)計(jì)Dsg4胞外域EC1、EC2、EC3和EC4 4個(gè)DNA片段的特異性引物，通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(reverse-transcription polymerase chain reaction，RT-PCR)法，以提取的人正常皮膚組織總RNA為模板，擴(kuò)...

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖1質(zhì)粒pET32a的物理圖譜

人皮膚組織來(lái)源于四川大學(xué)華西醫(yī)院皮膚性病科門(mén)診色素痣切除術(shù)所帶病變周圍正�；铙w組織，供者為男性，23歲。原核表達(dá)質(zhì)粒pET32a(質(zhì)粒物理圖譜見(jiàn)附圖1)、宿主菌(大腸桿菌DH5a)和表達(dá)宿主菌(大腸桿菌BLZ)I菌株由四川大學(xué)華西基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與法醫(yī)學(xué)院感染免疫研究室提供。2、主要試劑....

圖2人皮膚組織總RNA電泳圖譜

1、表皮組織RNA瓊脂糖凝膠電泳分析表皮組織總RNA提取產(chǎn)物經(jīng)1.5%瓊脂糖凝膠電泳分析，55、185、285條帶清晰(圖2)，說(shuō)明RNA無(wú)降解。123生2851855S圖2人皮膚組織總RNA電泳圖譜Fig.2EleetroPhorogramoftotalRNArfomhuman....

圖4aDgs4ECI的DNA序列

圖4aDgs4ECI的DNA序列Fig.4aDNASequeneeofDsg4ECI

圖4b重組融合Dsg4Ecl蛋白表達(dá)質(zhì)粒陽(yáng)性克隆的測(cè)序結(jié)果

圖4aDgs4ECI的DNA序列Fig.4aDNASequeneeofDsg4ECI

本文編號(hào)：3938915