天皰瘡(pemphigus)是自身抗體介導作用于表皮角質形成細胞橋粒芯糖蛋白的自身免疫性大皰性皮膚和粘膜疾病，尋常型天皰瘡(pemphigus vulgaris，PV)是其中最為常見的亞型。盡管已經(jīng)公認橋粒芯糖蛋白-1(desmoglein 1，Dsg1)和橋粒芯糖蛋白-3(desmoglein 3，Dsg3)及其自身抗體與天皰瘡發(fā)病相關，但其確切的發(fā)病機制仍不清楚。新近有研究發(fā)現(xiàn)了人體組織橋粒芯糖蛋白-4(desmoglein4，Dsg4)是PV自身抗體的靶抗原，為該病的研究提供了新的線索。 本項研究目的是擴增人皮膚組織Dsg4胞外域(extracellular domains，ECD)EC1、EC2、EC3和EC4的核酸序列，進一步探討其在PV發(fā)病中的作用。 首先根據(jù)Genebank中人Dsg4的cDNA序列資料，設計Dsg4胞外域EC1、EC2、EC3和EC4 4個DNA片段的特異性引物，通過逆轉錄聚合酶鏈反應(reverse-transcription polymerase chain reaction，RT-PCR)法，以提取的人正常皮膚組織總RNA為模板，擴...

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【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖1質粒pET32a的物理圖譜

人皮膚組織來源于四川大學華西醫(yī)院皮膚性病科門診色素痣切除術所帶病變周圍正�；铙w組織，供者為男性，23歲。原核表達質粒pET32a(質粒物理圖譜見附圖1)、宿主菌(大腸桿菌DH5a)和表達宿主菌(大腸桿菌BLZ)I菌株由四川大學華西基礎醫(yī)學與法醫(yī)學院感染免疫研究室提供。2、主要試劑....

圖2人皮膚組織總RNA電泳圖譜

1、表皮組織RNA瓊脂糖凝膠電泳分析表皮組織總RNA提取產(chǎn)物經(jīng)1.5%瓊脂糖凝膠電泳分析，55、185、285條帶清晰(圖2)，說明RNA無降解。123生2851855S圖2人皮膚組織總RNA電泳圖譜Fig.2EleetroPhorogramoftotalRNArfomhuman....

圖4aDgs4ECI的DNA序列

圖4aDgs4ECI的DNA序列Fig.4aDNASequeneeofDsg4ECI

圖4b重組融合Dsg4Ecl蛋白表達質粒陽性克隆的測序結果

圖4aDgs4ECI的DNA序列Fig.4aDNASequeneeofDsg4ECI

本文編號：3938915