本文關(guān)鍵詞：抗菌肽LL-37對中波紫外線輻射人角質(zhì)形成細胞核因子-κB的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景：紫外線（ultraviolet, UV）是影響人皮膚的重要外界環(huán)境因素之一，特別是中波紫外線(ultraviolet B, UVB)。UVB輻射能使皮膚發(fā)生一系列的分子事件，包括人體唯一的cathelicidin家族抗菌肽LL-37的產(chǎn)生和重要的細胞轉(zhuǎn)錄因子核因子-κB（nuclear factor-κB, NF-κB)的激活。Mookherjee等的研究表明LL-37能顯著抑制脂多糖（lipopolysaccharides, LPS）誘導(dǎo)人單核細胞（human monocytic cells, THP-1）的NF-κB活化。LL-37是否影響UVB輻射誘導(dǎo)的人角質(zhì)形成細胞（keratinocyte，KC）NF-κB的活化，目前國內(nèi)外尚沒有關(guān)于這方面的研究。 目的：探討抗菌肽LL-37對UVB輻射KC NF-κB的蛋白表達及轉(zhuǎn)錄活性的影響，為UVB輻射對人皮膚免疫系統(tǒng)的影響提供一些啟示及皮膚科臨床醫(yī)生運用UVB治療皮膚病及診治日光性皮膚病提供參考。 方法：120mJ/cm~2劑量UVB輻射培養(yǎng)的人永生化角質(zhì)形成細胞株（immortalizedhuman keratinocyte cell line, HaCaT）和原代人角質(zhì)形成細胞（normal humankeratinocyte, NHK），，加入不同濃度的LL-37（終濃度為0,0.5,2,5,10,20ug/mL）共同培養(yǎng)4h,應(yīng)用免疫印跡（western blotting）和電泳遷移率實驗（electrophoreticmotility shift assay, EMSA）方法，檢測HaCaT和NHK細胞各實驗組NF-κB的蛋白表達和轉(zhuǎn)錄活性。 結(jié)果：(1) HaCaT和NHK細胞UVB輻射組NF-κB p65總蛋白表達較未作UVB輻射的空白對照組有大幅增高，具有統(tǒng)計學意義（P0.001）。HaCaT和NHK細胞UVB輻射+不同濃度LL-37處理組NF-κB p65總蛋白表達均明顯低于相應(yīng)的UVB輻射組，具有統(tǒng)計學意義，且具有劑量依賴性，其中HaCaT細胞UVB輻射+0.5μg/mL LL-37處理組P0.05，其他實驗組P0.001。(2) HaCaT和NHK細胞UVB輻射組NF-κB的轉(zhuǎn)錄活性較未作UVB輻射的空白對照組有大幅增高，具有統(tǒng)計學意義（HaCaT細胞UVB輻射組P0.05，NHK細胞UVB輻射組P0.001）。HaCaT和NHK細胞UVB輻射+不同濃度LL-37處理組NF-κB的轉(zhuǎn)錄活性均低于相應(yīng)的UVB輻射組，具有劑量依賴性，其中HaCaT細胞UVB輻射+2,5,10μg/mL LL-37處理組P0.05，UVB輻射+20μg/mL LL-37處理組P0.001，UVB輻射+0.5μg/mLLL-37處理組不具有統(tǒng)計學意義，NHK細胞UVB輻射+10μg/mL LL-37處理組P0.05，UVB輻射+20μg/mL LL-37處理組P0.001，其他實驗組不具有統(tǒng)計學意義。 結(jié)論：LL-37可抑制UVB輻射誘導(dǎo)的HaCaT和NHK細胞NF-κB的蛋白表達和轉(zhuǎn)錄活性的增加，且這種抑制具有劑量依賴性。
【關(guān)鍵詞】：抗菌肽LL-37 核因子-κB 中波紫外線 角質(zhì)形成細胞 HaCaT細胞
【學位授予單位】：安徽醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R758.13
【目錄】：

• 中英文縮略詞表7-8
• 中文摘要8-10
• Abstract10-12
• 1. 前言12-14
• 2. 材料與方法14-22
• 2.1 實驗材料14-18
• 2.1.1 實驗細胞14
• 2.1.2 主要試劑14-16
• 2.1.3 主要儀器16
• 2.1.4 主要溶劑配制16-18
• 2.2 實驗內(nèi)容與方法18-22
• 2.2.1 HaCaT細胞培養(yǎng)18-19
• 2.2.2 原代角質(zhì)形成細胞培養(yǎng)19
• 2.2.3 UVB輻射及細胞處理19-20
• 2.2.4 免疫印跡20-21
• 2.2.5 電泳遷移率實驗21-22
• 2.2.6 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計學分析22
• 3. 實驗結(jié)果22-28
• 3.1 LL-37對UVB輻射HaCaT和NHK 細胞NF-κB蛋白表達的影響22-24
• 3.2 LL-37對UVB輻射HaCaT和NHK細胞的NF-κB轉(zhuǎn)錄活性的影響24-28
• 4. 討論28-32
• 5. 結(jié)論32-33
• 參考文獻33-40
• 附錄一（個人簡歷）40-41
• 附錄二（致謝）41-42
• 附錄三（課題綜述）42-51
• 參考文獻48-51

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 丁靜;沈娟;朱家勇;金小寶;;人源抗菌肽LL-37在創(chuàng)傷修復(fù)中的研究進展[J];廣東醫(yī)學;2011年18期

2 李方舟;胡海峰;;人cathelicidin抗菌肽LL-37在宿主防御系統(tǒng)中的作用[J];世界臨床藥物;2011年04期

3 夏春祥;曾東曉;陳麗華;韓春云;李雨松;紀小亭;;慢性乙型病毒性肝炎患者檢測肽抗菌藥物Cathelicidin hCAP18/LL-37的臨床意義[J];國際檢驗醫(yī)學雜志;2012年01期

4 曾東曉;湯茂功;潘林梅;紀曉亭;夏春祥;;檢測結(jié)核性胸膜炎患者抗菌肽藥物Cathelicidin hCAP18/LL-37濃度的臨床價值[J];國際檢驗醫(yī)學雜志;2013年12期

5 王水明;彭瑞云;高亞兵;吳松峰;金華;胡文化;賈永峰;王德文;;新型人陽離子抗菌蛋白18的構(gòu)建及其表達[J];軍事醫(yī)學科學院院刊;2006年02期

6 宮魁;王雷;付亞萍;王寶杰;劉文真;蔣克勇;劉梅;;對蝦抗菌肽轉(zhuǎn)基因水稻抑制飼料腐敗和防治羅非魚細菌病害的初步研究[J];水產(chǎn)學報;2012年03期

7 韓飛;王平;許文;洪為松;任金平;;抗菌肽LL-37對中波紫外線輻射HaCaT細胞核因子-κB的影響[J];中國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學雜志;2013年03期

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 張軍林;抗菌肽CAMA-syn的組織特異性表達及其抑菌作用的研究[D];西北農(nóng)林科技大學;2012年

2 李

本文編號：382416