目的:探討細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶4/6(cyclin-dependent kinases 4/6,CDK4/6)抑制劑哌柏西利對人惡性黑素瘤SK-MEL-5和A375細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期及凋亡的影響。方法:體外培養(yǎng)人黑素瘤A2058、SK-MEL-5和A375細(xì)胞,以耐藥A2058細(xì)胞作為陰性對照。用不同濃度的哌柏西利處理細(xì)胞24和48 h后,采用CellTiter-Glo^?發(fā)光法檢測哌柏西利對A2058、SK-MEL-5和A375細(xì)胞增殖的影響。碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色后檢測哌柏西利對A2058、SK-MEL-5和A375細(xì)胞周期的影響,蛋白質(zhì)印跡法檢測哌柏西利對SK-MEL-5和A375細(xì)胞中細(xì)胞周期相關(guān)蛋白[CDK4、CDK6、細(xì)胞周期蛋白D1(cyclin D1)、視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤蛋白(retinoblastoma protein,Rb)和磷酸化Rb(phospho-Rb,p-Rb)]表達(dá)的影響。AnnexinⅤ-FITC/PI雙染法檢測哌柏西利對A2058、SK-MEL-5和A375細(xì)胞凋亡的影響。采用NOD/SCID小鼠建立A...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 細(xì)胞、試劑及儀器
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.2 CellTiter-Glo發(fā)光法檢測哌柏西利對黑素瘤細(xì)胞增殖的影響
        1.2.3 FCM法檢測哌柏西利對黑素瘤細(xì)胞周期的影響
        1.2.4 蛋白質(zhì)印跡法檢測細(xì)胞周期蛋白的表達(dá)水平
        1.2.5 FCM法檢測哌柏西利對黑素瘤細(xì)胞凋亡的影響
        1.2.6 黑素瘤異種移植瘤模型的建立及藥物安全性和療效觀察
        1.2.7 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié) 果
    2.1 哌柏西利對人黑素瘤A2058、SK-MEL-5和A375細(xì)胞增殖的影響
    2.2 哌柏西利對黑素瘤A2058、SK-MEL-5和A375細(xì)胞周期的影響
    2.3 哌柏西利對SK-MEL-5和A375細(xì)胞中周期相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
    2.4 哌柏西利對黑素瘤A2058、SK-MEL-5和A375細(xì)胞凋亡的影響
    2.5 哌柏西利體內(nèi)抗腫瘤效應(yīng)
3 討 論



本文編號：3745995