目的探討miR-219a-5p對(duì)皮膚鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞凋亡的影響以及潛在的作用機(jī)制。方法設(shè)置miR-con組、miR-219a-5p組、anti-miR-con組、anti-miR-219a-5p組、miR-219a-5p+pcDNA組、miR-219a-5p+pcDNA-SMC4組、miR-con+SMC4-WT組、miR-con+SMC4-MT組、miR-219a-5p+SMC4-WT組、miR-219a-5p+SMC4-MT組,轉(zhuǎn)染均用脂質(zhì)體法。qRT-PCR檢測(cè)miR-219a-5p和SMC4 mRNA表達(dá)水平;Western Blot檢測(cè)蛋白表達(dá);MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖活性;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡;雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)熒光活性。結(jié)果相較于人正常皮膚細(xì)胞HaCaT,皮膚鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞HSC-2、Colo-16、SCL-1中SMC4 mRNA和蛋白表達(dá)水平顯著升高,miR-219a-5p表達(dá)水平顯著降低（P＜0.05）。過表達(dá)miR-219a-5p可抑制皮膚鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;促進(jìn)Caspase-3蛋白表達(dá),抑制Cyclin D1蛋的表達(dá);抑制Wnt/β-cat... 

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染與分組
        1.2.3 qRT-PCR檢測(cè)miR-219a-5p和SMC4 mRNA表達(dá)水平
        1.2.4 Western blot檢測(cè)SMC4、CyclinD1、Caspase-3、Wnt2、β-catenin蛋白的表達(dá)
        1.2.5 MTT檢測(cè)細(xì)胞活性
        1.2.6 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡
        1.2.7 熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)miR-219a-5p對(duì)SMC4的靶向調(diào)控
        1.2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 miR-219a-5p和SMC4在皮膚鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞株中的表達(dá)
    2.2 轉(zhuǎn)染miR-219a-5p誘導(dǎo)皮膚鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞的凋亡
    2.3 miR-219a-5p過表達(dá)對(duì)Wnt/β-catenin信號(hào)通路的影響
    2.4 miR-219a-5p靶向SMC4抑制SMC4蛋白的表達(dá)
    2.5 過表達(dá)SMC4逆轉(zhuǎn)miR-219a-5p誘導(dǎo)皮膚鱗狀細(xì)胞癌的凋亡
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3712915