發(fā)布時間：2022-12-07 21:46

　　目的探討miR-219a-5p對皮膚鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞凋亡的影響以及潛在的作用機(jī)制。方法設(shè)置miR-con組、miR-219a-5p組、anti-miR-con組、anti-miR-219a-5p組、miR-219a-5p+pcDNA組、miR-219a-5p+pcDNA-SMC4組、miR-con+SMC4-WT組、miR-con+SMC4-MT組、miR-219a-5p+SMC4-WT組、miR-219a-5p+SMC4-MT組,轉(zhuǎn)染均用脂質(zhì)體法。qRT-PCR檢測miR-219a-5p和SMC4 mRNA表達(dá)水平;Western Blot檢測蛋白表達(dá);MTT法檢測細(xì)胞增殖活性;流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡;雙熒光素酶報告基因檢測實(shí)驗(yàn)檢測熒光活性。結(jié)果相較于人正常皮膚細(xì)胞HaCaT,皮膚鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞HSC-2、Colo-16、SCL-1中SMC4 mRNA和蛋白表達(dá)水平顯著升高,miR-219a-5p表達(dá)水平顯著降低（P＜0.05）。過表達(dá)miR-219a-5p可抑制皮膚鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;促進(jìn)Caspase-3蛋白表達(dá),抑制Cyclin D1蛋的表達(dá);抑制Wnt/β-cat... 

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染與分組
        1.2.3 qRT-PCR檢測miR-219a-5p和SMC4 mRNA表達(dá)水平
        1.2.4 Western blot檢測SMC4、CyclinD1、Caspase-3、Wnt2、β-catenin蛋白的表達(dá)
        1.2.5 MTT檢測細(xì)胞活性
        1.2.6 流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡
        1.2.7 熒光素酶報告基因檢測實(shí)驗(yàn)檢測miR-219a-5p對SMC4的靶向調(diào)控
        1.2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 miR-219a-5p和SMC4在皮膚鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞株中的表達(dá)
    2.2 轉(zhuǎn)染miR-219a-5p誘導(dǎo)皮膚鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞的凋亡
    2.3 miR-219a-5p過表達(dá)對Wnt/β-catenin信號通路的影響
    2.4 miR-219a-5p靶向SMC4抑制SMC4蛋白的表達(dá)
    2.5 過表達(dá)SMC4逆轉(zhuǎn)miR-219a-5p誘導(dǎo)皮膚鱗狀細(xì)胞癌的凋亡
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]皮膚鱗狀細(xì)胞癌的研究進(jìn)展[J]. 王鑫,范志霞,王朋敏,張晶,苗國英.  中國臨床研究. 2018(06)
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[8]MiR-200a抑制Wnt/β-catenin信號通路緩解腎間質(zhì)纖維化[J]. 陳華,龔藝,周寶尚,張璟.  中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué). 2017(04)
[9]微RNA在皮膚腫瘤中的研究進(jìn)展[J]. 王瑩,康曉靜.  醫(yī)學(xué)綜述. 2016(19)
[10]Wnt2B及PAI-1在上皮性卵巢癌中的表達(dá)及臨床意義[J]. 左麗娜,張曉薇,范良生.  中華生物醫(yī)學(xué)工程雜志. 2014 (03)

碩士論文
[1]Sox9介導(dǎo)Wnt/β-catenin信號通路影響皮膚鱗癌細(xì)胞增殖的機(jī)制[D]. 李雪梅.大連醫(yī)科大學(xué) 2015
[2]SMC4在原發(fā)性肝癌中的表達(dá)及其臨床意義[D]. 周波.第三軍醫(yī)大學(xué) 2011



本文編號：3712915