外源性信號(hào)通路JAK/STAT在ALA-光動(dòng)力誘導(dǎo)人SCC細(xì)胞凋亡中的作用
發(fā)布時(shí)間:2022-12-07 21:31
目的:明確外源性凋亡機(jī)制(JAK/STAT信號(hào)通路)在5-ALA-PDT誘導(dǎo)人鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞(SCC)凋亡中的作用。方法:體外培養(yǎng)鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系A(chǔ)431和COLO-16,分為空白對(duì)照組、轉(zhuǎn)染陰性對(duì)照組、光動(dòng)力組、轉(zhuǎn)染陰性+光動(dòng)力組、STAT3高表達(dá)載體組、STAT3-siRNA組、STAT3高表達(dá)載體+光動(dòng)力組,STAT3-siRNA組+光動(dòng)力組。CCK-8,流式細(xì)胞術(shù)(FCM)法分別檢測(cè)各組細(xì)胞的存活率和凋亡率,qRT-PCR和Western Blot檢測(cè)STAT3及其下游基因Bax和Bcl-2的mRNA和蛋白水平。結(jié)果:5-ALA-PDT組A431和COLO-16凋亡率為24%和22%高于STAT3高表達(dá)載體+光動(dòng)力組(11%和10.5%),低于STAT3-siRNA+光動(dòng)力組(36%和39%);5-ALA-PDT組STAT3和Bcl-2 mRNA水平和蛋白水平低于高表達(dá)載體+光動(dòng)力組,高于STAT3-siRNA組。5-ALA-PDT組Bax mRNA和蛋白的水平高于高表達(dá)載體+光動(dòng)力組,低于STAT3-siRNA組。結(jié)論:外源性凋亡通路JAK-STAT3可能參與5-ALA-PD...
【文章頁數(shù)】:6 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 細(xì)胞來源
1.1.2 PDT處理參數(shù)
1.2 方法
1.2.1 A431和COLO-16細(xì)胞的傳代培養(yǎng)
1.2.2 pCDNA3.1-STAT3過表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)
1.2.3 STAT3-siRNA轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)
1.2.4 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)(MMT)
1.2.5 流式細(xì)胞儀檢測(cè)(FCM)
1.2.6 qRT-PCR
1.2.7 Western Blot
2 結(jié)果
2.1 STAT3對(duì)ALA-PDT細(xì)胞抑制作用的影響
2.2 STAT3參與了ALA-PDT誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡
2.3
3 討論
本文編號(hào):3712891
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1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 細(xì)胞來源
1.1.2 PDT處理參數(shù)
1.2 方法
1.2.1 A431和COLO-16細(xì)胞的傳代培養(yǎng)
1.2.2 pCDNA3.1-STAT3過表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)
1.2.3 STAT3-siRNA轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)
1.2.4 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)(MMT)
1.2.5 流式細(xì)胞儀檢測(cè)(FCM)
1.2.6 qRT-PCR
1.2.7 Western Blot
2 結(jié)果
2.1 STAT3對(duì)ALA-PDT細(xì)胞抑制作用的影響
2.2 STAT3參與了ALA-PDT誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡
2.3
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