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體外重建毛乳頭的方法探索及其生物學特性的初步實驗研究

發(fā)布時間:2022-07-27 18:06
  目的:利用分離的毛乳頭(dermal papilla)經(jīng)過消化傳代后,與適宜的支架材料混合培養(yǎng),比較不同培養(yǎng)條件下細胞的生長方式和增殖能力的差異,探討人工重建毛乳頭的新途徑,以及評估其在體內、體外條件下誘導毛囊分化的能力。方法:利用酶消化法分別培養(yǎng)人毛乳頭細胞(dermal papilla cells),成纖維細胞,包皮表皮干細胞(foreskin epidermal stem cell)。比較微膠囊與微載體培養(yǎng)細胞的差異,選取微載體cytodex-3和cultispher-G培養(yǎng)毛乳頭細胞,對比不同培養(yǎng)方式間毛乳頭細胞生長曲線,倍增時間的差異。甲苯胺藍染色,α-肌動蛋白染色鑒定毛乳頭細胞。將毛乳頭細胞、微載體毛乳頭系統(tǒng)分別與包皮來源的表皮干細胞混合在復方殼多糖凝膠中進行培養(yǎng),比較對表皮干細胞分化的影響;同時將上述系統(tǒng)移植入裸鼠體內培養(yǎng)。定期觀察大體情況。培養(yǎng)4 w、8 w后,行病理切片、免疫組化觀察體內、體外毛囊形成情況。結果:傳統(tǒng)單層培養(yǎng)與微載體培養(yǎng)毛乳頭細胞對其生長周期影響不大,只是消化時間和倍增時間延后。選取微載體cytodex-3和cultispher-G培養(yǎng)毛乳頭細胞,在1... 

【文章頁數(shù)】:65 頁

【學位級別】:碩士

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論文正文 體外重建毛乳頭的方法探索及其生物學特性的初步實驗研究
    前言
    材料與方法
        一、材料
        二、細胞培養(yǎng)液及其他試劑的配制
        三、細胞的培養(yǎng)
        四、重建載體的處理
        五、微載體毛乳頭細胞系統(tǒng)
        六、微載體毛乳頭細胞系統(tǒng)體外誘導毛囊重建的實驗
        七、裸鼠體內移植實驗
        八、組織學檢查與免疫組化
    結果
        一、細胞培養(yǎng)的觀察
        二、微膠囊的特點
        三、微載體培養(yǎng)毛乳頭細胞的觀察
        四、組織學及免疫組化結果
    討論
        一、載體培養(yǎng)毛乳頭細胞的特點
        二、具有毛囊分化能力的干細胞
        三、毛乳頭細胞與表皮干細胞的相互作用
        四、體外重建毛乳頭三維模型的建立與裸鼠體內移植誘導毛囊重建
全文結論
致謝
照片
參考文獻
文獻綜述一 微載體在生物工程的應用進展
    參考文獻
文獻綜述二 生物工程技術在毛囊誘導的進展
    參考文獻
碩士在讀期間發(fā)表論文


【參考文獻】:
期刊論文
[1]微囊法體外重建人頭皮毛乳頭誘導毛囊再生功能的評價[J]. 李宇,林常敏,蔡湘娜,李國強.  中國臨床康復. 2005(06)
[2]硫酸軟骨素、硫酸肝素對毛乳頭細胞粘附及生長的影響[J]. 程波,伍津津,麥躍,劉榮卿,鐘白玉,唐書謙.  第三軍醫(yī)大學學報. 2001(04)
[3]重視微囊化人工細胞在醫(yī)學中應用的研究[J]. 薛毅瓏.  解放軍醫(yī)學雜志. 1999(04)
[4]生物微膠囊固定化技術的研究進展[J]. 梅樂和,姚善涇.  現(xiàn)代化工. 1998(01)
[5]人工細胞微囊材料殼聚糖的實驗研究[J]. 李濤,楊軍,崔潤海,高茹,宋繼昌,孫多先.  中國生物醫(yī)學工程學報. 1995(01)
[6]BAIB/C突變無毛小鼠皮膚特點的初步觀察[J]. 楊西,劉洪英,劉星.  北京實驗動物科學與管理. 1994(04)



本文編號:3665927

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