【目的】由于皮膚組織韌性強(qiáng)且存在大量RNA酶,采用經(jīng)典Trizol法提取的RNA存在易降解質(zhì)量低等不足。因此,本研究旨在通過改良的Trizol法實(shí)現(xiàn)高質(zhì)量的皮膚RNA提取�！痉椒ā坎捎貌煌幚矸绞剑═ri:Trizol包埋;Pro:RNA樣本保護(hù)液包埋;Cry:先冷凍液氮再冷凍-80℃冰箱;LNG:液氮研磨;Cut:采用剪刀剪碎組織）提取的小鼠正常皮膚RNA為實(shí)驗(yàn)組;脊髓組織作為參照組,并以咪喹莫特（IMQ）誘導(dǎo)的小鼠銀屑病模型皮膚組織作為保真性驗(yàn)證組。我們采用紫外分光光度法、瓊脂凝膠電泳法、定量逆轉(zhuǎn)錄PCR法（qRT-PCR）等方法來檢測經(jīng)典Trizol法（1-Tri,Nor）和改良Trizol法（2-Tri,LNG-Tri,Tri-Cut,Pro）提取的RNA濃度、純度和完整性以及IL-1βmRNA表達(dá)的差異性情況�！窘Y(jié)果】①與脊髓組織相比,經(jīng)典Trizol法（1-Tri）獲得的正常皮膚組織總RNA量要低,DNA污染和5S RNA條帶明顯,IL-1βmRNA相對表達(dá)偏高,說明經(jīng)典Trizol法在皮膚組織中提取RNA存在局限性,需要進(jìn)行改良。②在不同小鼠皮膚樣本處理組中,改良的2-T... 

【文章頁數(shù)】：9 頁

【部分圖文】：

LNG-Tri或2-Tri法改良皮膚總RNA提取的流程方案

不同樣品處理后RNA的瓊脂凝膠電泳樣圖及分析

不同樣品處理后正常皮膚和銀屑病變皮膚中IL-1βmRNA表達(dá)的差異

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]脊髓白細(xì)胞介素-10/β-內(nèi)啡肽通路抑制幼年大鼠神經(jīng)病理性疼痛[J]. 唐雪琪,盧金淼,毛曉芳,王永祥.  中山大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2019(03)
[2]Trizol法提取新生小鼠腦組織總RNA優(yōu)化比較[J]. 楊智,程春鳳,黃昕艷,劉爽,尹興忠,李艷麗,王坤,朱曉峰.  中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志. 2012(02)



本文編號：3661960