一、研究背景和目的銀屑�。╬soriasis）是一種常見(jiàn)易復(fù)發(fā)的慢性炎癥性皮膚病,對(duì)患者的身心健康影響甚大。長(zhǎng)期以來(lái)銀屑病是皮膚病領(lǐng)域研究的重點(diǎn)和熱點(diǎn),較為公認(rèn)的是T細(xì)胞介導(dǎo)的自身免疫反應(yīng)性炎癥機(jī)制,但一些臨床現(xiàn)象卻不能完全用T細(xì)胞誘導(dǎo)的免疫損傷來(lái)解釋。銀屑病最常見(jiàn)的是尋常型,其特征性病理改變?yōu)镸unro微膿腫,表現(xiàn)為皮膚角質(zhì)層內(nèi)中性粒細(xì)胞（polymorphonuclear neutrophils,PMNs）聚集。Munro微膿腫僅存在于角化不全區(qū),該區(qū)角質(zhì)形成細(xì)胞（keratinocyte,KC）有絲分裂率明顯增高。從臨床角度看,尋常型銀屑病同一塊皮損可分為“慢性”和“急性”區(qū),“慢性”區(qū)鏡下為真皮內(nèi)T細(xì)胞大量浸潤(rùn)并向表皮趨化移行,“急性”區(qū)鏡下則可見(jiàn)Munro微膿腫形成�！奥浴眳^(qū)恢復(fù)較快,而“急性”區(qū)對(duì)治療抵抗,恢復(fù)較慢。這種臨床和組織學(xué)上具有的“異質(zhì)性”特點(diǎn)提示PMNs在尋常型銀屑病發(fā)病中必然起著某種作用。而膿皰型銀屑病的病理表現(xiàn)為海綿狀膿皰（Kogoj膿腫）,皰內(nèi)大量PMNs浸潤(rùn),此處KC的增殖水平甚至高于尋常型銀屑病。不同條件下,PMNs在銀屑病發(fā)病中的作用及其機(jī)制仍缺乏... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市

【文章頁(yè)數(shù)】：107 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

質(zhì)粒pIRES2-EGFP示意圖

40圖 2-3 銀屑病跨膜器官培養(yǎng)模型圖片及高表達(dá) trappin-2 細(xì)胞上清液對(duì)銀屑病跨膜模型增表達(dá) trappin-2 細(xì)胞上清液刺激條件實(shí)驗(yàn)分組：來(lái)源于同一患者的銀屑病跨膜模型穩(wěn)定的 KC-SFM，另設(shè)空白對(duì)照。 trappin-2 細(xì)胞上清液刺激實(shí)驗(yàn)分組：來(lái)源于同一患者

圖 2-6 質(zhì)粒 pIRES2-EGFP-trappin-2 cDNA 測(cè)序圖三、HeLa 細(xì)胞 G418 篩選濃度的確定觀察至第 7d，G418 濃度為 500μg/ml 及其以上各濃度各孔的細(xì)胞全部死亡，故以 600μg/ml 作為 HeLa 細(xì)胞轉(zhuǎn)染后的 G418 篩選濃度。四、Trappin-2 基因表達(dá)的鑒定1. EGFP 的表達(dá)檢測(cè)轉(zhuǎn)染 36hr 后，用激光共聚焦顯微鏡可觀察到 pIRES2-EGFP-trappin-2 轉(zhuǎn)染的HeLa 細(xì)胞中 EGFP 的有效表達(dá)，60%以上的細(xì)胞出現(xiàn)綠色熒光。pIRES2-EGFP 空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的 HeLa 細(xì)胞中同樣可以觀察到 EGFP 的表達(dá)(圖 2-7)。

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號(hào)：3629356