發(fā)布時(shí)間：2022-02-14 22:37

　　正常細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)生命期是有限的,細(xì)胞增殖一段時(shí)間后會(huì)出現(xiàn)群體生長(zhǎng)緩慢,有絲分裂停滯,進(jìn)而衰老死亡,這種現(xiàn)象叫做復(fù)制衰亡（replicative senescence）。細(xì)胞的這種生物學(xué)現(xiàn)象導(dǎo)致一些體外培養(yǎng)的細(xì)胞因生長(zhǎng)增殖能力衰竭、數(shù)量不足而不能充分滿足實(shí)驗(yàn)研究和臨床應(yīng)用的要求。后來(lái)人們觀察到一些腫瘤細(xì)胞具有持續(xù)生長(zhǎng)和增殖的能力,可長(zhǎng)期傳代,即細(xì)胞的永生化（immortalization）。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)部分永生化的腫瘤細(xì)胞中含有病毒基因（virus gene）,因此通過(guò)轉(zhuǎn)染技術(shù)將病毒基因?qū)氩⒄显隗w外培養(yǎng)的正常細(xì)胞基因組上,使其出現(xiàn)永生化就成為了細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究的熱門。猿猴病毒40（simian virus 40,SV40）是60年代初發(fā)現(xiàn)和分離的猴腎細(xì)胞病毒,人是其自然宿主。SV40的基因組能編碼T（Large T）和t（small t）抗原。T抗原具有ATP酶和DNA解旋酶活性,使蛋白質(zhì)絲氨酸/蘇氨酸殘基磷酸化、ADP核糖基化和己�；抗原還有活化宿主細(xì)胞核糖體基因、誘導(dǎo)DNA合成、修飾蛋白質(zhì)合成起始因子等作用。t抗原能反式激活RNA多聚酶基因的啟動(dòng)子,以及c-myc和c-f... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市

【文章頁(yè)數(shù)】：76 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖圖

結(jié) 果T-LoxP-PEGFP-N1質(zhì)粒的擴(kuò)增和鑒定粒的細(xì)菌在選擇性 LB 瓊脂平板上形成數(shù)百個(gè)克隆，陰隨機(jī)挑選陽(yáng)性克隆，提取質(zhì)粒在 BamH I、EcoR I 雙酶 大小條帶，分別與載體和目的條帶大小一致。而單酶切 1-2)；

SV40T-LoxP-PEGFP-N1質(zhì)粒酶切鑒定M1:D2000DNAMarker1:未酶切質(zhì)粒DNA100

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3625393