第一部分UVA對人皮膚成纖維細胞凋亡的影響目的:提取、培養(yǎng)、鑒定原代人皮膚成纖維細胞,獲得足夠的細胞源。從形態(tài)學觀察不同劑量長波紫外線（UVA）對原代人皮膚成纖維細胞生長的影響,分析照射后成纖維細胞增殖活性隨UVA劑量變化的關系,探討UVA對原代人皮膚成纖維細胞凋亡的影響以及摸索UVA誘導原代人皮膚成纖維細胞凋亡的最佳劑量與時間。方法:1.收集2-14歲男性包皮環(huán)切術(shù)后的包皮,消毒后,將包皮分離,取真皮層;剪碎成糜狀,加入膠原酶消化,離心后棄上清,用完全培養(yǎng)基（含87%高糖DMEM、10%FBS、1%GlutaMAX、1%NEAA、1%青霉素-鏈霉素溶液）重懸后,置于37℃、5%CO₂培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。將細胞進行免疫細胞化學法鑒定,獲得了高純度的細胞源。進行不斷的傳代,凍存細胞。直接計數(shù)法觀察細胞的生長情況。2.建立UVA照射成纖維細胞模型,觀察細胞形態(tài)。細胞以1.5×10⁵ cells/ml密度均勻地接種于6孔板中,待細胞融合度為80%時于SUV-1000日光紫外線模擬器光束下進行照光,設有未照光的對照組、4 J/cm²組... 

【文章來源】：西南醫(yī)科大學四川省

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

人皮膚成纖維細胞原代培養(yǎng)（×100）

圖 1.2 人皮膚成纖維細胞原代培養(yǎng)（×200）Fig.1.2 Primary culture of HSF（×200）長曲線接計數(shù)的方法觀察第 5 代細胞一周內(nèi)的生長情況，

第5代人皮膚成纖維細胞生長曲線

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3598830