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探討DDB2基因?qū)︷畀徳錾择:坌纬杉癟GF-β/Smads信號通路的影響

發(fā)布時間:2022-01-01 22:37
  目的:尋常痤瘡是一種常見的慢性炎癥性皮膚病,根據(jù)改良的Pillsbury4級分級法,將其分為IIV級(輕、中、重度)。重度痤瘡主要表現(xiàn)為囊腫、結節(jié),易形成瘢痕,其對容貌具有一定的損害性,這可能會對患者造成消極負面的心理影響。越來越多的研究發(fā)現(xiàn),遺傳因素在痤瘡增生性瘢痕的發(fā)生中發(fā)揮著重要作用,因此,本研究擬探討DNA損傷連接蛋白2(damaged-DNA binding 2,DDB2)對痤瘡增生性瘢痕形成的影響,并進一步探討其對TGF-β/Smads信號通路的影響。方法:1.構建穩(wěn)定表達DDB2基因的過表達慢病毒載體pCDH-GFP-DDB2及干擾載體pLKO.1-DDB2-shRNA,將攜帶DDB2基因的慢病毒載體(pCDH-GFP-DDB2,DDB2-shRNA組)及空載體(pCDH-GFP,scrambled-shRNA組)感染人成纖維細胞(fibroblasts,FB)細胞,并設計空白對照組(Blank組)。2.應用MTT法檢測pCDH-GFP-DDB2組、DDB2-shRNA組、pCDH-GFP組、scrambled-shRNA組、Blank組中人FB細胞... 

【文章來源】:西南醫(yī)科大學四川省

【文章頁數(shù)】:74 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

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Westernblot檢測DDB2基因在人FB中的表達結果

效果圖,熒光,效果,病毒顆粒


西 南 醫(yī) 科 大 學 碩 士 學 位 論 文反轉錄中共獲得 cDNA20ul,RT-PCR 檢測中僅使用了 1ul,所以該結果表示的是 1/20 樣品的情況,最終計算滴度時應該乘以 20。根據(jù) RT-PCR 結果,在 4 號孔樣品和 control 組樣本 Ct 值存在 3 個左右的差異,認為在 4 號孔中存在病毒顆粒,稀釋倍數(shù)為 1*10-4。假定該組樣品中含有至少 1 個病毒顆粒,那么計算病毒的滴度為:1/(1*10-4)*20=2*105TU/ul=2*108TU/ml。

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Bright field GFP圖 4 pCDH-GFP-DDB2 熒光效果Figure 4 Fluorescence of pCDH-GFP-DDB24 驗證干擾慢病毒載體結果DDB2GAPDH

【參考文獻】:
期刊論文
[1]不同精神科評價量表對重度痤瘡患者生活質(zhì)量評價的臨床研究[J]. 穆欣,春麗霞,劉云.  中國中西醫(yī)結合皮膚性病學雜志. 2018(04)
[2]窄譜強脈沖光聯(lián)合調(diào)Q激光治療痤瘡后紅斑、色素沉著的臨床效果及對患者生活質(zhì)量的影響[J]. 雷德軍,丁欣強,朱自榮.  陜西醫(yī)學雜志. 2018(07)
[3]機械牽張力加載時間對誘導正常皮膚成纖維細胞向增生性瘢痕成纖維細胞轉化過程的影響研究[J]. 朱明宇,李雨珊,王志國,匡瑞霞.  中國美容醫(yī)學. 2018(06)
[4]萎縮性痤瘡瘢痕治療的最新進展[J]. 劉冰,張曉寧,王嵐,郭寧寧,李承新.  中國激光醫(yī)學雜志. 2018(03)
[5]Th17細胞在痤瘡發(fā)病中的作用及與痤瘡嚴重度相關性的功能研究[J]. 陸威,周炳榮,湯怡,樊一斌,陶小華.  中國臨床藥理學與治療學. 2018(01)
[6]基于TGF-β1/Smads信號通路治療心肌梗死后心肌纖維化的研究進展[J]. 石斌豪,徐宗佩,樊官偉.  中國藥理學通報. 2018(01)
[7]PPARγ在脂肪生成中的遺傳和表觀遺傳調(diào)控[J]. 崔婷婷,邢天宇,褚衍凱,李輝,王寧.  遺傳. 2017(11)
[8]腦血管狹窄患者Nf1全基因的DHPLC分析(附5例報告)[J]. 梁建濤,賈冰冰,鄒俊華,霍麗蓉.  北京醫(yī)學. 2017(10)
[9]Treg細胞和Th17細胞的研究進展[J]. 陳碩,聶漢祥,劉琳琳.  臨床肺科雜志. 2017(10)
[10]秦皇島市120例重度痤瘡學生的心理及睡眠質(zhì)量狀況臨床調(diào)查分析[J]. 徐海豐,張瑜,李中文,王亞斐,楊惠君.  中國美容醫(yī)學. 2017(08)

博士論文
[1]Wnt/β-catenin抑制劑IWR-1對瘢痕疙瘩成纖維細胞的抑制作用及機制研究[D]. 周明偉.吉林大學 2017
[2]TGF-β1介導TGF-β1/Smad及ERK/MAPK通路協(xié)同促進大鼠骨髓炎瘢痕形成的機制研究[D]. 王鵬.山東大學 2017
[3]多個基因交互作用與痤瘡的相關性研究[D]. 王紅艷.安徽醫(yī)科大學 2016
[4]中國漢族人群重型痤瘡的全基因組關聯(lián)研究[D]. 楊健康.云南大學 2014

碩士論文
[1]中國漢族重型痤瘡易感基因DDB2的功能研究[D]. 鄧珍君.昆明醫(yī)科大學 2017
[2]不同階段增生性瘢痕skp2,E2F1的表達及意義[D]. 唐紅梅.遵義醫(yī)學院 2009



本文編號:3562964

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