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探討DDB2基因?qū)︷畀徳錾择:坌纬杉癟GF-β/Smads信號通路的影響

發(fā)布時(shí)間:2022-01-01 22:37
  目的:尋常痤瘡是一種常見的慢性炎癥性皮膚病,根據(jù)改良的Pillsbury4級分級法,將其分為IIV級(輕、中、重度)。重度痤瘡主要表現(xiàn)為囊腫、結(jié)節(jié),易形成瘢痕,其對容貌具有一定的損害性,這可能會(huì)對患者造成消極負(fù)面的心理影響。越來越多的研究發(fā)現(xiàn),遺傳因素在痤瘡增生性瘢痕的發(fā)生中發(fā)揮著重要作用,因此,本研究擬探討DNA損傷連接蛋白2(damaged-DNA binding 2,DDB2)對痤瘡增生性瘢痕形成的影響,并進(jìn)一步探討其對TGF-β/Smads信號通路的影響。方法:1.構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)DDB2基因的過表達(dá)慢病毒載體pCDH-GFP-DDB2及干擾載體pLKO.1-DDB2-shRNA,將攜帶DDB2基因的慢病毒載體(pCDH-GFP-DDB2,DDB2-shRNA組)及空載體(pCDH-GFP,scrambled-shRNA組)感染人成纖維細(xì)胞(fibroblasts,FB)細(xì)胞,并設(shè)計(jì)空白對照組(Blank組)。2.應(yīng)用MTT法檢測pCDH-GFP-DDB2組、DDB2-shRNA組、pCDH-GFP組、scrambled-shRNA組、Blank組中人FB細(xì)胞... 

【文章來源】:西南醫(yī)科大學(xué)四川省

【文章頁數(shù)】:74 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

探討DDB2基因?qū)︷畀徳錾择:坌纬杉癟GF-β/Smads信號通路的影響


Westernblot檢測DDB2基因在人FB中的表達(dá)結(jié)果

效果圖,熒光,效果,病毒顆粒


西 南 醫(yī) 科 大 學(xué) 碩 士 學(xué) 位 論 文反轉(zhuǎn)錄中共獲得 cDNA20ul,RT-PCR 檢測中僅使用了 1ul,所以該結(jié)果表示的是 1/20 樣品的情況,最終計(jì)算滴度時(shí)應(yīng)該乘以 20。根據(jù) RT-PCR 結(jié)果,在 4 號孔樣品和 control 組樣本 Ct 值存在 3 個(gè)左右的差異,認(rèn)為在 4 號孔中存在病毒顆粒,稀釋倍數(shù)為 1*10-4。假定該組樣品中含有至少 1 個(gè)病毒顆粒,那么計(jì)算病毒的滴度為:1/(1*10-4)*20=2*105TU/ul=2*108TU/ml。

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Bright field GFP圖 4 pCDH-GFP-DDB2 熒光效果Figure 4 Fluorescence of pCDH-GFP-DDB24 驗(yàn)證干擾慢病毒載體結(jié)果DDB2GAPDH

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]不同精神科評價(jià)量表對重度痤瘡患者生活質(zhì)量評價(jià)的臨床研究[J]. 穆欣,春麗霞,劉云.  中國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)雜志. 2018(04)
[2]窄譜強(qiáng)脈沖光聯(lián)合調(diào)Q激光治療痤瘡后紅斑、色素沉著的臨床效果及對患者生活質(zhì)量的影響[J]. 雷德軍,丁欣強(qiáng),朱自榮.  陜西醫(yī)學(xué)雜志. 2018(07)
[3]機(jī)械牽張力加載時(shí)間對誘導(dǎo)正常皮膚成纖維細(xì)胞向增生性瘢痕成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化過程的影響研究[J]. 朱明宇,李雨珊,王志國,匡瑞霞.  中國美容醫(yī)學(xué). 2018(06)
[4]萎縮性痤瘡瘢痕治療的最新進(jìn)展[J]. 劉冰,張曉寧,王嵐,郭寧寧,李承新.  中國激光醫(yī)學(xué)雜志. 2018(03)
[5]Th17細(xì)胞在痤瘡發(fā)病中的作用及與痤瘡嚴(yán)重度相關(guān)性的功能研究[J]. 陸威,周炳榮,湯怡,樊一斌,陶小華.  中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué). 2018(01)
[6]基于TGF-β1/Smads信號通路治療心肌梗死后心肌纖維化的研究進(jìn)展[J]. 石斌豪,徐宗佩,樊官偉.  中國藥理學(xué)通報(bào). 2018(01)
[7]PPARγ在脂肪生成中的遺傳和表觀遺傳調(diào)控[J]. 崔婷婷,邢天宇,褚衍凱,李輝,王寧.  遺傳. 2017(11)
[8]腦血管狹窄患者Nf1全基因的DHPLC分析(附5例報(bào)告)[J]. 梁建濤,賈冰冰,鄒俊華,霍麗蓉.  北京醫(yī)學(xué). 2017(10)
[9]Treg細(xì)胞和Th17細(xì)胞的研究進(jìn)展[J]. 陳碩,聶漢祥,劉琳琳.  臨床肺科雜志. 2017(10)
[10]秦皇島市120例重度痤瘡學(xué)生的心理及睡眠質(zhì)量狀況臨床調(diào)查分析[J]. 徐海豐,張瑜,李中文,王亞斐,楊惠君.  中國美容醫(yī)學(xué). 2017(08)

博士論文
[1]Wnt/β-catenin抑制劑IWR-1對瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞的抑制作用及機(jī)制研究[D]. 周明偉.吉林大學(xué) 2017
[2]TGF-β1介導(dǎo)TGF-β1/Smad及ERK/MAPK通路協(xié)同促進(jìn)大鼠骨髓炎瘢痕形成的機(jī)制研究[D]. 王鵬.山東大學(xué) 2017
[3]多個(gè)基因交互作用與痤瘡的相關(guān)性研究[D]. 王紅艷.安徽醫(yī)科大學(xué) 2016
[4]中國漢族人群重型痤瘡的全基因組關(guān)聯(lián)研究[D]. 楊健康.云南大學(xué) 2014

碩士論文
[1]中國漢族重型痤瘡易感基因DDB2的功能研究[D]. 鄧珍君.昆明醫(yī)科大學(xué) 2017
[2]不同階段增生性瘢痕skp2,E2F1的表達(dá)及意義[D]. 唐紅梅.遵義醫(yī)學(xué)院 2009



本文編號:3562964

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