在我國，肢端雀斑樣黑素瘤（ALM）是黑素瘤的主要類型，其生物學行為、發(fā)展和預后與其它類型黑素瘤相比存在很大的不同，但是關于ALM基因表達的研究不是很多，我們選取HINT1／PKCI-1和FAK兩個基因，比較研究它們在ALM和普通痣細胞痣表達的差異，為尋找ALM新的診斷和預后指標以及新的治療靶位打下基礎。并探討從存檔皮膚組織中提取RNA進行逆轉錄PCR反應的可行性和穩(wěn)定性，并與原位雜交和免疫組化的結果進行比較，為今后利用存檔組織標本進行基因RNA表達水平的回顧性研究打下基礎。 本文首先用蛋白酶K消化和異硫酸氰胍—酸性苯酚法提取石蠟包埋組織中RNA，進行逆轉錄PCR反應。探討并優(yōu)化了在不同儲存時間段的石蠟包埋組織中提取RNA和RT-PCR的條件，比較了不同擴增片段長度和分別以隨機引物、特異性下游引物作為逆轉錄引物對RT-PCR結果的影響。發(fā)現(xiàn)擴增片段＜120bp、采用特異性下游引物為逆轉錄引物的RT-PCR的結果穩(wěn)定，不同儲存時間的組織間無差異。比較了5例標本分別經(jīng)福爾馬林固定石蠟包埋和直接凍存提取RNA進行RT-PCR的結果，mRNA表達的水平均由與管家基因的相對比值來表示，結果石... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：87 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
縮略語
前言
全文摘要
Abstract
第一篇 實驗材料及研究方法
    第一節(jié) 研究對象
    第二節(jié) 研究試劑和方法
        一、RT-PCR試劑及實驗方法
        二、原位雜交試劑及實驗方法
        三、免疫組化試劑及實驗方法
        四、主要儀器
第二篇 石蠟包埋皮膚組織標本中提取RNA進行逆轉錄PCR的研究
第三篇 HINT1／PKCI-1mRNA在良惡性黑素細胞瘤中的表達
    第一節(jié) 逆轉錄PCR法檢測良惡性黑素細胞腫瘤中HINT／PKCI-1mRNA的表達
    第二節(jié) 原位雜交法檢測良惡性黑素細胞腫瘤中HINT／PKCI-1mRNA的表達
第四篇 良惡性黑素細胞腫瘤中局部黏附斑蛋白激酶(FAK)的表達
第五篇 論文相關綜述
    HIT家族及與腫瘤的關系
在讀期間發(fā)表及參加會議文章
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]西安、重慶兩所醫(yī)院20年皮膚惡性黑素瘤回顧[J]. 孫東杰,高天文,李春英,劉榮卿,李青,劉友生,刁慶春,何弘,黃高升,郝飛,馬福成,柳鳳軒,鐘白玉,閆小初,劉東梅,李廷慧,劉玉峰.  中華皮膚科雜志. 2004(02)
[2]運用cDNA芯片技術對惡性黑素瘤相關基因的研究[J]. 林彤,孫建方.  中華皮膚科雜志. 2004(02)



本文編號：3558707