發(fā)布時(shí)間：2021-12-30 17:59

　　在我國(guó)，肢端雀斑樣黑素瘤（ALM）是黑素瘤的主要類型，其生物學(xué)行為、發(fā)展和預(yù)后與其它類型黑素瘤相比存在很大的不同，但是關(guān)于ALM基因表達(dá)的研究不是很多，我們選取HINT1／PKCI-1和FAK兩個(gè)基因，比較研究它們?cè)贏LM和普通痣細(xì)胞痣表達(dá)的差異，為尋找ALM新的診斷和預(yù)后指標(biāo)以及新的治療靶位打下基礎(chǔ)。并探討從存檔皮膚組織中提取RNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄PCR反應(yīng)的可行性和穩(wěn)定性，并與原位雜交和免疫組化的結(jié)果進(jìn)行比較，為今后利用存檔組織標(biāo)本進(jìn)行基因RNA表達(dá)水平的回顧性研究打下基礎(chǔ)。 本文首先用蛋白酶K消化和異硫酸氰胍—酸性苯酚法提取石蠟包埋組織中RNA，進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄PCR反應(yīng)。探討并優(yōu)化了在不同儲(chǔ)存時(shí)間段的石蠟包埋組織中提取RNA和RT-PCR的條件，比較了不同擴(kuò)增片段長(zhǎng)度和分別以隨機(jī)引物、特異性下游引物作為逆轉(zhuǎn)錄引物對(duì)RT-PCR結(jié)果的影響。發(fā)現(xiàn)擴(kuò)增片段＜120bp、采用特異性下游引物為逆轉(zhuǎn)錄引物的RT-PCR的結(jié)果穩(wěn)定，不同儲(chǔ)存時(shí)間的組織間無(wú)差異。比較了5例標(biāo)本分別經(jīng)福爾馬林固定石蠟包埋和直接凍存提取RNA進(jìn)行RT-PCR的結(jié)果，mRNA表達(dá)的水平均由與管家基因的相對(duì)比值來(lái)表示，結(jié)果石... 

【文章來(lái)源】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：87 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
縮略語(yǔ)
前言
全文摘要
Abstract
第一篇 實(shí)驗(yàn)材料及研究方法
    第一節(jié) 研究對(duì)象
    第二節(jié) 研究試劑和方法
        一、RT-PCR試劑及實(shí)驗(yàn)方法
        二、原位雜交試劑及實(shí)驗(yàn)方法
        三、免疫組化試劑及實(shí)驗(yàn)方法
        四、主要儀器
第二篇 石蠟包埋皮膚組織標(biāo)本中提取RNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄PCR的研究
第三篇 HINT1／PKCI-1mRNA在良惡性黑素細(xì)胞瘤中的表達(dá)
    第一節(jié) 逆轉(zhuǎn)錄PCR法檢測(cè)良惡性黑素細(xì)胞腫瘤中HINT／PKCI-1mRNA的表達(dá)
    第二節(jié) 原位雜交法檢測(cè)良惡性黑素細(xì)胞腫瘤中HINT／PKCI-1mRNA的表達(dá)
第四篇 良惡性黑素細(xì)胞腫瘤中局部黏附斑蛋白激酶(FAK)的表達(dá)
第五篇 論文相關(guān)綜述
    HIT家族及與腫瘤的關(guān)系
在讀期間發(fā)表及參加會(huì)議文章
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]西安、重慶兩所醫(yī)院20年皮膚惡性黑素瘤回顧[J]. 孫東杰,高天文,李春英,劉榮卿,李青,劉友生,刁慶春,何弘,黃高升,郝飛,馬福成,柳鳳軒,鐘白玉,閆小初,劉東梅,李廷慧,劉玉峰.  中華皮膚科雜志. 2004(02)
[2]運(yùn)用cDNA芯片技術(shù)對(duì)惡性黑素瘤相關(guān)基因的研究[J]. 林彤,孫建方.  中華皮膚科雜志. 2004(02)



本文編號(hào)：3558707