目的闡明Genistein對惡性黑素瘤LiBr細(xì)胞Livin基因表達(dá)的影響和對惡性黑素瘤細(xì)胞凋亡、周期及增殖的作用，為進(jìn)一步探索Genistein治療惡性黑素瘤的可能性和揭示Genistein的抑癌機(jī)制提供實驗依據(jù)。方法分別在基因和蛋白水平上應(yīng)用RT-PCR和Western blot檢測、確認(rèn)惡性黑素瘤LiBr細(xì)胞Livin基因的表達(dá)；在體外以高表達(dá)Livin基因的惡性黑素瘤LiBr細(xì)胞為試驗對象，應(yīng)用RT-PCR檢測Genistein作用LiBr細(xì)胞后Livin基因的表達(dá)變化，并初步探討其劑量及時間效應(yīng)；取最適濃度的Genistein作用LiBr細(xì)胞后應(yīng)用Annexin V-FITC/PI雙染流式細(xì)胞術(shù)檢測其對細(xì)胞凋亡的影響；應(yīng)用PI單染流式細(xì)胞術(shù)分析其對細(xì)胞周期的改變；應(yīng)用Western blot檢測其對凋亡效應(yīng)蛋白caspase-3表達(dá)的影響及應(yīng)用MTT比色法檢測其對細(xì)胞增殖的作用。結(jié)果經(jīng)RT-PCR和Western blot檢測，惡性黑素瘤LiBr細(xì)胞高表達(dá)Livin基因；Genistein作用LiBr細(xì)胞后能顯著下調(diào)Livin基因表達(dá)，并且下調(diào)過程呈劑量和時間依賴關(guān)系，40u... 

【文章來源】：寧夏醫(yī)科大學(xué)寧夏回族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
材料與方法
    1 研究對象
    2 主要實驗儀器
    3 主要實驗試劑
    4 實驗方法
        4.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        4.2 RT-PCR 檢測 LiBr 細(xì)胞 Livin 的表達(dá)
        4.3 Western blot 檢測、確認(rèn)惡性黑素瘤 LiBr 細(xì)胞 Livin 的表達(dá)
        4.4 Genistein 下調(diào) Livin 基因的劑量效應(yīng)
        4.5 Genistein 下調(diào) Livin 基因的時間效應(yīng)
        4.6 Annexin V-FITC/PI 雙染流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡率
        4.7 Western blot 檢測 Genistein 引起 LiBr 細(xì)胞 caspase-3 蛋白表達(dá)變化的影響
        4.8 PI 單染流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期
        4.9 MTT 檢測 LiBr 細(xì)胞的增殖
    5 質(zhì)量控制
    6 數(shù)據(jù)處理
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述 1
    參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述 2
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄
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【參考文獻(xiàn)】：
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