目的闡明Genistein對惡性黑素瘤LiBr細胞Livin基因表達的影響和對惡性黑素瘤細胞凋亡、周期及增殖的作用，為進一步探索Genistein治療惡性黑素瘤的可能性和揭示Genistein的抑癌機制提供實驗依據(jù)。方法分別在基因和蛋白水平上應(yīng)用RT-PCR和Western blot檢測、確認惡性黑素瘤LiBr細胞Livin基因的表達；在體外以高表達Livin基因的惡性黑素瘤LiBr細胞為試驗對象，應(yīng)用RT-PCR檢測Genistein作用LiBr細胞后Livin基因的表達變化，并初步探討其劑量及時間效應(yīng)；取最適濃度的Genistein作用LiBr細胞后應(yīng)用Annexin V-FITC/PI雙染流式細胞術(shù)檢測其對細胞凋亡的影響；應(yīng)用PI單染流式細胞術(shù)分析其對細胞周期的改變；應(yīng)用Western blot檢測其對凋亡效應(yīng)蛋白caspase-3表達的影響及應(yīng)用MTT比色法檢測其對細胞增殖的作用。結(jié)果經(jīng)RT-PCR和Western blot檢測，惡性黑素瘤LiBr細胞高表達Livin基因；Genistein作用LiBr細胞后能顯著下調(diào)Livin基因表達，并且下調(diào)過程呈劑量和時間依賴關(guān)系，40u... 

【文章來源】：寧夏醫(yī)科大學寧夏回族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
材料與方法
    1 研究對象
    2 主要實驗儀器
    3 主要實驗試劑
    4 實驗方法
        4.1 細胞培養(yǎng)
        4.2 RT-PCR 檢測 LiBr 細胞 Livin 的表達
        4.3 Western blot 檢測、確認惡性黑素瘤 LiBr 細胞 Livin 的表達
        4.4 Genistein 下調(diào) Livin 基因的劑量效應(yīng)
        4.5 Genistein 下調(diào) Livin 基因的時間效應(yīng)
        4.6 Annexin V-FITC/PI 雙染流式細胞儀檢測細胞凋亡率
        4.7 Western blot 檢測 Genistein 引起 LiBr 細胞 caspase-3 蛋白表達變化的影響
        4.8 PI 單染流式細胞儀檢測細胞周期
        4.9 MTT 檢測 LiBr 細胞的增殖
    5 質(zhì)量控制
    6 數(shù)據(jù)處理
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
文獻綜述 1
    參考文獻
文獻綜述 2
    參考文獻
致謝
攻讀學位期間發(fā)表的學術(shù)論文目錄
個人簡歷


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3495334