研究背景近年來(lái),隨著分子生物學(xué)、生物化學(xué)、分子遺傳學(xué)等學(xué)科的迅猛發(fā)展,使得包括皮膚在內(nèi)等相關(guān)生理系統(tǒng)在細(xì)胞及分子水平上的研究日新月異。皮膚蛋白是皮膚中的主要組成部分,在皮膚屏障中發(fā)揮著保濕、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、免疫調(diào)節(jié)等重要功能。皮膚蛋白含量的變化可導(dǎo)致皮膚屏障功能受損,后者與一些皮膚疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。現(xiàn)在迅速崛起的質(zhì)譜技術(shù)也使得大規(guī)模、系統(tǒng)性研究蛋白質(zhì)組學(xué)成為可能。皮膚蛋白的深入探索可為新藥的研發(fā)及皮膚疾患的診療提供新的靶點(diǎn)和方向,因此有關(guān)皮膚蛋白的功能與作用機(jī)制逐漸成為研究熱點(diǎn)。研究目的本研究通過(guò)使用無(wú)創(chuàng)性取材方法采集中國(guó)健康人群皮膚樣品,然后與無(wú)標(biāo)記納流液相色譜-質(zhì)譜（nLC-MS）相結(jié)合對(duì)皮膚中的蛋白進(jìn)行分析,為進(jìn)一步建立中國(guó)健康人群皮膚蛋白定性及定量分析平臺(tái)奠定基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)材料與方法用醫(yī)用膠帶在中國(guó)健康志愿者的前臂掌側(cè)皮膚同一部位連續(xù)5次取材,隨后對(duì)膠帶上的蛋白質(zhì)進(jìn)行收集、提取、酶解,并通過(guò)與Orbitrap Fusion Tribrid高分辨質(zhì)譜儀相偶聯(lián)、對(duì)已被胰蛋白酶降解過(guò)的肽混合物進(jìn)行上機(jī)分析。最后使用Proteome Discoverer 2.2（Thermo）對(duì)樣品中的蛋... 

【文章來(lái)源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁(yè)數(shù)】：63 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

OrbitrapFusionTribrid質(zhì)譜儀Fig1.OrbitrapFusionTribridhigh-resolutionmassspectrometer

圖 2. 創(chuàng)新的三合一結(jié)構(gòu)Fig 2. Innovative three-in-one structure3.3.1 四極桿質(zhì)量分析器：金屬鉬雙曲面四極桿，分辨率高達(dá) 0.4Da3.3.2 雙壓線性離子阱：雙壓線性離子阱的高壓阱能夠?qū)㈦x子捕獲同時(shí)提高碎裂能力，縮短碎裂時(shí)間；量范圍 m/z：標(biāo)準(zhǔn)模式 50-2000m/z；高質(zhì)量模式 200-4000 m/z；壓線性離子阱掃描速度：20Hz；敏度（ESI）：100 fg 利血平，全掃描 MS/MS，信噪比>100:1（峰靈敏度（ESI）：100 fg 利血平，全掃描 MS3，信噪比>25:1；有自動(dòng)增益控制，能全自動(dòng)優(yōu)化進(jìn)入離子阱的離子數(shù)量并達(dá)到最佳

圖 3. 樣品 4 中肽段母離子所對(duì)應(yīng)的 m/z 值Fig 3. The m/z value corresponding to the parent peptide of the peptide in sample 4RT: 0.00 - 120.015101520253035404550556065707580859095100RelativeAbundance62.7316.7815.6617.57112.8961.4897.1644.7730.6428.0219.4590.89109.2235.3847.3123.6637.3453.97 80.4680.9553.72106.8040.7355.8182.09 105.4253.2972.9666.8950.8274.34114.66116.7414.4293.9714.2685.7713.985.236.9112.85NL:2.45E10TIC MSHela02_20171223


本文編號(hào)：3475359