目的：探討染料木黃酮對補骨脂素光化學(xué)療法（8-methoxypsoralenplus ultraviolet-A irradiation，PUVA）所致體外培養(yǎng)真皮成纖維細(xì)胞光化學(xué)損傷的保護作用，并研究其潛在的作用機制。方法：采用酶消化法分離、培養(yǎng)原代真皮成纖維細(xì)胞，傳代并擴增。以其特異性標(biāo)記物波形蛋白（Vimentin）做免疫熒光鑒定。實驗分三組：正常對照組、光化學(xué)損傷組及染料木黃酮組。運用PUVA聯(lián)合構(gòu)建體外培養(yǎng)真皮成纖維細(xì)胞光化學(xué)損傷模型。噻唑藍(lán)比色法（MTT法）測定各組細(xì)胞增殖活性，確定染料木黃酮的最適光保護作用濃度，并繪制各組細(xì)胞連續(xù)10天的生長曲線。光鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)，酶組織化學(xué)法檢測細(xì)胞衰老β半乳糖苷酶（senescence-associatedβ-galactosidase，SA-β-Gal）的表達(dá)。流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期及細(xì)胞內(nèi)活性氧（Reactive oxygen species，ROS）含量，實時熒光定量PCR檢測細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶（Matrix metalloproteinases，MMPs）及雌激素受體β（Estrogen receptor-β） mRNA的表... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

成纖維細(xì)胞分離模式圖

紫外線照射方法

倒置顯微鏡下成纖維細(xì)胞形態(tài)（×200）


本文編號：3451815