背景黑色素瘤是一種致死性極高和易發(fā)生耐藥的惡性腫瘤。尋找新的治療方法來(lái)增加患者的生存率是一項(xiàng)重要的任務(wù)。先前的研究表明,在使用匹莫齊特（pimozide）治療黑色素瘤時(shí)并未取得滿意的效果,需要找到一種能增強(qiáng)這項(xiàng)治療療效的方法。吲哚胺2,3雙加氧酶（indoleamine-2,3-dioxygenase,IDO）是一種能產(chǎn)生免疫抑制作用的細(xì)胞內(nèi)限速酶,在黑色素瘤中顯著高表達(dá),可促進(jìn)包括黑色素瘤在內(nèi)的多種腫瘤患者發(fā)生免疫耐受。因此,我們提出將IDO抑制劑左旋甲基色氨酸（L-1-methyl tryptophan,L-MT）與pimozide聯(lián)合應(yīng)用抗黑色素瘤有可能是一種新的治療策略。目的探討pimozide聯(lián)合IDO抑制劑L-MT對(duì)黑色素瘤的作用及機(jī)制研究。方法1.細(xì)胞實(shí)驗(yàn)將狀態(tài)最佳的B16細(xì)胞鋪制細(xì)胞板,孵育24h。然后對(duì)照組加入PBS,實(shí)驗(yàn)組加入不同濃度的pimozide,分別在24h和48h時(shí),用顯微鏡記錄細(xì)胞的形態(tài);通過CCK-8試驗(yàn)檢測(cè)B16細(xì)胞的生存活力;通過細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)檢測(cè)藥物處理后細(xì)胞的遷移能力;應(yīng)用western blot檢測(cè)與細(xì)胞增殖、凋亡、遷移相關(guān)蛋白的表達(dá)。2.動(dòng)物... 

【文章來(lái)源】：新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院河南省

【文章頁(yè)數(shù)】：60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

pimozide對(duì)B16細(xì)胞生存活力的影響

圖 2.pimozide 對(duì) B16 細(xì)胞增殖和凋亡相關(guān)蛋白的影響不同濃度的 pimozide 作用于 B16 細(xì)胞。通過 western blot 實(shí)驗(yàn)分別對(duì)作用 24h（圖 A）和48h（圖 B）細(xì)胞的增殖和凋亡相關(guān)蛋白進(jìn)行分析，包括 p-Stat5、Stat5、Cyclin D1、PCNA、Cleaved Caspase 3 and Cleaved Caspase 7 等，Tublin 為標(biāo)準(zhǔn)蛋白。

26圖 3.pimozide 對(duì) B16 細(xì)胞遷移的影響圖 A.細(xì)胞劃痕試驗(yàn)：B16 細(xì)胞接種在 6 孔板中，對(duì)每孔中的單層細(xì)胞劃痕。這些圖像是pimozide 作用于 B16 細(xì)胞 0h, 24h 和 48h 時(shí)顯微鏡記錄拍攝劃痕情況；圖 B.對(duì)細(xì)胞劃痕試驗(yàn)的量化；圖 C 和 D.不同濃度 pimozide 作用 B16 細(xì)胞 24 h 和 48 h 后，通過 western blot 檢測(cè) B16細(xì)胞中 MMP2 表達(dá)；圖 E.對(duì) western blot 實(shí)驗(yàn)結(jié)果的量化。*, P < 0.05 ; **, P < 0.01 。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]靶向免疫治療聯(lián)合放射治療在晚期黑色素瘤中的研究進(jìn)展[J]. 羅小美,陳繼冰,牛立志.  中國(guó)腫瘤臨床. 2015(04)
[2]中國(guó)黑色素瘤診治指南（2011版）[J].   臨床腫瘤學(xué)雜志. 2012(02)



本文編號(hào)：3443470