目的觀察5-氮雜胞苷（5-azaC）對(duì)人角質(zhì)形成細(xì)胞增殖及誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（iNOS）表達(dá)的影響,并初步探討甲基化狀態(tài)與iNOS表達(dá)的關(guān)系。方法原代培養(yǎng)人角質(zhì)形成細(xì)胞,用濃度為1μM的5-azaC處理細(xì)胞24h,72h和120h,對(duì)照組細(xì)胞以PBS處理。通過MTT實(shí)驗(yàn)觀察細(xì)胞增殖活性的差異,RT-PCR及Western Blot分別檢測(cè)iNOS mRNA和蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果1.由MTT法繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線,1μM 5-azaC處理后人角質(zhì)形成細(xì)胞與對(duì)照組相比生長(zhǎng)速度減慢;2.所有對(duì)照組及1μM 5-azaC處理后24h人角質(zhì)形成細(xì)胞均未檢出iNOS mRNA/蛋白表達(dá);1μM 5-azaC處理后72h和120h人角質(zhì)形成細(xì)胞有iNOS mRNA/蛋白表達(dá),且120h表達(dá)量強(qiáng)于72h（P＜0.05）結(jié)論5-azaC可能通過降低人角質(zhì)形成細(xì)胞iNOS基因甲基化水平,從而導(dǎo)致其表達(dá),進(jìn)而抑制細(xì)胞增殖。 

【文章來源】：中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：43 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

人角質(zhì)形成細(xì)胞(倒i顯徽鏡X100)

第二章結(jié)果成細(xì)胞的鑒定以及細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線:成細(xì)胞的鑒定:壁法培養(yǎng)7一9d，人角質(zhì)形成細(xì)胞從組織周邊爬出，集較疏松。原代細(xì)胞培養(yǎng)15d左右后，細(xì)胞基本匯合;瓶底，細(xì)胞連成片狀呈典型的鋪路石樣(圖1一l)。以上細(xì)胞為角質(zhì)形成細(xì)胞(圖1佗)。單克隆鼠抗角對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞進(jìn)行鑒定，鏡下可見表達(dá)角蛋白細(xì)胞

人角質(zhì)形成細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線:狀況為，0一Zd呈潛伏期，2一6d呈活躍期，6一8d呈平臺(tái)00000000.9廠一一一一-—~一—-下下00000000.7卜聲000.6卜/州州0.5卜廠6660.4卜了000.3卜/000.2卜一了000.1卜000一一0001234567888

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3440166