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甲基化修飾抑癌基因MSX1抑制黑色素瘤細胞遷移和侵襲的研究

發(fā)布時間:2021-10-08 18:36
  目的探討MSX1在黑色素瘤細胞系和組織中表達和甲基化及對黑色素瘤細胞A375遷移/侵襲的影響和機制。方法 qRT-PCR和免疫組織化學法分別檢測MSX1在黑色素瘤細胞系和組織中的表達;甲基化PCR分析MSX1在黑色素瘤組織中甲基化;分別轉染pcDNA3.1(+)-Flag-MSX1質粒(實驗組)和pcDNA3.1(+)-Flag-Vector質粒(對照組)至A375細胞;Transwell遷移和侵襲實驗檢測MSX1對細胞遷移和侵襲的影響;RT-PCR驗證MSX1對上皮間質轉化及下游相關標志物的影響,免疫蛋白印跡實驗驗證MSX1對WNT/β-catenin信號通路的影響。結果與色素痣組織和細胞相比,MSX1 mRNA和蛋白在黑色素瘤細胞和組織中表達下調(P<0.001);MSX1甲基化水平表達上調,其甲基化程度明顯高于癌旁組織和正常色素痣組織。過表達MSX1后抑制細胞遷移和侵襲(P<0.001),而上皮間質轉化及下游相關標志物表達受到抑制。過表達MSX1能抑制WNT/β-catenin信號通路及其下游細胞因子的表達。結論 MSX1在黑色素瘤組織中表達下調,能抑制Wnt/β-c... 

【文章來源】:實用腫瘤學雜志. 2020,34(06)

【文章頁數(shù)】:7 頁

【文章目錄】:
1 資料與方法
    1.1 細胞培養(yǎng)和材料儀器
    1.2 臨床組織樣本
    1.3 實驗方法
        1.3.1 RNA和蛋白提取
        1.3.2 MSX1過表達載體構建,細胞轉染和在線數(shù)據(jù)分析
        1.3.3 qRT-PCR檢測MSX1在黑色素瘤中的表達
        1.3.4 免疫組織化學法
        1.3.5 甲基化PCR檢測MSX1在黑色素瘤中甲基化
        1.3.6 Transwell實驗檢測遷移和侵襲
        1.3.7 蛋白質免疫印跡實驗
    1.4 統(tǒng)計分析方法
2 結果
    2.1 MSX1在人黑色素瘤細胞系和組織中表達
    2.2 MSX1在人黑色素瘤中甲基化表達
    2.3 MSX1過表達表達對人黑色素瘤細胞遷移和侵襲的影響
    2.4 MSX1過表達表達對腫瘤干細胞標志物的影響
    2.5 重新表達MSX1對Wnt/β-catenin信號通路的影響
3 討論


【參考文獻】:
期刊論文
[1]CCNB1基因通過調控PI3K/Akt信號通路對口腔鱗癌細胞增殖、侵襲和遷移的影響[J]. 王璞,韋麗賓,倪廣曉.  實用腫瘤學雜志. 2020(02)
[2]WNT4在腦膠質瘤中甲基化下調及抑制惡性膠質瘤細胞增殖的研究[J]. 張巍,姜曉東,遲大鵬.  實用腫瘤學雜志. 2020(02)



本文編號:3424733

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