目的探討MSX1在黑色素瘤細(xì)胞系和組織中表達(dá)和甲基化及對(duì)黑色素瘤細(xì)胞A375遷移/侵襲的影響和機(jī)制。方法 qRT-PCR和免疫組織化學(xué)法分別檢測(cè)MSX1在黑色素瘤細(xì)胞系和組織中的表達(dá);甲基化PCR分析MSX1在黑色素瘤組織中甲基化;分別轉(zhuǎn)染pcDNA3.1（+）-Flag-MSX1質(zhì)粒（實(shí)驗(yàn)組）和pcDNA3.1（+）-Flag-Vector質(zhì)粒（對(duì)照組）至A375細(xì)胞;Transwell遷移和侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)MSX1對(duì)細(xì)胞遷移和侵襲的影響;RT-PCR驗(yàn)證MSX1對(duì)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化及下游相關(guān)標(biāo)志物的影響,免疫蛋白印跡實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證MSX1對(duì)WNT/β-catenin信號(hào)通路的影響。結(jié)果與色素痣組織和細(xì)胞相比,MSX1 mRNA和蛋白在黑色素瘤細(xì)胞和組織中表達(dá)下調(diào)（P<0.001）;MSX1甲基化水平表達(dá)上調(diào),其甲基化程度明顯高于癌旁組織和正常色素痣組織。過表達(dá)MSX1后抑制細(xì)胞遷移和侵襲（P<0.001）,而上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化及下游相關(guān)標(biāo)志物表達(dá)受到抑制。過表達(dá)MSX1能抑制WNT/β-catenin信號(hào)通路及其下游細(xì)胞因子的表達(dá)。結(jié)論 MSX1在黑色素瘤組織中表達(dá)下調(diào),能抑制Wnt/β-c... 

【文章來(lái)源】：實(shí)用腫瘤學(xué)雜志. 2020,34(06)

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【文章目錄】：
1 資料與方法
    1.1 細(xì)胞培養(yǎng)和材料儀器
    1.2 臨床組織樣本
    1.3 實(shí)驗(yàn)方法
        1.3.1 RNA和蛋白提取
        1.3.2 MSX1過表達(dá)載體構(gòu)建,細(xì)胞轉(zhuǎn)染和在線數(shù)據(jù)分析
        1.3.3 qRT-PCR檢測(cè)MSX1在黑色素瘤中的表達(dá)
        1.3.4 免疫組織化學(xué)法
        1.3.5 甲基化PCR檢測(cè)MSX1在黑色素瘤中甲基化
        1.3.6 Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)遷移和侵襲
        1.3.7 蛋白質(zhì)免疫印跡實(shí)驗(yàn)
    1.4 統(tǒng)計(jì)分析方法
2 結(jié)果
    2.1 MSX1在人黑色素瘤細(xì)胞系和組織中表達(dá)
    2.2 MSX1在人黑色素瘤中甲基化表達(dá)
    2.3 MSX1過表達(dá)表達(dá)對(duì)人黑色素瘤細(xì)胞遷移和侵襲的影響
    2.4 MSX1過表達(dá)表達(dá)對(duì)腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物的影響
    2.5 重新表達(dá)MSX1對(duì)Wnt/β-catenin信號(hào)通路的影響
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]CCNB1基因通過調(diào)控PI3K/Akt信號(hào)通路對(duì)口腔鱗癌細(xì)胞增殖、侵襲和遷移的影響[J]. 王璞,韋麗賓,倪廣曉.  實(shí)用腫瘤學(xué)雜志. 2020(02)
[2]WNT4在腦膠質(zhì)瘤中甲基化下調(diào)及抑制惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的研究[J]. 張巍,姜曉東,遲大鵬.  實(shí)用腫瘤學(xué)雜志. 2020(02)



本文編號(hào)：3424733